几种脂质体对Li-7肝癌细胞株的转染效率研究

目的比较Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体对Li-7肝癌细胞的转染效率。方法构建普通阳离子脂质体lipoplexes和载脂蛋白apoE修饰脂质体apoE-lipoplexes;使用Lipofectamine2000,lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体运载以EGFP为报告基因的pGenesil-1质粒转染Li-7肝癌细胞,通过荧光显微镜观察EGFP蛋白的表达,流式细胞术检测三种脂质体的转染效率。结果 Lipofectamine2000、lipoplexes和apoE-lipoplexes三种脂质体转染效率分别为(18.63±0.57)%,(24.07±0.91)%,(28.93±0.50)%,3组间两两比较均有显著性差异(P<0.01)。结论 Li-7肝癌细胞的转染效率与脂质体的结构有关,提示脂质体结构改造可能成为提高转染效率的新策略。     

人卵泡液蛋白质组学的研究进展

卵泡液是由卵母细胞、颗粒细胞和膜细胞等共同分泌的一种含多种蛋白质的生物液,其作为卵母细胞生长的微环境或培养基,直接影响到卵泡的发育和卵母细胞的成熟。过去十几年,对卵泡液蛋白质组学的研究主要集中于新蛋白筛选及疾病相关蛋白等的识别上。本文从卵泡液新蛋白的筛选、年龄相关生物学标志鉴定、确定卵泡成熟标志、疾病相关标志的筛选和体外受精(IVF)成功的标志等5方面介绍近年卵泡液蛋白质组学的相关研究。筛选和鉴定某些生殖和发育相关的关键蛋白,并可能成为卵泡液中的生物标志,可用于预测卵母细胞的质量、受精及胚胎发育潜能。     

子宫内膜中的成体干细胞

背景:近年来子宫干细胞尤其是子宫内膜干细胞研究有了新的突破,多个学者用不同方式证明了子宫内膜干细胞的存在。目的:介绍子宫干细胞存在的依据、位置及表面标志物。方法:应用计算机检索1995-01/2010-12清华同方数据库相关文章,检索词为"子宫内膜干细胞",并限定文章语言种类为中文。同时计算机检索PudMed数据库相关文章,检索词为"endometrium stemcell",并限定文章语言种类为English。共检索到文献233篇,最终纳入符合标准的文献30篇。结果与结论:近年来子宫内膜干细胞的分离与鉴定研究有了很大的进展,但子宫内膜干细胞的特异性标志物仍在探索中。文章就克隆形成能力、标记滞留细胞实验及组织重建能力等多种方法对子宫内膜干细胞存在的可能性,存在部位以及可能的表面标志物等进行了综述。     

脂联素球状结构域研究进展

脂联素球状结构域(gAd)与脂联素受体1(AdipoR1)有很高的亲和力,本文概述了其增加胰岛素的敏感性、抑制胰腺β细胞的凋亡、促进脂肪酸的氧化、抑制粥样硬化性疾病的生理学功能。     

富硒平菇对老年大鼠脾淋巴细胞凋亡及血清sIL-2R的影响

[目的]研究富硒平菇对老年大鼠脾淋巴细胞的凋亡和血清sIL-2R分泌的影响。[方法]健康18月龄Wistar大鼠66只,雌雄各半,随机分为对照组,富硒平菇A、B组,亚硒酸钠A、B组,普通平菇A、B组。与基础饲料同时给予:含0.4mg/kg或0.6mg/kg含硒量的富硒平菇或亚硒酸钠或等重量普通平菇。123d末处死,测定全血硒含量,血浆sIL-2R含量。流式细胞术检测脾脏淋巴细胞的凋亡情况。[结果](1)饲料添加0.4mg/kg和0.6mg/kg富硒平菇能升高全血硒含量;抑制脾淋巴细胞凋亡,并有剂量依赖关系。两组抑制率分别为31.62%和40.70%;(2)0.4mg/kg富硒平菇使血清sIL-2R含量降低,0.6mg/kg富硒平菇使其升高;(3)与同剂量亚硒酸钠组比较,富硒平菇A、B组脾淋巴细胞凋亡抑制率更高、sIL-2R含量更低。[结论]富硒平菇可抑制老年大鼠脾淋巴细胞凋亡,适量补充可降低sIL-2R分泌,并调节老年大鼠免疫功能。     

母亲解偶联蛋白(UCP2)基因多态性与后代神经管畸形的关系

目的:探索山西省母亲解偶联蛋白(UCP2)基因多态性与后代神经管畸形发生的关系。方法:采用1:1配对病例对照研究方法,对山西省116例曾孕育过NTDs患儿的母亲和116例配对的未孕育过任何畸形患儿的母亲采血并进行UCP2基因的多态性分析。结果:病例组母亲3’末端缺失纯合子基因型D/D显著高于对照组母亲(P0.01),而A55V基因多态性与NTDs无相关(P0.05)。结论:母亲UCP2基因第8外显子45bpD/I多态性可能是后代发生神经管畸形的遗传危险因素。     

