小鼠人白细胞抗原异基因皮肤移植后的机体免疫应答

目的 探讨人白细胞抗原(HLA)致敏后机体免疫应答,为寻找有效手段阻断抗体介导排斥反应(AMR)提供实验依据.方法 以转HLA-A2.1基因小鼠为供体,野生型小鼠为受体行2次皮肤移植建立HLA致敏小鼠模型,观察致敏小鼠体内各种免疫应答变化.结果 皮肤移植致敏后小鼠体内IgG显著升高,28 d达高峰[(14.10±0.47μg/L,酶联免疫吸附试验(ELISA)],以IgG2a为主[(449.4±113.5)μg/L,莱姆德抗原板法],伴外周血、脾脏及骨髓中各种淋巴细胞组成的变化;2次移植皮肤存活天数较第1次显著缩短[(3.0±0.7)d比(10.0±1.3)d];HLA-A2单一抗原致敏可诱导产生多种抗体,并对表达HLA-A2靶细胞具细胞毒作用.结论 HLA-A2致敏可诱导受体产生高水平IgG2a,与多种Ⅰ类HLA存在交叉反应,伴有B及T淋巴细胞的激活,导致移植后受体发生AMR.

Abstract：

Objective To understand the immune response changes in human leukocyte antigens (HLA) sensitized individuals in order to find out effective treatment for antibody-mediated rejection (AMR). Methods A HLA sensitized mouse model was established by skin graft using HLA-A2. 1 transgenic mice as donors and wild type mice as recipients. Different immune responses were studied in the sensitized recipients. Results Sensitizing mice with skin grafts from HLA-A2. 1 transgenic mice resulted in robust production of anti-HLA IgG, peak in 28 d[( 14. 10 ±0. 47) μg/L, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)], mainly IgG2a[(449. 4 ± 113.5) μg/L, LATM120], accompanied by changes in the constitution of different B and T lymphocytes in peripheral blood, spleen, and bone marrow, also accelerated rejection of a secondary skin allograft[2nd graft survival day (3.0 ± 0. 7 ) d vs 1 st graft survival day ( 10. 0 ± 1.3 ) d]. Sensitization of recepients with single HLA-A2 induced antibodies which had cross reaction with a panel of class Ⅰ HLA. These antibodies had cytotoxic effect targeting HLA-A2 expressing cells.Conclusion HLA-A2 sensitization resulted in abundant production of IgG2a accompanied by activation and proliferation of different B and T lymphocytes. These antibodies cross-reacted with a panel of class Ⅰ HLA, and may be the cause of AMR after allogenic skin graft.     

快速康复外科促进术后胰岛素敏感性的恢复

Background  Few clinical studies or randomized clinical trial results have reported the impact of fast track surgery on postoperative insulin sensitivity. This study aimed to investigate the effects of fast track surgery on postoperative insulin sensitivity in patients undergoing elective open colorectal resection.

Methods  Controlled, randomized clinical trial was conducted from November 2008 to January 2009 with one-month post-discharge follow-up. Seventy patients with colorectal carcinoma requiring colorectal resection were randomized into two groups: a fast track group (35 cases) and a conventional care group (35 cases). All included patients received elective open colorectal resection with combined tracheal intubation and general anesthesia. Clinical parameters (complication rates, return of gastrointestinal function and postoperative length of stay), stress index and insulin sensitivity were evaluated in both groups perioperatively.

Results  Sixty-two patients finally completed the study, 32 cases in the fast-track group and 30 cases in the conventional care group. Our findings revealed a significantly faster recovery of postoperative insulin sensitivity on postoperative day 7 in the fast-track group than that in the conventional care group. We also found a significantly shorter length of postoperative stay and a significantly faster return of gastrointestinal function in patients undergoing fast-track rehabilitation.

Conclusion  Fast track surgery accelerates the recovery of postoperative insulin sensitivity in elective surgery for colorectal carcinoma with a shorter length of postoperative hospital stay.

     

蛋白质组学检测β-原肌球蛋白在结肠癌组织中的表达

目的：通过比较结肠腺癌与正常结肠黏膜的蛋白质组表达差异,寻找与结肠腺癌发生相关的蛋白质,筛选结肠癌诊断的分子标志物。方法: 运用蛋白质组学技术,对8例结肠腺癌组织和8例正常结肠黏膜组织进行胶内差异双向电泳（2-D）,选择差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物信息学分析,并对结肠癌组织中表达下调的蛋白β-原肌球蛋白(TM β)进行Western blotting验证。结果: 成功建立结肠腺癌和正常结肠黏膜的双向凝胶电泳图谱,结肠腺癌和正常黏膜组织凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3 289和3 066,其中表达差异超过2倍的斑点共有31个,质谱分析和数据库检索共鉴定出18种蛋白质,包括cytokeratin 8、cytokeratin 10、S100A6、TM β、protein disulfide isomerase 等。从功能分析,这些差异蛋白与癌细胞的发生、增殖、分化、转移等相关;TM β在结肠癌组织中的表达水平Western blotting结果与电泳结果一致。结论: 蛋白质组学能有效地分离和鉴定结肠腺癌组织与正常结肠组织间的差异表达蛋白质,结肠癌组织中表达下降的TMβ,可能成为结肠癌诊断的分子标记物。     

