实验诊断学双语教学的实践与思考

为了适应现代医学教育的发展,提高医学生的综合素质,在实验诊断学教学的过程中,针对不同学制、不同专业的医学生应采用不同程度、不同比例的双语教学。本文就实验诊断学在实施双语教学中的几点策略并结合自己的实践进行了讨论。     

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者T细胞亚群及NK细胞水平的检测

目的检测阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者外周血T细胞亚群及NK细胞的水平,探讨OSAHS的细胞免疫功能。方法采用流式细胞仪检测66例OSAHS患者(其中轻度13例,中度17例,重度36例)以及20例健康体检者外周血CD3+、CD3+CD4+CD8-、CD3+CD4-CD8+以及NK细胞(CD3-/CD16+56+)水平。结果OSAHS组与正常对照组比较CD3+和CD3-/CD16+56+差异均无统计学意义(P>0.05);CD3+CD4-CD8+则明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);CD4+/CD8+与对照组比较有明显降低(P<0.05);中度与重度组CD3+CD4+CD8-的百分率比对照组有所降低,P值接近于0.05,而轻度组P>0.05;CD3+CD4-CD8-调节T细胞的百分率有所升高(P<0.05)。结论OSAHS患者体内的免疫细胞有改变,可能存在免疫功能的降低。     

留学生实验诊断学英语教学体会

为了提高留学生实验诊断学课程的教学质量,更好地达到培养目标,在医学留学生实验诊断学教学过程中,根据留学生与中国学生不同的基础知识特点和培养目标,制定适宜的教学计划和教学大纲,因材施教.对教学中教师语言运用能力的培养、教材的选择、教学内容的组织、多种教学方式的灵活运用等方面的情况进行总结和分析.     

嗅感觉神经细胞的分离与培养

目的 建立哺乳动物嗅感觉神经细胞体外培养的方法。方法取成年家兔的嗅区粘膜,用胰酶和胶原酶消化法进行嗅感觉神经细胞的分离与原代培养,并应用抗神经微丝蛋白(NFP)抗体、抗嗅觉标记蛋白(OMP)抗体进行免疫细胞化学染色,同时采用甲苯胺蓝神经特异性染色和扫描电镜对其进行鉴定。结果 从嗅粘膜分离以及原代培养得到的嗅感觉神经元,光镜、电镜下为典型的双极神经元,OMP、NFP阳性,神经元特异性染色阳性。分离的嗅感觉神经元可在体外存活数小时,其细胞形态、生存数量和存活时间均能满足体外实验的基本要求。结论 本实验在家兔建立了较稳定、可靠的嗅感觉神经细胞分离和原代培养方法。为深入开展嗅感觉神经细胞的离体研究,提供了较为理想的材料来源和技术保障。     

Id1 mRNA在卵巢癌患者内皮祖细胞中的表达及其临床意义

目的探讨卵巢癌患者内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）的数量及Id1 mRNA在内皮祖细胞中的表达情况及其临床意义。方法应用流式细胞术（FCM）测定42例卵巢癌患者（其中术前18例,术后24例）外周血中EPCs数量,同时分离培养鉴定卵巢癌患者的EPCs,采用RT-PCR技术检测EPCs上Id1 mRNA的表达情况,并与25例健康志愿者的外周血EPCs数量以及EPCs上Id1 mRNA表达进行对比研究和统计学分析。结果卵巢癌患者术前外周血中EPCs数量显著高于健康对照组（P〈0.01）;Id1 mRNA在卵巢癌患者外周血EPCs中呈现高表达（0.79±0.02）%,明显高于其在健康对照组中表达（0.46±0.03）%,（P〈0.05）。结论卵巢癌患者外周血中的数量较正常人明显增高,同时伴随有EPCs上Id1 mRNA高表达,提示Id1基因可能对EPCs有重要的动员功能,从而加速卵巢癌病人的生长和转移能力。     

血液科患者感染病原菌种类及耐药性分析

目的了解南方医科大学南方医院血液科患者分离病原菌种类及耐药性,为合理使用抗菌药物提供依据。方法细菌鉴定和药敏试验采用BD Phoenix100仪器。念珠菌利用显色平板鉴定和K-B法进行药敏试验。数据分析用WHONET5.6软件。结果血液科患者分离病原菌中最常见的为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、屎肠球菌和粪肠球菌。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶比例分别为56.1%和33.6%。金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌和表皮葡萄球菌甲氧西林耐药率分别为20.0%、88.0%和91.5%。革兰阴性杆菌中耐药率较低的为亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦。革兰阳性球菌对替考拉宁和利奈唑胺的敏感率均为100.0%,葡萄球菌属对万古霉素的敏感率也为100.0%。念珠菌对临床常用抗菌药物的耐药率均低于7.0%。结论南方医科大学南方医院血液科患者分离病原菌耐药率较高,应加强抗菌药物的合理使用,以降低耐药率。     

