胎盘免疫调节因子的研究进展

紫河车(即人的胎盘,human placenta)是传统中药,又称为胞衣、人胞.紫河车在民间入药已有几千年的历史,其味甘、成、温,入肺、肝、肾经,具有益气养血、补肾益精之功效.其临床应用广泛,常用于虚劳赢弱、盗汗、肺肾两虚之咳嗽气喘,肾气不足、精血衰少之阳痿遗精、不育、不孕、少乳.现代药理研究与临床应用表明其具有抗感染、调节体液免疫、催乳、促胎儿发育、抗变态反应和治疗不育不孕、神经衰弱等作用[1].     

神经生长因子的提取及其对MGC-803细胞的凋亡作用

目的:从广西眼镜蛇蛇毒中提取神经生长因子(nerve growth factor,NGF)并探讨其对人胃癌MGC-803细胞的生长抑制作用.方法:①粗毒采用Sephadex G75 凝胶过滤及CM Sepharose CL-6B阳离子交换柱进行分离纯化,洗脱峰用大鼠嗜铬神经瘤细胞(PC12细胞)测定活性, 通过SDS-PAGE测定纯度和相对分子质量;②采用MTT法,以NGF浓度分别为7.5、15、30、60、120 mg/L处理人胃癌MGC-803细胞24 h,观察不同浓度NGF对MGC-803细胞的毒性和生长抑制率;③采用AO/EB双重染色法,NGF浓度分别为25、50、75 mg/L,观察不同浓度NGF作用后细胞染色及形态的变化,计算细胞凋亡率;④Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡率变化.结果:①所得NGF为单一组分,SDS-PAGE结果为一条带,相对分子质量约为23 000,对PC12细胞有良好的促进分化作用;②NGF对MGC-803细胞的生长有抑制作用且呈剂量依赖关系,作用24 h的IC50值为49.9 mg/L;荧光显微镜下可观察到凋亡细胞主要特点为:细胞体积缩小,染色质固缩,橘红色荧光增强,各浓度组与对照组的细胞凋亡率比较有明显差异(P<0.01);流式细胞仪检测到早期细胞凋亡率随NGF浓度的增高而增加,各浓度组与对照组的细胞凋亡率比较有明显差异(P<0.01).结论:采用Sephadex G75 凝胶过滤及CM Sepharose CL-6B阳离子交换柱提取得到的眼镜蛇毒NGF能诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡且呈剂量依赖关系.     

2019年重庆市沙坪坝区恶性肿瘤发病与死亡分析

分析2019年重庆市沙坪坝区居民恶性肿瘤发病及死亡情况,为该区肿瘤防治提供科学依据。方法 收集沙坪坝区肿瘤登记报告资料,采用SPSS 19.0计算发病率、死亡率及标化率,并对结果进行分析。结果 2019年沙坪坝区居民恶性肿瘤发病率为289.24/10万,标化率为201.43/10万。其中男性发病率高于女性（P<0.05）。发病率前5位肿瘤依次是肺癌、结直肠癌、甲状腺癌、肝癌及乳腺癌。恶性肿瘤粗死亡率为167.10/10万,标化率为110.13/10万,男性死亡率高于女性（P<0.05）。死亡率前5位肿瘤依次是肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌及胰腺癌。随着年龄的增大,肿瘤发病率及死亡率均呈上升趋势。结论 该区恶性肿瘤发病及死亡情况处于中等水平,其中肺癌是对该区居民健康威胁最大的癌症,消化系统恶性肿瘤则是威胁该区居民生命健康的第二大类癌症,需开展针对性的健康教育宣传和早诊早治。     