构建靶向性载脂蛋白E修饰脂质体介导的HSVtk/丙氧鸟苷系统

背景：自杀基因系统无选择性,不仅能杀伤癌细胞,对正常细胞也有同样作用,所以构建靶向性基因治疗载体成为迫切需要解决的问题。 目的：评价载脂蛋白E修饰脂质体(apoE-lipoplexes)介导TK/丙氧鸟苷自杀基因质粒转染对Li-7肝癌细胞的杀伤效果。 方法：apoE-lipoplexes包裹pAFP-TK-IRES2-EGFP真核表达质粒转染Li-7细胞,筛选HSVtk稳定表达细胞克隆(Li-7-tk),荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白表达,Western blotting检测HSVtk基因表达,MTT法评价HSVtk/丙氧鸟苷系统对Li-7肝癌细胞的杀伤作用。 结果与结论：自杀基因质粒转染Li-7细胞经筛选得到稳定克隆(Li-7-tk),HSVtk/丙氧鸟苷系统作用于Li-7细胞后,细胞凋亡明显增加(P < 0.01)。在甲胎蛋白阳性的Li-7肝癌细胞中,自杀基因载体稳定表达并有效杀灭癌细胞。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程全文链接：     

γ-分泌酶在神经干细胞分化过程中的调节作用

背景:Notch信号通路在神经干细胞分化过程中起着关键作用,而γ-分泌酶是Notch信号通路调节的核心环节.目的:对神经干细胞分化过程中γ-分泌酶的活性、酶解产物Notch胞内段的生成量以及活性中心早老素1的表达进行检测.设计、时间及地点:细胞学基因水平榆测,于2008-10/200g-01在山西医科大学生物化学与分子生物学实验室完成.材料:清洁级胚龄15 d的BALB/c胎鼠由中国药品生物制品检定所提供,质粒Notch1 △E-GVP和MHl00山瑞典斯德哥尔摩诺贝尔医学学会的Urban Lendahl教授惠赠,荧光素酶质粒pRL-CMV为Promega公司产品.方法:体外分离培养胎鼠脑皮质神经干细胞,传至第5代后,按5×104/cm2密度接种到24孔板,每孔转染200 ngMH100,100 ng Notch1 △E-GVP和2ng pRL-CMV质粒.主要观察指标:利用GaH-VP16/UAS系统和双荧光素酶报告基因系统测定神经干细胞分化过程中γ-分泌酶的活性;通过Western blot技术榆测酶解产物Notch胞内段的生成量;采用实时荧光定量PCR法测定γ-分泌酶活性中心早老素1 mRNA的表达.结果:在γ-分泌酶抑制剂DAPT作用下,γ-分泌酶活性呈剂量依赖性降低,与对照组相比,0.1μmol/L DAPT即可对γ-分泌酶活性产生明显的抑制作用(P＜0.05),至50μmol/L DAPT时γ-分泌酶活性降低近100倍(P＜0.001).Notch胞内段的生成量也同步减少,与DAPT抑制γ-分泌酶活性呈剂量依赖性的结果一致.与对照组相比,早老素1 mRNA表达水平经0.1 μmol/L DAPT干预后开始升高,并随着DAPT浓度增加而逐渐升高.结论:神经干细胞分化过程中,γ-分泌酶抑制剂干预后γ-分泌酶活性与酶解产物生成量呈剂量依赖性降低,活性中心基因表达则呈反馈性的同步增高.     

变应性鼻炎鼻黏膜组织中NF-κB p50表达及其与DNA结合活性的研究

目的:探讨核转录因子-κB亚单位p50(NF-κB p50)在季节性变应性鼻黏膜中的表达及活性状态.方法:采用免疫组织化学方法检测16例季节性变应性鼻炎(SAR组)下鼻甲黏膜组织中NF-κB p50的表达,其中6例为非发作期患者,10例为发作期患者;并与10例鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜进行对照.采用电泳迁移率滞后分析(EMSA)检测鼻黏膜组织中核蛋白提取物与特异性NF-κB探针的结合活性.结果:NF-κB p50在SAR组及对照组中均有表达,p50阳性表达主要分布在2组鼻黏膜的上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的胞质和部分胞核中;SAR组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率发作期是(41.83 ±4.43)%,非发作期是(37.19±3.93)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率仅(8.89±1.32)%.SAR组(包括发作期和非发作期)与对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率间比较差异有统计学意义(P<0.01);SAR组NF-κB的DNA结合的32P标记电泳带密度扫描值为32.14±8.73,与对照组(11.12±3.42)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在对照组鼻黏膜中保持低水平的表达,在SAR鼻黏膜中表达显著增高,且其与DNA-蛋白结合活性增高,提示NF-κB p50可能参与维持鼻黏膜的生理功能,并在SAR鼻黏膜持续慢性炎症反应中起重要作用.     

社区老年人卫生服务有赖于全科医疗

目的探讨社区老年人慢性病的防治和管理。方法对长风地区100位≥60岁老年人健康影响因素进行调查分析。结果老年人各种慢性病患病率为82%。平均每位老年人患病1.62种。老年人对社区卫生服务需求中较迫切的是就近医疗占65%,健康教育,上门服务各占42%与40%。结论要进一步在全科医疗实践中探索老年社区卫生服务模式。建立以老年人为中心,家庭为单位,社区为范围,社区服务中心为基础的全方位检测的基础服务系统。对老年人实施三级监护,提供三级卫生服务,开展老年人健康教育,健康促进,改变不良的生活方式,改善健康功能,提高生活质量,降低医疗保健费用。