第四代HIV抗原抗体酶联检测试剂缩短HIV检测窗口期的研究

目的比较几种国内市售第4代和第3代HIV检测试剂盒检测HIV早期感染的能力。方法使用8套BBI公司HIV阳转血清盘（PRB924、930、940、942、943、944、946、948）和2套国家艾滋病参比实验室HIV阳转血清盘（2004XJ1727、20505217），分别用1种HIV抗原检测试剂盒、2种第4代HIV检测试剂盒和4种第3代HIV抗体检测试剂盒进行检测，分析它们对HIV早期感染的检出情况。结果在每套血清盘中，第4代试剂盒都比第3代试剂盒较早检出HIV感染，窗口期平均提前4～8d，但与抗原检测试剂盒相比要滞后2～4d。不同品牌试剂盒的检测能力有别。结论第4代HIV试剂盒可以缩短HIV检测的窗口期，对于诊断早期感染、保证血液安全等具有一定意义。     

检测HIV-1新近感染的BED捕获酶免疫实验的重复性和稳定性评价

目的对BED捕获酶免疫实验（BED capture enzyme immunoassay，BED-CEIA）的重复性和稳定性进行评价。方法对在国家艾滋病参比实验室（参比室）和A、B两个艾滋病确证中心实验室，使用BED-CEIA方法对新近感染检测的实验数据进行统计。分别对在参比室和A、B两实验室进行检测的59、35和18块酶标板的质控品（NC、CAL、LPC和HPC）OD和OD-n的Mean、SD和CV进行统计。对3个实验室初筛和确认实验结果的一致性进行比较，得出R^2值。使用同一考核血清盘，将11位不同实验人员的实验结果与参比室实验员的实验结果进行比较，得出R^2值。结果在参比室进行的实验中，对OD-n的统计显示，质控品NC的CV为14．4％，LPC和HPC的CV值约为5％；在A实验室中，LPC和HPC的CV值均控制在10％以内；在B实验室中，LPC和HPC的CV值均控制在12％以内。3个实验室初筛和确认实验结果的R。值均达到了0．90以上。其他实验人员与参比室实验人员的结果实验比较显示，R^2为0．9777，不同实验员之间可重复性强。结论BED-CEIA方法的稳定性和重复性均十分突出，可以在我国接受过专项培训的艾滋病确证中心实验室开展该项工作。     

箬叶多糖及其衍生物对小鼠艾滋病作用的研究

目的　研究箬叶多糖及其衍生物硫酸酯多糖和硒酸酯多糖对小鼠艾滋病的治疗作用。方法　采用 Ｌ Ｐ Ｂ Ｍ５ 鼠白血病病毒（ Ｍｕ Ｌ Ｖ） 感染 Ｃ５７ Ｂ Ｌ／６ Ｊ 小鼠的方法建立艾滋病模型。结果　硫酸酯多糖５０ ｍｇ·ｋｇ － １·ｄ － １（ｉｐ） 具有较好地抑制小鼠脾肿大、血清 Ｉｇ Ｇ 增高的作用,硒酸酯多糖在两种给药方式中有一定的保护作用。此外,还首次发现感染小鼠出现 Ｇ Ｓ Ｈ Ｐｘ 活力下降,脂质过氧化产物升高,这与 Ｈ Ｉ Ｖ感染的病人的症状是一致的,硒多糖对提高机体的抗氧化功能有较好的作用。多糖经硫酸酯化、硒酸酯化等化学修饰后,活性有不同程度的提高。结论　作为抗氧化剂和免疫增强剂的微量元素硒和多糖类可能对 Ｈ Ｉ Ｖ 感染的病人有一定的治疗作用     

云南瑞丽HIV-1感染长期存活者的病毒分离及其生物学特性的研究

目的 研究长期不进展者的病毒生物学特征及其与疾病发展的关系。方法 用感染者和正常人外周血单核细胞(PBMC)共培养的方法分离病毒,终点以共培养上清液中的p24抗原作为病毒生长的评价指标。结果 (1)从15例长期不进展者分离到4株病毒,占26.7％。同时取该地区HIV-1感染进展者血样20份,分离到14株病毒,阳性率为70.0％;(2)病毒分离率影响因素的试验结果表明,病毒的分离率与CD_4细胞数有明显关系,CD_4细胞数越高,分离率越低。反之,CD_4细胞数越低,病毒分离率越高。此外,去除CD_8细胞后可以显著提高病毒的分离率;(3)病毒生物学特性观察发现长期不进展者分离株均属生长缓慢、低滴度、非致细胞融合型(NSI型),在T细胞不能生长的病毒;(4)大部分进展者分离株与长期不进展者分离株在生物学特性方面没有显示区别。结论 长期不进展者与大部分进展者的病毒生物学特征没有明显区别,因此,推测病毒学因素可能不是决定病程进展的最主要因素。影响疾病进展的其它因素,如免疫因素等尚需进一步研究。     

HIV-2感染的实验室检测与诊断

本文综述了国内外2型艾滋病病毒(HIV-2)感染的实验室检测与诊断,简介了美国HIV-2核酸检测临床应用,表明HIV-2核酸检测不仅能有效排除临床上很多不确定结果,还能有效解决抗原抗体检测中的假反应性和漏检问题.HIV-2核酸定量检测不仅是检测与治疗监测的重要手段,同时能够为临床提供HIV-2感染诊断依据.国内目前尚缺...     