斑马鱼胚胎试验比较4种抗肿瘤药物的毒性☆

背景：目前斑马鱼胚胎毒性试验在国内已广泛应用于环境、农业和生态学领域,但其在药物毒性筛选的应用仍处于起步阶段。目的：运用斑马鱼胚胎试验比较4种常用抗肿瘤药物注射剂的毒性强弱,评估斑马鱼胚胎试验用于药物毒性筛选的效果。方法：挑选6hpf时发育正常的受精卵进行药物暴露。环磷酰胺、盐酸阿糖胞苷、氟尿嘧啶、硫酸长春新碱4种待测药物分别设置7个实验组,包括：5个药物浓度组,空白对照组（Holt Buffer溶液）,助溶剂对照组（含0.5%二甲基亚砜的Holt Buffer溶液）。于72hpf观察斑马鱼胚胎的发育变化,并统计各实验组斑马鱼胚胎的死亡数、孵化数、畸形数以及各种发育缺陷,并据此求取在72hpf时,斑马鱼胚胎畸形率、死亡率、各药物毒力方程、相关系数和95%置信限及LD50、ED50和LD1/ED99。结果与结论：斑马鱼胚胎试验中,测得4种常见抗肿瘤药物注射剂LD50从大到小依次排序为：环磷酰胺〉盐酸阿糖胞苷〉氟尿嘧啶〉硫酸长春新碱。ED50由大到小依次排序为：环磷酰胺〉盐酸阿糖胞苷〉氟尿嘧啶〉硫酸长春新碱。LD1/ED99由大到小依次排序为：硫酸长春新碱〉氟尿嘧啶〉环磷酰胺〉盐酸阿糖胞苷。结果表明,斑马鱼胚胎试验方法可适用于快速有效测试多种药物的毒性及评价药物安全性,达到高通量筛选药物的目的。     

脑血管疾病的心理障碍及心理护理

脑血管疾病是老年人的常见病，其发病后往往会出现各种心理障碍。积极的心理治疗和护理，对本病的康复具有重要作用。现将对３０例脑血管病人的心理状况观察及心理护理措施报道如下：１临床资料本组病人３０例，脑出血１２例，脑梗塞１８例。其中男２５例，女５例。年龄６...     

广西医科大学硕士学位论文抽查结果分析与思考

目的:通过硕士学位论文抽查了解我校硕士科学学位研究生的培养质量。方法:用培养单位推荐和随机抽查相结合的方法,对2002~2007年毕业的194位攻读硕士科学学位全日制研究生的学位论文进行外校同行专家双盲评审,按优秀、良好、合格、不合格分等级。结果:在194份学位论文中。优秀49份,良好137份,合格8份,不合格0份。总的优良率为92.87%。结论:2002年以来我校科学学位全日制硕士研究生的学位论文的质量情况总体优良,双盲评审值得推广。同时,对存在的问题提出了相应的对策。     

METTL3调节皮肤成纤维细胞衰老的机制

目的 探讨甲基转移酶(METTL)3调节皮肤成纤维细胞衰老的机制。方法 酶消化法提取小鼠原代皮肤成纤维细胞,对照(Control)组、D-半乳糖(D-gal)组、转染阴性对照siRNA(NC)组、转染METTL3 siRNA(si-METTL3)组、转染核苷二磷酸连接部分X型基元(NUDT)18 siRNA(si-NUDT18)组,D-gal(20 g/L)建立皮肤成纤维细胞衰老模型。采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法检测细胞衰老,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测METTL3 mRNA表达。SA-β-gal染色法、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)染色法检测si-METTL3组细胞衰老与增殖。蛋白质质谱分析D-gal组与si-METTL3组中的差异蛋白,qRT-PCR验证差异基因成熟与前体的表达水平。SA-β-gal染色法、EdU染色法、JC-1线粒体膜电位检测法和共聚焦显微镜检测线粒体自噬法分别检测si-NUDT18组细胞衰老、增殖、线粒体膜电位和线粒体自噬的表达变化。结果 METTL3 mRNA在衰老皮肤成纤维细胞中表达明显降低,低表达METTL3...     

