Nogo-66受体RNA干扰质粒的构建及其干扰效率鉴定

目的 构建及筛选高效率针对Nogo-66受体(Nogo-66 receptor, NgR) 进行RNA干扰(RNAi)的质粒.方法 RT-PCR克隆NgR,插入表达质粒中,构建NgR-GFP融合蛋白表达质粒.根据NgR序列,设计4对针对NgR mRNA进行RNAi的寡核苷酸.退火后,插入短发夹RNA(short hairpin RNA, shRNA)表达质粒中,构建shRNA表达质粒.将NgR-GFP融合蛋白表达质粒与shRNA表达质粒共转染AAV-293细胞.通过对GFP表达量的观察及Western blotting定量检测NgR-GFP融合蛋白表达量,鉴定shRNA表达质粒对NgR的干扰效率.结果 针对NgR进行RNAi的4个序列中,有1个序列的干扰效率大于90%以上.结论 成功构建了1个针对NgR的高效RNAi表达质粒.     

缺氧及缺氧复合运动大鼠心肌酶适应性变化

本文通过观察慢性缺氧及缺氧复合运动大鼠心肌有氧氧化和无氧酵解代谢酶活性变化及其特点，探讨缺氧复合运动与高原习服适应机制的关系。作者选取24只雄性健康Wistar大鼠，并随机分为4组：平原对照组、单纯缺氧组、平原运动组和缺氧复合运动组。缺氧复合运动组大鼠持续暴露于模拟海拔5000m低压舱内5周，每天将低压舱模拟海拔高度调至4000m进行游泳运动1小时（6天／周），     

急、慢性缺氧对大鼠脑线粒体ATP合成酶、mtRNA转录和蛋白翻译活性的影响

目的 :线粒体是一种半自主性细胞器 ,不仅含有自身的遗传信息 (ｍｔＤＮＡ) ,而且有一套相对独立的自身ＲＮＡ转录和蛋白翻译体系。由于线粒体是消耗氧和产生能量 (ＡＴＰ)的主要场所 ,因此 ,线粒体能量合成与其半自主性有密切关系。脑组织是对缺氧最敏感的组织 ,缺氧所致中枢神经系统功能障碍又是急性脑型高山病发生的直接原因。本文探讨缺氧时脑功能障碍的机制和线粒体半自主性与ＡＴＰ合成的关系。方法 :雄性Ｗｉｓｔａｒ系大鼠随机分为未缺氧 (对照 )组、急性缺氧组 (模拟海拔 40 0 0ｍ高源连续缺氧 72ｈ)和慢性缺氧组 (模拟海拔 40 0 0…     

缺氧及缺氧复合运动大鼠心肌酶适应性变化

目的:探讨缺氧及在缺氧条件下运动对大鼠心肌代谢酶活性的影响。方法:24只Wistar大鼠随机分为4组:平原对照组、单纯缺氧组、平原运动组和缺氧复合运动组。缺氧复合运动组大鼠持续暴露于模拟海拔5000m低压舱内5周,每天将低压舱模拟海拔高度调至4000m进行游泳运动1小时(6天/周),运动结束后调至模拟海拔5000m;单纯缺氧组大鼠在低压舱内相同模拟海拔高度饲养,但不进行游泳运动;平原运动组和平原对照组在平原环境下饲养,其中平原运动组每天游泳运动1小时(6天/周)。实验5周后末次运动结束后24小时处死大鼠,分离左、右心室,称重并计算左、右心室重量指数。组织匀浆测定左、右心室己糖激酶(HK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、柠檬酸合成酶(CS)和乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果:与平原对照组比较,单纯缺氧组和缺氧复合运动组大鼠右心室重量指数、Hermann-Willson指数显著增加,缺氧复合运动组大鼠左心室指数显著增高。单纯缺氧组大鼠左心室肌组织氧化酶SDH、CS活性降低,而缺氧复合运动组与对照组比无显著差异,缺氧复合运动组CS活性与缺氧组比较显著增加。与平原对照组比较,单纯缺氧组大鼠右心室HK、CS、LDH活性显著降低,缺氧复合运动组LDH活性较单纯缺氧组无显著差异,CS、SDH活性则显著增加。结论:长期缺氧使心肌组织氧化酶和糖酵解酶活性不同程度降低,缺氧复合运动后酶活性恢复或增加,表明在缺氧条件下适度运动,可调节有氧氧化和无氧酵解酶活性,增强机体对缺氧环境的代谢适应性。     

自制眼罩在新生儿光疗中的运用

光照疗法是新生儿高间接胆红素患儿最主要的治疗方法,在治疗过程中,强烈的光线对患儿的眼睛有一定的损害.在进行光照疗法时,需要保护新生儿的眼睛.长时间以来我科一直用胶布固定黑布于患儿眼部作为眼罩.但这种方法易使胶布粘住患儿头发,不易拆除眼罩,还容易引起新生儿娇嫩的皮肤过敏,起红疹.在使用过程中,由于患儿头部不停地活动,还容易引起眼罩松动.为解决这一问题,我们对眼罩的使用及固定进行了改良,投入使用后效果满意.     

急进高原前缺氧预适应措施研究进展

缺氧预适应是缩短急进高原部队习服时间,降低急性高原病发病率,改善部队军事作业能力的有效措施.文章围绕影响缺氧预适应效果的主要因素和缺氧预适应过程中是否应复合运动训练,缺氧预适应效果的判断、保留时间等问题进行了综述,并就缺氧预适应的可能机制以及可能的副作用等进行了阐述,提出急进高原部队进入高原前进行模拟海拔4000 m以上预缺氧,每天1.5h以上,重复5～7d,并在2d内进入高原可能会有较好的促进高原习服的效果.     

大鼠脑线粒体生物大分子合成过程中能量需求的研究

目的：探讨线粒体内RNA和蛋白质合成过程澡的能量需求及其ATP的调节作用。方法：组织匀浆－梯度离心法分离并纯化大鼠脑皮质线粒体,氧电极法鉴定线粒体氧化呼吸及其偶联活性;体外无细胞（Cell-free in vitro)线粒体,^3H-UTP和3H－Leucine掺入法分别测定细胞器的转录与翻译活性。结果：线粒体RNA和蛋白质合成中所需的ATP可来自线粒体自身氧化产生外源ATP的加入可使转录活性增加3．7倍,而翻译活性仅提高17％,在既无外源ATP加入又无内内源性产生时,线粒体蛋白翻译活性仍为最大活性的53．1％;ATP浓度对RNA和蛋白质合成的影响呈双相性,1mmol/L时转录以及翻译活性最高,高浓度或低浓度均产生浓度依赖性抑制效应。结论：ATP可在转录与翻译两个水平影响线粒体RNA和蛋白质合成,ATP对mDNA表达的调节是一种经济,积极有效的反馈调节方式。