应用于专业和自我检测的HIV快速诊断试剂WHO预审资格技术规范要点

<正>1总则1.1本技术规范旨在为体外诊断(in vitro diagnostic,IVD)医疗器械生产商向世界卫生组织(WHO)申报艾滋病病毒(HIV)快速诊断试剂(rapid diagnostic tests,RDTs)的预审资格(prequalification,PQ)提供技术指导。1.2本技术规范总结了满足预审资格的最低试剂性能要求。1.3本技术规范适用于:单独检测HIV的RDTs,     

干血斑样本用于ELISA 法检测HIV抗体的稳定性研究

目的研究干血斑样本用于艾滋病病毒(HIV)抗体检测的稳定性。方法使用两个品牌HIV酶联免疫吸附试验(ELISA)法抗体检测试剂盒与HIV1/2重组免疫印迹(RIBA)法抗体检测试剂盒,对不同保存形式下干血斑(DBS)存放不同时间后的样本进行HIV抗体光密度(OD)值与条带测定,分析DBS在HIV抗体检测中的稳定性。结果同一份样本经ELISA法试剂A与试剂B检测所得结果存在差异。在室温下,中阳、弱阳、阴性样本放置2周后用试剂A检测均出现OD值增高现象,而用试剂B检测均未出现OD值变化;在37℃下,中阳、弱阳、阴性样本在放置1周后用试剂A检测即出现OD值显著增高现象,而用试剂B检测时,只有放置4周后的弱阳和阴性样本出现OD值升高现象;4℃下,试剂A与试剂B检测各样本OD值均比较稳定,只有在用试剂A检测中阳样本时发现6周后出现OD值升高现象; RIBA检测发现4℃下放置16周后样本稳定性良好,而室温和37℃下随放置时间延长会导致弱阳和中阳样本条带变弱,而阴性样本在37℃密封无干燥剂情况下放置1周后会出现p31、p24、p17等条带;冻存在-20℃的DBS洗脱后样本反复冻融1～6次后OD值无明显变化。结论用国产耗材试剂制备的DBS样本在4℃和-20℃下稳定性较好,不同试剂检测出的样本稳定性差异较大,DBS样本洗脱液可反复冻融使用至少6次。     

适合VCT的HIV抗体检测替代策略研究

目的 探求适合在艾滋病自愿咨询检测(VCT)点应用的检测艾滋病病毒(HIV)抗体的替代策略.方法 从河南、安徽和山西省的27个VCT检测点日常工作中采集样品10 310份,离心分离血浆后,全部用HIV快速检测试剂1(RT1)和HIV快速检测试剂2(RT2)进行检测,其中任何一种试剂的检测.结果 为阳性时,分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂和免疫印迹试验(WB)试剂复检.当两种快速检测均为阴性时,保留血浆,集中用ELISA试剂复检,复检为阳性者,进一步用WB确认检测.结果 RT1检测为阳性的样品418份,WB确认阳性的样品386份;RT2检测为阳性的样品427份,WB确认阳性的样品388份;RT1和RT2均为阳性的样品391份,WB确认阳性的样品386份.RT1和RT2检测.结果 不一致的样品共63份,57份为ELISA阴性,6份为ELISA阳性.结论 使用任何一种HIV快速检测试剂可以筛查出99%以上的阴性样品;两种HIV快速检测试剂的检测.结果 均为阳性时,可以筛查出98%以上的阳性样品;两种HIV快速检测试剂的检测.结果 不一致时,ELISA复检为阴性的样品可按HIV抗体阴性咨询,ELISA复检为阳性的样品应进一步做WB确认检测.使用RT1 RT2 ELISA策略,可以替代98.54%的WB确认检测,并且与WB确认检测.结果 的符合率为99.94%,因而可以在保证检测.结果 质量的同时,大大减少检测费用,提高检测效率和成本效益.     

健脾化痰凉血活血利水方治疗乙型肝炎肝硬化腹水临床疗效探讨

目的：探讨健脾化痰凉血活血利水方治疗乙型肝炎肝硬化腹水临床疗效。方法乙型肝炎肝硬化腹水患者100例,随机分为观察组、中药组各50例。观察组常规予西药治疗,中药组选用中药+常规西药治疗,两组疗程均为28 d。分别观察二组患者症状改善情况,肝功能变化,判断临床疗效。结果中药组在改善肝功能、症状改善明显优于观察组,差异有统计学意义(P<0.05),且无不良反应。结论健脾化痰凉血活血利水方治疗乙型肝炎肝硬化腹水疗效显著,安全可靠。     

我国艾滋病母婴传播水平传播时期及干预效果研究

目的 了解我国部分艾滋病高流行地区艾滋病母要传播水平、传播时期及预防艾滋病母婴传播干预措施的效果.方法 在艾滋病病毒(HIV)感染相对高发的4个省15个县/市/区,于2004年12月至2007年6月,对287名确诊的艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)感染孕产妇进行问卷调查及追踪管理,对其分娩的287名婴幼儿进行HIV-1DNAPCR检测和HIV抗体检测.结果 287名HIV-1感染孕产妇分娩的婴幼儿中,38名婴幼儿感染了HIV,艾滋病母婴传播总体水平为13.24%(38/287);未采取任何干预措施的孕产妇组艾滋病母婴传播水平为34.78%,规范应用抗逆转录病毒药物和采取人工喂养措施组的母婴传播率为4.48%,人群水平的总体母婴传播率从34.78%下降到13.24%,下降率为61.94%(x2=7.82,P＜0.01).24例HIV感染婴幼儿可明确其发生艾滋病母婴传播的时期,37.50%(9/24)母婴传播发生在宫内,33.33%(8/24)发生在产时,29.17%(7/24)为产后经母乳喂养传播.结论 预防艾滋病母婴传播干预措施能有效降低艾滋病母婴传播水平,应加强提供规范的预防艾滋病母婴传播干预措施,进一步降低母婴传播率.     