胎盘免疫调节因子对大鼠子宫内膜异位症的疗效观察

目的 研究胎盘免疫调节因子(placental immunoregulatory factor,PF)对大鼠子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)的治疗效果.方法 建立雌性大鼠EMS模型,随机分为对照组、模型组、PF低、中、高治疗组.PF治疗8周后开腹测量异位内膜生长体积;用淋巴细胞非特异性酯酶(achroacyte acor nonspecific esterase,ANAE)组织化学染色方法检测用药后外周血ANAE阳性细胞;用ELLSA法测量血清中细胞因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)含量.结果 各治疗组治疗后异位内膜体积较治疗前小(P＜0.05);PF能明显提高各治疗组ANAE活性(P＜0.05)和血清IL-2含量(P＜0.05).结论 PF可以提高机体的细胞免疫功能,对大鼠EMS模型的生长及粘连起到抑制或治疗作用.     

胎盘免疫调节因子对细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及免疫表型的调节作用

目的:通过电子显微镜、流式细胞仪观察经胎盘免疫调节因子处理的细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及免疫表型变化,了解胎盘免疫调节因子的免疫调节活性。方法:实验于2006-02/2007-01在广西医科大学医学科学实验中心重点实验室进行。实验材料:重组人干扰素γ和白细胞介素1α为Peprotech公司产品。重组人白细胞介素2和抗人CD3单克隆抗体为北京远策药业有限公司产品。实验方法:①胎盘免疫调节因子的制备:将新鲜经检人胎盘去筋膜,生理盐水冲净、剪碎匀浆,置-20℃48h后,反复冻融3次,用生理盐水透析,取透析外液,过虑除菌,分装,抽样做有关鉴定实验。②细胞因子诱导的杀伤细胞的制备:抽取健康自愿者静脉血20mL,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,加RPMI1640培养液调整细胞的密度至1×109L-1,放于50mL培养瓶中培养。于当天加入1×106U/L干扰素γ,置于37℃、50mL/LCO2孵育箱中培养24h。次日将悬浮的细胞转移到6孔板培养中,分别加入终浓度为100mg/L的PHA、3×105U/L白细胞介素2、133μg/L抗CD3mAb及1×105U/L白细胞介素1α,每3d半量换液1次,同时补加白细胞介素2至3×105U/L。将培养14d细胞因子诱导的杀伤细胞以5×109L-1接种于24孔板,实验组中加入一定剂量的胎盘免疫调节因子诱导,对照组加入等量生理盐水,继续培养72h。③实验评估:制备电镜标本,观察细胞超微结构。采用流式细胞术测定细胞因子诱导的杀伤细胞CD4 、CD8 、CD3 CD4 、CD3 CD8 、CD25 、HLA-DR、CD3 CD56 、CD80 百分含量。结果:①细胞因子诱导的杀伤细胞表型分析:实验组CD4 、CD8 和CD3 CD4 明显低于对照组[实验组:(8.40±8.15)%,(33.10±4.61)%,(7.98±12.65%);对照组:(39.43±9.16)%,(58.90±11.35)%,(31.30±5.94)%,P<0.05];实验组CD3 CD8 、CD25 表达明显高于对照组[实验组:(30.50±2.56)%,(24.8±6.31)%;对照组:(15.90±7.35)%,(0.56±0.21)%,P<0.05]。②透视电镜下观察细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构特征:与对照组相比,实验组细胞因子诱导的杀伤细胞线粒体深染,溶酶体增加,异染色质比例增加,微绒毛肿胀及增长等。结论:胎盘免疫调节因子能促使细胞因子诱导的杀伤细胞超微结构及细胞表型发生明显变化:细胞因子诱导的杀伤细胞线粒体深染,溶酶体增加,异染色质比例增加,微绒毛肿胀增长,CD3 CD8 、CD25 细胞百分比升高,CD4 、CD8 和CD3 CD4 细胞百分比降低。