进展期胃癌腹腔镜辅助远端胃切除D2+淋巴结清扫中山大学附属第一医院胃肠外科中心,中山大学胃癌诊治中心

腹腔镜手术以其良好的远期疗效和微创优势已成为早期胃癌的标准治疗手段之一.KLASS-01是韩国一项Ⅲ期、多中心随机对照研究,比较腹腔镜辅助远端胃切除术(LADG)和开放性远端胃切除术(ODG)对临床Ⅰ期胃癌患者的长、短期影响. 该研究共纳入1416 例Ⅰ期胃癌患者,其中LADG 组705 例,ODG组711例.主要研究终点是5年总体生存(OS).次要研究终点是通过比较术后30天并发症率和手术死亡率来评价LADG的安全性.结果示LADG组的总并发症率显著低于ODG组,其中LADG组的切口并发症明显低于ODG组.手术安全性评估方面两组间无显著差异.故此研究认为LADG对于临床I期胃癌是安全的治疗选择,且较传统ODG切口并发症率低. KLASS-01的长期随访结果显示在早期胃癌中腹腔镜手术的远期疗效与开腹手术比较差异无统计学意义.     

局限进展期胃肠间质瘤行伊马替尼术前辅助治疗23例疗效分析

目的 探讨局限进展期胃肠间质瘤（GIST）行伊马替尼术前辅助治疗的有效性和安全性。方法 回顾性分析中山大学附属第一医院2008年1月至2013年12月确诊为局限进展期GIST并接受伊马替尼术前辅助治疗的23例病人的临床病理资料。结果 术前伊马替尼治疗中位时间为6（1～18）个月,22例400 mg/d,1例600 mg/d持续口服。22例获得有效的影像学评价,其中,19例（86.4%）影像学评价为部分缓解［1例术后证实病理学完全缓解（4.5%）;实际部分缓解18例（81.8%）］;疾病稳定3例（13.6%）。无原发耐药进展的病人。经过术前治疗,肿瘤缩小中位数为4（0～9）cm。伊马替尼术前停药时间为7（5～14）d。伊马替尼术前治疗期间,3级或以上不良反应发生率26.1%（6/23）,其中3级粒细胞减少2例,4级药疹1例,消化道出血3例（1例死亡）。手术完整切除22例。术后发生3级以上手术相关并发症2例（9.1%）,均为术后延迟性胃排空,均经保守治疗后治愈。22例病人中,KIT基因外显子11突变18例（81.8%）,KIT基因外显子9突变3例（13.6%）,KIT和PDGFRA野生型1例（4.5%）。20例病人术后接受辅助治疗,辅助治疗中位时间25（4～74）个月。随访中位时间为50（39～105）个月。预计术后5年无病存活率和总存活率分别为65.6%和80.5%。但单因素及多因素Cox回归分析显示,术后无进展生存及总生存时间与各种因素无相关性。结论 伊马替尼术前辅助治疗局限进展期GIST总体耐受良好,有助于缩小手术范围,严重不良反应发生率低,治疗期间应注意观察和合理处理药物副反应。伊马替尼术前辅助治疗能否改善GIST病人总生存期尚待进一步大样本研究。     

吻合器痔上黏膜环形切除术治疗重度痔核80例

目的:总结重度痔核手术的经验,分析各种方法的优缺点.方法:回顾性分析80例重度痔核患者行吻合器痔上黏膜环形切除术(PPH)(治疗组)80例和92例行外剥内扎术患者(对照组)的疗效和并发症情况.结果:治疗组与对照组相比,手术时间明显缩短(14～20 min),疼痛持续时间短(1～2 d),术后住院时间缩短(2～4d),术后并发症少,术后复发少.结论:PPH术治疗重度痔核明显优于外剥内扎术.     