检测HIV-1新发感染的限制性抗原亲和力方法的重复性与稳定性评价

目的评价检测艾滋病病毒Ⅰ型（HIV-1）新发感染的限制性抗原亲和力酶联免疫试验的重复性、稳定性和准确度,探讨该方法推广应用的可行性。方法采用检测精密度、孔间精密度、批间差、两实验员和两实验室之间结果的相关性,评价试剂的重复性;利用37℃热稳定性试验评价试剂的稳定性;使用国际标准盘评价试剂的准确度。结果检测精密度结果显示,所有样本标化吸光度值（ODn）的变异系数（CV）〈15%,两实验员和两实验室试验结果的相关系数R2值均〉0.99,孔间精密度CV值最小为3.76%,3个批次试剂的批间差结果显示,25份内控盘样本中,只有1份样本CV值〉15%,为22.5%。37℃放置7天与4℃保存的酶结合物和酶联板,对内控盘样本检测的ODn值没有明显区别。国际标准盘评判结果与预期值一致。结论检测HIV-1新发感染的限制性抗原亲和力方法具有较好的稳定性、重复性和准确度,可以在实验室网络中推广应用。     

重庆市2006——2008年男男性行为人群HIV-1感染发病率调查

的HIV-1感染发病率差异有统计学意义,2007年和2008年MSM发病率最高的人群分别来自浴室和通过网络寻找性伴的MSM,分别达到17.87%和12.22%;2008年21～25岁年龄组HIV-1发病率最高,达8.69%;不同方法的校正降低了对发病率的估计.结论 重庆市MSM人群HIV-1新发感染维持在较高水平,但连续3年的发病率经校正后上升趋势不明显.     

HIV/HCV共感染患者病毒特异性CTL细胞定量研究

目的探讨病毒特异性CTL对HIVHCV共感染患者病情进展的影响机制。方法观察对象为HIVHCV共感染患者、单纯HIV感染者、单纯HCV感染者。采用四聚体技术,运用流式细胞仪检测病毒特异性CTL。前瞻性比较HIV、HCV特异性CTL在三组中的异同,并对HIVHCV共感染患者的HIV、HCV特异性CTL进行相关性分析。结果HIVHCV共感染组与单纯HIV感染组比较HIV特异性CTL,差异无显著性(P=0.586)。HIVHCV共感染组中HCV特异性CTL的百分数及绝对计数(0.37±0.29,3.52±3.79)均高于单纯HCV感染组(0.15±0.05,0.86±0.33),差异有统计学意义(P=0.001,P=0.002)。HIVHCV共感染组中的HIV特异性CTL与HCV特异性CTL存在正性线性相关(P<0.001),方程成立。并且各系数均有统计学意义,方程似然比(r2)0.761。结论HCV特异性CTL可能是HIVHCV共感染组中肝脏功能损伤加重的原因之一;HIV与HCV在同一患者存在相互影响。     

红芪提取物(HE)对亲心肌柯萨奇B_3病毒(CVB_(3m))感染的作用初探

体外试验表明HE具有明显抑制CVB_(3m)繁殖和保护病毒感染细胞的作用。体内试验表明HE对CVB_(3m)感染小鼠具有减缓死亡、延长存活时间、保护其不得心肌炎或减轻心肌炎病变的作用。提示HE在控制病毒感染中起重要作用。     

存放温度及时间对于HIV/AIDS患者外周血CD4+、CD8+细胞测定结果的影响

目的　研究HIV AIDS患者外周血CD4 、CD8 淋巴细胞数在不同条件下 (时间、温度和处理过程 )的变化。方法　选取HIV AIDS患者 34例 ,用流式细胞术检测在 4℃条件下放置不同时间(2、2 4、4 8、72h)的外周血CD4 、CD8 细胞数的变化 ,对经过处理的外周血 (处理过的血样 )CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较 ;对室温条件下放置不同时间 (2、2 4、4 8、72h)处理过的血样CD4 、CD8 细胞数的变化进行比较。结果　在 4℃时 ,全血放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义(P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数放置 72h时则差异有显著意义 (P <0 0 5 ) ;处理过的样品放置 72hCD4 细胞计数差异才有显著意义 (P <0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 2 4h时差异就有显著意义 (P <0 0 5 )。在室温时 ,处理过血样放置 2、2 4、4 8、72h的CD4 细胞计数差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ,而CD8 细胞数在 4 8h则差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　抗凝全血在 4℃放置 4 8h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。处理过血样在室温放置 2 4h ,检测CD4 、CD8 淋巴细胞数 ,结果是可靠的。 2 4～4 8h虽然CD4 淋巴细胞没有变化 ,但CD8 淋巴细胞却发生明显的变化 ,两者比例必然发生变化。