一株从酸奶中分离的德氏乳杆菌保加利亚亚种的鉴定和系统发育分析

目的对一株分离自酸奶经表型特征鉴定为德氏乳杆菌保加利亚亚种的菌株(wch9901)进行16S rDNA鉴定和系统发育分析。方法提取wch9901基因组DNA作为模板,以16S rDNA两端的保守序列作为PCR引物,扩增菌株的16S rDNA序列。在T4连接酶的作用下,将扩增得到的16S rDNA序列插入克隆载体pGEM-T,构建重组质粒pGEM-wch990116S rDNA。重组质粒酶切鉴定合格后,交由测序公司对插入的16S rDNA序列进行测序。测序结果于GenBank中Blastn,并用软件Mega3.1构建系统发育树。结果wch9901 16S rDNA序列与Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus中所有菌株的16S rDNA序列同源性均达96%以上;在系统发育树上wch9901单独形成一个分枝,位于Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus LGM2遗传分枝和Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus DL2所在的独立小遗传簇及Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus JSQ所在的独立小遗传簇构成的分枝之间,并与Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus LGM2遗传分枝距离最近。结论wch9901属于Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus;wch9901与Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus LGM2具有最近的亲缘关系。     

二氧化氯消毒粉性能的试验观察

为研究二氧化氯消毒粉的消毒相关性能,采用悬液定量杀菌试验和动物试验方法,对其杀菌效果和毒理学进行了实验室观察。结果,含二氧化氯100 mg/L该消毒粉的溶液对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作用2 m in,平均杀灭对数值均大于5.00;含100 mg/L二氧化氯的溶液对染于桌面上的大肠杆菌作用5 m in,平均降低对数值大于3.0。该消毒粉于54℃存放14 d后,平均二氧化氯下降率是5.03%。该二氧化氯消毒粉5倍最高使用浓度(含5000 mg/L二氧化氯)对小鼠急性经口毒性试验LD50大于5000 mg/kg.bw,属实际无毒类;含5000 mg/L二氧化氯溶液对家兔皮肤无刺激性;对小鼠骨髓嗜多染红细胞无致微核的作用。结论,该二氧化氯消毒粉具有良好杀菌作用,属于实际无毒类,性能稳定。     

细菌微菌落及其初步应用

作者用醋酸纤维素薄膜作载体,建立了一种新颖的、快速的、简单实用的微菌落技术,即将细菌接种于膜,培养3～6小时后,透明、固定、染色,观察微菌落形态或进行微菌落计数。使用该技术,对139株细菌的微菌落进行观察,积累了大量微菌落资料;借助微菌落特征,对72株葡萄球菌中的金黄色葡萄球菌进行鉴定,与常规法的符合率为90.28％;并首次将计数微菌落的方法用于临床尿液标本细菌的快速定量测定,与常规法比较,具有明显的优越性。     

新型肝炎病毒TTV的研究现况

肝炎是一种严重危害人类健康的传染病 ,目前已发现和确认的肝炎病毒有甲、乙、丙、丁、戊五种。然而 ,在临床实践中发现 ,仍有近 3.5 %～ 15 %的输血后和散发型肝炎病人无法用已知的病毒学标准检测进行确诊 ,称之为非甲 -非戊型肝炎 (none A- E hepatitis) [1 ] 。这些患者中包括急慢性肝炎患者、重症肝炎患者、输血后肝炎患者 [2 ] ,因而 ,国内外学者基本上均认为还存在某种尚未发现的肝炎相关病毒 ,众多研究者致力于此 ,于 1995年底 ,发现了庚型肝炎病毒HGV[3] ,但进一步的研究发现 ,HGV仍不能完全解释非甲-非戊型肝炎的发生 [4 ] 。…     

微量法快速培养计数尿液中的细菌

微量法快速培养计数尿液中的细菌沈一民，袁成良（成都军区总医院检验科６１００８３）裴晓方（华西医科大学公共卫生学院）尿液中培养出病原菌是尿路感染，肾盂肾炎等泌尿感染性疾病的主要诊断依据，而目的的尿培养所需时间较长，对临床诊治不能提供即时的报告依据，我们...     

成都市新婚育龄夫妇艾滋病性病预防的干预策略

以艾滋病为首的性病发病率逐年上升 ,尤其是艾滋病正以惊人的速度蔓延。这种迄今为止的不治之症严重威胁着人类的健康和生存。尽管我国现阶段ＨＩＶ感染率相对较低 ,但由于大部分人口相对较贫困、大规模流动人口增加、卖淫嫖娼现象增多、安全套使用率偏低、性病发病率增高 (如成都市在过去8年中性病发生率上升了 1 0 0 % )以及静脉吸毒人员增多等因素的存在 ,根据有关国家经验 ,在中国艾滋病从静脉吸毒者、暗娼等高危人群向一般人群的大规模流行即将出现。而普通人群并未认识到艾滋病性病对他们的威胁 ,缺乏正确的防范知识。因此迫切需要全…     

