重组人可溶性白细胞介素4受体蛋白抑制大鼠哮喘

目的探讨重组可溶性白细胞介素-4受体（IL-4R）对大鼠哮喘模型的影响。方法根据Gen Bank公布的Homo sapiens（human）IL-4R基因序列（XM₀05255309）,合成srh IL-4R基因片段,将合成基因片段插入p ET-28a（+）构建重组表达载体p ET-28a（+）-srh IL-4R,酶切鉴定后,将载体转入表达菌株BL21（DE3）进行诱导表达重组蛋白srh IL-4R,并用SDS-PAGE和Western-blotting方法分析重组蛋白。提取重组蛋白干预哮喘模型大鼠,取肺组织进行病理切片观察。结果重组载体p ET-28a（+）-srh IL-4R酶切获得长度为500bp⁷50bp的目的片段,表达载体p ET-28a（+）-srh IL-4R转入表达菌BL21（DE3）后经IPTG诱导表达出的重组蛋白经SDS-PAGE和Westernblotting方法可见重组蛋白分子量约为25k Da;重组人可溶性IL-4R蛋白干预哮喘大鼠可见肺组织炎细胞数量较模型组明显减少。结论 srh IL-4R防治哮喘具有一定作用。     

小半夏加茯苓汤对H22荷瘤小鼠的抑瘤及免疫调节作用

目的:探讨小半夏加茯苓汤对H22肿瘤的抑制作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法:建立H22荷瘤小鼠模型,观察小半夏加茯苓汤的抑瘤作用及瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况;同时检测免疫器官指数、T淋巴细胞增殖功能和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:小半夏加茯苓汤高剂量对小鼠H22移植瘤有明显抑制作用,抑瘤率为13.7%,PCNA蛋白表达与对照组比较差异有显著性,同时脾脏指数、脾细胞刺激指数和血清中TNF-α等指标均显著高于对照组.结论:小半夏加茯苓汤可以抑制模型鼠肿瘤的生长,增强荷瘤小鼠的免疫功能.其机制可能是通过激活免疫细胞、调节机体的免疫功能达到有效控制肿瘤细胞增殖的作用.     

小半夏加茯苓汤抗S180肉瘤及免疫调节的研究

目的:探讨小半夏加茯苓汤时S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响.方法:建立S180荷瘤小鼠模型,观察小半夏加茯苓汤的抑瘤作用及瘤组织中PCNA蛋白表达情况;同时检测免疫器官指教、T淋巴细胞增殖功能和血清中TNF-α含量.结果:小半夏加茯苓汤高剂量对S180肿瘤的生长有明显抑制作用,抑瘤率为13.7%;与荷瘤对照组相...     

银杏果抗真菌肽基因(GZ-gb)原核表达载体的构建

目的 为了构建贵州银杏果抗真菌肽基因(GZ-gb)的表达载体.方法 采用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切的pMD18-T-GZ-gb和pET32a(+)质粒,纯化回收产物进行反应,将连接产物pET32a(+)-GZ-gb转化大肠杆菌感受态细胞DH5a后,经菌落PCR、酶切鉴定和测序.结果 表明目的片段成功插入表达载体.结论 pET32a(+)-GZ-gb可以用来制备抗真菌蛋白.     

银杏果抗真菌肽基因(GZ-gb)克隆与序列分析

目的 对贵州银杏果抗真菌肽基因(GZ-gb)进行克隆与序列分析.方法 通过RNA抽提试剂盒提取贵州银杏果果仁的RNA并以之为模板,采用RT-PCR技术扩增出银杏果抗真茵肽基因(GZ-gb),经克隆和测序并通过BLAST分析.结果 测序结果与GenBank中公布的序列编码银杏抗真菌蛋白的基因序列(FJ865399)同源性达97％.结论 测出贵州银杏果抗真菌肽基因序列并证明其与GenBank中公布的银杏抗真菌蛋白的基因序列具有同源性,为其具有的中医药“平喘咳,止带浊”疗效提供理论依据,还能为进一步研制新型的抗真菌药物奠定基础.     

四维教学模式在病原生物与免疫学教学实践中的应用与探索

教学模式是在一定的教育思想、教学理论、学习理论的指导下,在一定环境下展开的教学活动进程的稳定结构形式,是开展教学活动的一套方法论体系,是基于一定教学理论而建立起来的较稳定的教学活动的框架和程序.是教学目的、教学内容、教学方法、教学手段、教学评价等的总体概括.在多年的病原生物与免疫学教学中,本研究室对教学模式进行了比较深入和系统的探索,总结出"教学-科研-临床-德育"相结合的四维教学模式.     