循环肿瘤细胞检测走近临床

循环肿瘤细胞(CTC)作为肿瘤转移的"种子",在肿瘤的早期辅助诊断、免疫治疗、预后评估等方面具有重要的临床应用价值。随着对CTC了解的不断深入,其应用研究已经从细胞数量走向了分子分型和细胞测序时代。然而CTC检测的标准化尚处于初步阶段,机遇和挑战并存。本文就CTC检测的现状及在临床应用中面临的挑战作一论述,并针对未来发展方向提出相关建议。     

食道鳞状上皮细胞癌转移体外细胞模型的建立

目的建立一个适宜的食道鳞状上皮细胞癌（ESCC）体外转移研究模型。方法将ESCC细胞系HK2置于未处理细胞培养皿中培养、传代,筛选出具有非锚定依赖生长能力的细胞株。以体外侵袭实验。软琼脂克隆形成实验比较、验证筛选细胞系与母代细胞的侵袭能力和非锚定依赖生长能力。利用比较蛋白质学的方法分析筛选细胞与母代细胞间的蛋白表达图谱差异。结果成功筛选出具有较高转移能力并可传代培养的HK2-AD细胞株。HK2和HK2-AD细胞侵袭至小室膜反侧的细胞数分别为（16．7±2．5）和（28．7±7．4）,软琼脂集落生成实验表明,HK2和HK2-AD细胞形成的集落数分别为（16．8±3．2）和（25±5．1）,差异均有统计学意义（P〈0．05）。HK2-AD细胞中一些与细胞运动、细胞无氧代谢及抑制凋亡相关的蛋白质分子表达明显上调。结论利用肿瘤细胞的非锚定依赖生长特性建立了一个高转移能力、呈三维生长的HK2-AD细胞株,为ESCC肿瘤转移机制研究和药物筛选提供了一个有价值且易于操作的食道癌转移体外细胞模型。     

APP17肽对Aβ25—35诱导神经细胞凋亡保护作用

目的：通过形态学和生化学指标观察APP17肽对Aβ25－35诱发SH－SY5Y细胞凋亡是否有保护作用。并对其保护作用机制作进一步的探讨。方法：选用细胞形态观察，半定量LM－PCR DNA ladder Assay和流式细胞仪定量测定细胞凋亡率的方法观察APP17肽是否对Aβ25－35诱发SH－SY5Y细胞凋亡有保护作用；通过测定细胞MTT代谢率，共聚焦显微镜观察Aβ25－35和APP17肽对细胞内过氧化物含量，线粒体膜电位的影响以及Western Blotting观察细胞内凋亡诱导因子AIF及核转录因子NF－κB的表达情况，探讨了APP17肽的保护作用机制。结果：APP17肽可以明显改善Aβ25－35造成的细胞形态损伤，显著降低细胞凋亡比率；与Aβ25－35损伤组相比，APP17肽预孵育能明显提高细胞MTT代谢率，稳定线粒体膜电位，减少AIF的表达；有效降低Aβ25－35引起的细胞内过氧化物含量增高；并且使具有神经保护作用的核转录因子NF－κB表达增加。结论：APP17肽可以稳定线粒体功能，降低细胞内过氧化物含量，激活NF－κB并使其持续表达，对Aβ25－35诱导的SH－SY5Y细胞亡有比较明显的保护作用。     

不同培养基对人脐静脉内皮细胞体外培养效果的影响

目的研究不同培养基对人脐静脉内皮细胞体外培养生长的影响,探讨内皮细胞的最佳体外扩增培养条件。方法取健康产妇分娩后脐带,用胶原酶Ⅰ消化后得脐静脉内皮细胞,进行原代培养,并用免疫荧光染色的方法对细胞进行鉴定,传代培养时则分别采用RPMI-1640培养基和EGM-2培养基,倒置显微镜观察两种培养条件下细胞的生长状态,同时利用流式细胞仪检测其生长周期,对比培养效果。结果 EGM-2组内皮细胞生长良好,2d后贴壁生长的细胞可达90%。EGM-2组S期细胞比例为(29.07±1.48)%,RPMI-1640培养基组S期细胞为(17.58±3.49)%,二者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 EGM-2培养基更适合人脐静脉内皮细胞的体外传代扩增培养。