TaqManTM实时荧光PCR快速检测蜡样芽胞杆菌的初步研究

目的：建立实时荧光TaqMan^TM定量检测蜡样芽胞杆菌的快速检测方法，为食品中蜡样芽胞杆菌污染的调查及食物中毒的快速准确定量检测提供手段。方法：通过分析蜡样芽胞杆菌16SrDNA、23SrDNA、16S-23S ITS、gyrB、groEL、cereolysin AB、HBL（hblA、hblC、hblD）、NHE（nheA、nheC、nheD）、bce—T等目的基因，对比所选取的不同目的基因优缺点，最终选择合适的目的基因16S-23SITS进行同源性分析，并根据GenBank公布的蜡样芽胞杆菌16S-23SITS基因的保守序列，用引物与探针专业设计软件自行设计引物和TaqMan^TM探针，并利用硅胶模型^TM 基因组DNA提取法制备DNA标准品，通过对TaqMan^TM实时荧光PCR退火温度、探针浓度、引物浓度、Mg^2＋离子浓度、缓冲液浓度及酶用量等反应条件的优化，初步建立蜡样芽胞杆菌的实时荧光TaqMan^TM,陕速定量检测方法，并利用该方法对模拟样品进行检测。结果：选取的16S-23S ITS基因同源性达到99％以上，特异性好；所有蜡样芽胞杆菌均含有两段16S-23S ITS基因，有利于提高反应的灵敏度。通过对各实验条件的优化，得出蜡样芽胞杆菌TaqMan^TM实时荧光PCR的最佳反应条件，初步建立起实时荧光TaqMan^TM定量检测蜡样芽胞杆菌的快速检测方法，该方法能在3h左右完成整个检测过程。结论：实时荧光TaqMan^TM定量检测法不但灵敏度好，而且特异性高，检测时间短，能提高蜡样芽胞杆菌的检出率和检测准确性，可望应用于蜡样芽胞杆菌食物中毒的快速准确定量诊断。     

椒目油对SD大鼠灌胃给药的急性毒性研究

目的 探讨大鼠灌胃椒目油可能出现的急性毒性反应,为后续应用研究提供安全性参考。方法 将SD大鼠随机分为溶剂对照组（n=9）、最低剂量组（n=9）、低剂量组（n=9）、中剂量组（n=9）、高剂量组（n=10）、最高剂量组（n=10）,溶剂对照组灌胃玉米油,各剂量组椒目油灌胃剂量依次为0.813 4、1.626 8、3.253 5、6.507 0、13.014 0 g/kg,一次性灌胃给药,观察并记录给药后14 d内的毒性反应、体质量和摄食量变化情况。观察期结束后,对仍存活动物进行血液生理指标、血清生化指标、脏器系数及脏器组织病理学检查。结果 椒目油灌胃14 d后无大鼠死亡,各组大鼠体质量无明显变化（P>0.05）。与溶剂对照组比较,高剂量组14 d进食量增加（P<0.05）;最低剂量组、中剂量组、最高剂量组中性粒细胞百分比（neutrophil percentage, NEUT%）水平下降、淋巴细胞百分比（lymphocytes percentage, LYMPH%）水平上升（P<0.05）;最低剂量组、低剂量组、中剂量组肌酐（creatinine, CREA）水平下降...     

知识技能竞赛在卫生检验与检疫专业人才培养中的效果及思考

目的 总结四川大学举办的3届省级卫生检验与检疫知识技能竞赛的经验,探索知识技能竞赛在卫生检验与检疫专业人才培养中的重要作用。方法 举办3届知识技能竞赛, 分析竞赛的策划、实施、影响等。结果 打造了近年来西南地区影响力最高的卫检知识技能竞赛。3年的竞赛共有28支队伍参赛,共决出了团队一等奖3名（1名/届）,二等奖9名（2～4名/届）,三等奖15名（3～6名/届）。开展知识技能竞赛,通过以赛促训、赛训结合的方式,对规范学生基本实验操作,强化学生实践动手能力,培养学生分析解决问题的综合能力,提高学生的综合素质及就业竞争力起到积极作用。结论 知识技能竞赛是卫生检验与检疫专业人才培养的重要手段。     

福氏志贺菌4c亚型深圳分离株的生物学和分子特性分析

[目的]对深圳市首次分离的福氏志贺菌4c亚型菌株进行生物学和分子特性分析,了解该类新菌型生物学特征及分子特征。[方法]采用生化反应、血清学分型、刚果红侵袭试验、药敏分析等方法对患者、厨工肛拭及物体表面的17株福氏志贺菌分离株进行病原学分析,采用质粒图谱和毒力基因分析方法进行分子特性分析。[结果]所得到的福氏志贺菌4c亚型分离菌均分解葡萄糖产酸不产气,甘露醇阳性,血清学鉴定为福氏志贺菌IV型,7群菌株;刚果红侵袭试验均阳性;对氨卞西林、四环素、甲氧苄啶、阿莫西林耐药,而对阿米卡星、环丙沙星、庆大霉素、头孢噻肟、头孢噻吩和诺氟沙星敏感;所有菌株的质粒电泳图谱相同,但与F4a、F4b质粒电泳图谱差异较大;所有菌株均携带ipaH和set1基因,而仅有23.5%(4/17)的菌株携带ial和sen基因。[结论]该福氏志贺菌4c亚型深圳分离株的的生化、血清学鉴定结果与现有报道基本相符,该菌具备一定毒力。所有菌株均为同一来源,但4c亚型并非变异于F4a和F4b。ipaH和set1毒力基因携带情况与相关报道相符,ial和sen基因携带情况低于现有报道。