白蔹醇提物免疫活性的初步研究

目的:研究白蔹醇提物对小鼠免疫功能的影响,探讨白蔹抗感染的免疫活性机制。方法:用白蔹醇提物5g/kg,1 0g/kg,2 0g/kg对小鼠进行灌胃给药7天后,分别测定对照组和给药组小鼠外周血淋巴细胞ANAE阳性率、脾淋巴细胞增殖能力、腹腔巨噬细胞吞噬功能。结果:白蔹醇提物对小鼠外周血淋巴细胞ANAE阳性率、脾淋巴细胞增殖能力、巨噬细胞吞噬功能均有促进作用(P <0 . 0 5或P <0. 0 1 ) ,并随剂量增加而作用增强,量效呈正相关。结论:白蔹醇提物对小鼠免疫功能有增强作用,推断与其可临床应用于抗感染治疗有关。     

仙茅多糖对RAW264.7细胞的促活化作用及对细胞表面Dectin-1受体表达的影响

目的探讨仙茅多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞的促活化作用及对细胞表面Dectin-1受体表达的影响。方法采用不同浓度的仙茅多糖(500,250,125,62.5,31.25μg/ml)处理细胞36h,MTT法测细胞活性,ELISA法测TNF-α分泌量,Griess法测NO的分泌量,qRT-PCR测细胞Dectin-1 mRNA的相对表达量。采用Dectin-1受体抑制剂昆布多糖(终浓度为50和100μmol/ml)对细胞预处理2h后,再用仙茅多糖刺激,qRT-PCR测细胞TNF-α和i NOS mRNA的相对表达量,流式细胞术检测细胞吞噬FITC标记的大肠杆菌的能力。结果 RAW264.7细胞受到仙茅多糖刺激后,Dectin-1 mRNA表达量较正常对照组显著增加(P0.01或P0.05),且在一定范围内存在量-效关系和时-效关系;与正常对照组相比,仙茅多糖对RAW264.7细胞的吞噬功能和分泌活性因子TNF-α和NO的能力有提升作用(P0.01或P0.05),这种作用可以被Dectin-1受体抑制剂昆布多糖阻断。结论仙茅多糖可以增强RAW264.7细胞的吞噬功能和分泌活性因子TNF-α和NO的能力,从而促进细胞活化,其机制可能与细胞表面Dectin-1受体有关。     

黄连解毒汤对小鼠T细胞组成及肠粘膜中细胞因子表达的影响

目的:探讨黄连解毒汤对KM小鼠T细胞组成及肠粘膜中细胞因子表达的影响。方法:用黄连解毒汤灌胃小鼠7d和14d后分别采集相关样本,ELISA法测定小鼠回盲段肠粘液中sIgA、IL-6及IL-22表达水平;流式细胞仪检测小鼠脾脏中CD3~+T、CD4~+T和CD8~+T含量。结果:与空白组相比,黄连解毒汤给药组CD3~+T含量明显升高,CD4~+T和CD8~+T含量则明显降低,灌胃7d与14d对于给药组CD3~+T、CD4~+T和CD8~+T含量无明显变化;黄连解毒汤给药组sIgA浓度明显升高,IL-6含量则明显降低,灌胃7d与14d对于给药组sIgA含量无明显变化,IL-6变化不明显,IL-22于7d升高而于14d降低,具有极显著差异(P0.01)。结论:黄连解毒汤能促进CD3~+T和sIgA分泌,抑制CD4~+T、CD8~+T和IL-6分泌和表达,对IL-22的表达则具有先促进后抑制的作用。     

黄芪含药血清对幽门螺杆菌空泡毒素活性的影响

目的：观察黄芪含药血清能否有效抑制体外幽门螺杆菌（hel i cobact er pyl ori,Hp）空泡毒素（VacA）的活性,从而探讨其抗菌机制。方法：将HP菌株培养上清液制成粗制VacA蛋白,经倍比稀释后（1∶32～1∶1）,选择1∶2滴度与不同浓度黄芪含药血清共同作用于胃癌SGC-7901细胞,观察胃癌细胞形态变化,采用中性红摄入法（NRU）评价空泡活性。结果：黄芪含药血清对VacA活性有显著抑制作用,含药血清小剂量组NRU检测其空泡活性A550=0.228±0.029,显微镜下计数空泡形成率为78.75%±8.539%,与阴性对照组比较差异有显著性（P〈0.05）,随血清含药浓度的增加A550和空泡形成率逐渐降低;含药血清大剂量组A550=0.127±0.047,空泡形成率为32.25%±10.21%,与阴性对照组比较差异有极显著性（P〈0.01）,与阳性对照奥美拉唑组比较差异无显著性（P〉0.05）;含药血清大剂量组与中剂量组A550比较,差异无显著性（P〉0.05）,与小剂量组比较差异有显著性（P〈0.05）,可见黄芪含药血清对空泡毒素的抑制作用具有浓度依赖性。结论：黄芪对HP VacA活性具有明显的抑制作用,且该抑制作用具有一定的浓度依赖性。