新生儿HIV1型感染的两种早期诊断方法比较

我国HIV1型(HIV-1)感染的主要途径已从吸毒转变为性途径传播[1],新生儿面临着更大的感染危险.临床实践证明在感染HIV-1的新生儿中及早开展抗病毒治疗可以大大降低病死率和提高生活质量[2].     

云南省德宏州HIV-1新近感染者基因型耐药分析

目的 了解云南省德宏州HIV-1新近感染者中耐药的发生情况.方法 收集德宏州2006年7-12月期间所有的HIV-1阳性样品共1048份,使用BED捕获酶免疫试验进行新近感染检测,共检出新近感染样品101份;使用Bayer公司的TruGene方法进行基因型耐药检测,应用所有样品的序列构建系统进化树以确定样品的亚型.结果云南省德宏州HIV.1新近感染者巾的耐药发生率为6.25%(4/64),样品PR区中M36I/V、L63P和H69K等次要耐药突变出现的频率较高,分别占81.25%、70.31%和65.63%;HIV-1流行株以C/CRF07 BC/08_BC为主,占65.63%(42/64).结论德宏州HIV-1新近感染者中耐药的流行处于中等水平;有必要加强HIV-1的耐药监测.     

HIV-1新发感染捕获酶联免疫试验重组抗原的研究

目的构建、表达1型艾滋病病毒(HIV-1)重组蛋白,并尝试用于HIV-1新发感染捕获酶联免疫试验。方法设计、合成1种HIV-1重组蛋白(编号HIV-Ag-R03)的核酸序列,将它与pET30a-trx载体骨架连接、构建重组质粒。将重组质粒转化BL21(DE3)细胞,经异丙基硫代半乳糖苷诱导表达蛋白质。用重组蛋白包被酶标板,检测48份血浆样品(其中HIV-1抗体阳性、HIV阴性各24份),分析蛋白质的抗原性。将HIV-Ag-R03标记辣根过氧化物酶(HRP)后,取代BED捕获酶联免疫试验(BED CEIA)试剂盒中的BED肽及后续组分,比较2种方法检测18份HIV-1阳性样品的结果相关性。结果成功构建了HIV-Ag-R03的重组质粒,核酸序列确认无误。获得了包涵体表达的蛋白质,经十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析大小与预测值一致。使用包被HIV-Ag-R03的间接酶联免疫试验检测48份1∶101稀释血浆样品,结果HIV-1抗体阳性样品的吸光度(OD)值(1.513±0.991)显著高于HIV阴性样品的OD值(0.022±0.008),差异有统计学意义(t=7.336,P0.01)。用HIV-Ag-R03-HRP取代BED CEIA试剂盒中的BED肽及后续组分,调试HIV-Ag-R03-HRP的最佳稀释度为1∶2 500,18份HIV-1阳性样品的检测结果ODn值与BED CEIA的ODn值相关性好(r=0.939,P0.01)。结论获得了1种具有抗原性的重组蛋白并成功标记HRP,建立了检测HIV-1新发感染的新模式。     

单剂量Nevirapine母婴阻断与HIV

全球艾滋病的流行形势日趋严重,2007年15岁以下儿童感染者为250万,其中大部分是母婴传播,新感染人数为42万,死亡人数为33万,妇女艾滋病感染者为1540万[1].如果不接受抗病毒治疗,HIV感染儿童的预后很不乐观,大约有50%儿童在2周岁之前死亡[2,3].     

干血斑样本用于HIV抗体检测方法学优化与应用

目的探讨用于干血斑样本中艾滋病病毒(HIV)抗体检测的最佳洗脱条件。方法选取并制备中值(24)与低值(26)的干血斑样本,利用HIV抗体诊断试剂盒(酶联免疫吸附试验法),对不同洗脱温度、不同洗脱液组分、不同洗脱液体积、不同洗脱时间分别进行组合后,进行干血斑(DBS)样本洗脱液中抗体OD值测定分析,从而选出最适宜、最方便用于HIV抗体检测的DBS洗脱条件。结果室温与4℃条件下洗脱样本差异无统计学意义(P=0.979,P=0.704);不同洗脱液体积对样本洗脱的影响差异无统计学意义(P=0.183);洗脱液组分对低值(26)样本的洗脱效果有统计学意义(P=0.033),其中以含0.5‰Tween20的PBS对样本洗脱的影响更为显著(P=0.02,P=0.004);洗脱时间对中值(24)与低值(26)样本均有显著影响(P=0.00,P=0.00),其中4小时和6小时为显著差异分界点。670份临床已知样本的检测应用中,试剂盒现成Cutoff值计算判定阳性样本时,存在2.63%的假阳性,无假阴性。结论用于DBS中HIV抗体最佳洗脱条件为:用300μL含有0.5‰Tween20的PBS在室温下(24±2℃)洗脱4~6小时。试剂盒Cutoff值不适用于DBS样本结果判定,需进一步研究设定用于该方法的Cutoff值。