术前血胆固醇水平与结直肠癌加速康复外科术后疼痛的相关性研究

目的探讨结直肠癌患者术前血清总胆固醇水平与加速康复外科（ERAS）术后疼痛情况的相关性。 方法回顾性分析2016年10月至2018年10月在中山大学附属第一医院胃肠外科中心围手术期实施ERAS方案的121例结直肠癌患者,依据术前血清总血胆固醇水平分为低胆固醇组（女<4.35 mmol/L,男<4.10 mmol/L）、中胆固醇组（女4.35~5.30 mmol/L,男4.10~4.70 mmol/L）、高胆固醇组（女>5.30 mmol/L,男>4.70 mmol/L）。比较3组患者术后0~3 d NRS疼痛评分、疼痛控制不良（NRS≥5分）发生率的差异。 结果患者术后疼痛发生率为98.3%（119/121）,疼痛控制不良发生率为12.4%（15/121）,其中低胆固醇组疼痛控制不良发生率为21.1%（8/38）,显著高于中胆固醇组的6.4%（3/47）和高胆固醇组的11.4%（4/35）（χ²=9.458,P=0.003）。3组间术后0~3 d的疼痛NRS评分差异无统计学意义（χ²=0.135,P=0.405）。Logistic回归分析显示,患者术前血清总胆固醇水平与术后疼痛控制不良发生率呈负相关关系（β=-0.212,OR=0.921,P<0.05）。 结论术前低血胆固醇水平可能会增加术后疼痛控制不良发生的风险,检测术前血清总胆固醇水平有利于结直肠癌ERAS术后的个性化疼痛控制管理。     

不同部位可根治性胃癌病理特征外科处理方式及预后因素比较

目的 比较不同部位可根治性胃癌的病理特征、外科处理方式及预后影响因素。 方法 中山大学附属第一医院胃肠胰外科对1999年8月至2006年3月诊治的356例临床病理数据完整、无远处转移、并接受根治手术的原发性非全胃癌,依肿瘤部位分为胃上部癌(U,96例)、胃中部癌(M, 93例)、胃下部癌(L, 167例) 3组,对其临床病理特征、外科处理方式、预后影响因素进行分析比较。结果 不同部位癌的肿瘤直径、浆膜浸润、淋巴结转移状况、TNM分期、组织分型、术前癌胚抗原（CEA）值等差异无统计学意义(P >0.05)。U、M、L部癌的中位生存期分别为49.0、70.1、70.9个月;U部癌预后差于其他组(P <0.05)。胃癌总体的独立预后因素包括术后病理分期（pTNM）、Borrmann分型、根治方式;U部癌的独立预后因素为pTNM、根治方式;M部癌的独立预后因素为pTNM、Borrmann分型;L部癌的独立预后因素为pTNM、根治方式。结论 不同部位可根治性胃癌的病理特征、预后影响因素不同,外科处理方法应区别对待。     

结肠腺癌与腺瘤的蛋白质组表达差异

目的 通过比较结肠腺癌与结肠腺瘤组织的蛋白质组表达差异,寻找结肠腺癌相关的蛋白质,筛选结肠癌早期诊断的分子标志物.方法 应用蛋白质组学技术,对8例结肠腺癌组织和8例结肠腺瘤组织进行胶内差异双向电泳(2-D),选择差异表达超过2倍的蛋白点进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物学信息分析.结果 成功建立结肠腺癌和结肠腺瘤的双向凝胶电泳图谱,结肠腺癌和腺瘤组织凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3289和2986,其中表达差异超过2倍的斑点共有31个,质谱分析和数据库检索共鉴定出18个蛋白质,包括keratin 8、S100A6、protein disulfide isomerase等.结论 蛋白质组学可提示结肠腺癌与腺瘤组织间的蛋白质表达差异,而对相关差异表达蛋白的研究有可能为结肠癌的早期诊断和治疗提供新的分子标记物.     

胃近端和远端癌的预后比较及其原因分析

目的探讨胃近端、远端癌的临床和预后的差异及其原因。方法将我院1994年6月至2001年6月经手术治疗的365例胃癌患者的临床、病理及定期随访资料输入数据库,对其一般临床资料、预后因素及生存率进行分析。结果胃近端、远端癌的发病年龄差异无显著性意义(P=0.052),但胃近端癌男性发病的比例较高。标本大体分型中,两组Borrmann分型差异无显著性意义(P=0.6),但胃近端癌的TNM分期较晚,特别是淋巴结转移率明显高于胃远端癌,组织分化类型则无明显差别。虽然胃近端癌全胃切除率较高,但手术并发症发生率和死亡率并无明显增高。胃近端癌手术后的生存率较胃远端癌低。结论胃近端癌预后较胃远端癌差,其重要原因可能与肿瘤的位置特殊、出现症状较晚及就诊时肿瘤分期较晚有关,而与手术并发症发生率和手术死亡率无明确的关系。