慢性乙型肝炎患者HBV前C区及BCP区变异与血清细胞因子的关系

目的探讨乙型肝炎e抗原(HBeAg)阴性和阳性慢性乙型肝炎(CHB)患者乙型肝炎病毒(HBV)前C区、基本核心启动子(BCP)区变异特点以及与血清细胞因子干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-10水平的关系。方法将120例HBV DNA阳性CHB患者(HBeAg阴性和阳性各60例)与60例健康体检者(对照组)纳入研究。荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测HBeAg阴性和阳性组患者HBV DNA水平,直接测序法检测两组前C区G1896A变异及BCP区A1762T和G1764A变异,双抗夹心酶联免疫吸附试验检测血清细胞因子IFN-γ/、IL-10的水平。结果 120例HBV DNA阳性CHB患者HBV前C区和BCP区变异总检出率为60.00%(72/120),其中HBeAg阴性组变异检出率为80.00%(48/60),HBeAg阳性组变异检出率为40.00%(24/60),两组比较,差异有显著性(x~2=20.00,P=0.000)。HBeAg阴性组G1896A变异(38.33%)和联合变异(G1896A、A1762T和G1764A同时变异,25.00%)的检出率明显高于HBeAg阳性组(16.67%、0.00%)(分别x~2=7.06,P=0.008;x~2=17.14,P=0.000)。变异组血清IFN-7水平为(102.33±27.20)pg/mL,明显高于无变异组(79.18±16.43)pg/mL及对照组(35.77±4.23)pg/mL(分别t=5.72,t=19.33,均P=0.000);变异组血清IL-10水平为(28.13±7.00)pg/mL,明显高于无变异组(13.91±5.42)pg/mL及对照组(13.68±2.27)pg/mL(分别t=12.50,t=15.65,均P=0.000)。结论 G1896A变异和联合变异更常见于HBeAg阴性CHB;G1896A和A1762T/G1764A变异与血清细胞因子IFN-γ和IL-10水平升高有关。     

HBV基因型与耐药变异的关系

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因型与核苷（酸）类似物耐药变异的关系。方法湖南省衡阳地区122例慢性乙型肝炎患者接受拉米夫定治疗（100mg／d）48-96周,发生耐药变异者改用阿德福韦酯治疗（10mg／d）96周。采用直接测序法进行HBV基因分型,同时检测拉米夫定、阿德福韦酯和恩替卡韦耐药变异位点。结果122例慢性乙型肝炎患者中,B基因型86例（70．49%）,C基因型24例（19．67％）,未分型12例（9．84％）。42例检出拉米夫定变异株,其中B基因型32例,C基因型10例,B、C基因型拉米夫定耐药变异率分别为37．21％（32／86）和41．67％（10／24）,差异无显著性（x^2=0．16,P=0．69）;42例经阿德福韦酯治疗48周和96周的变异发生率分别为0．00％（0／42）和2．38％（1／42）,B、C基因型阿德福韦酯耐药变异率分别为3．13％（1／32）和0．00％（0／10）。拉米夫定耐药变异类型主要为rtM204V＋rtL180M（35．71％）和rtM204I（38．10％）;B、C基因型比较,拉米夫定耐药变异类型差异无显著性（x^2=17．44,P=0．23）。结论湖南省衡阳地区HBV基因型以B型为主,C型次之;HBV基因型对拉米夫定耐药变异发生率及变异类型无明显影响。     

丙型肝炎病毒动物模型研究进展

丙型肝炎病毒（hepatitisCvirus,HCV）是一个约9．6kb长的单股正链RNA病毒,属于黄病毒科。HCV感染可造成慢性肝炎,该病程特点是进行性肝脏损伤,往往通过几十年的进展,从肝纤维化到肝硬化,最终发展为肝细胞癌（HCC）。尽管干扰素（INF）联合利巴韦林是目前治疗慢性丙型肝炎最有效的方法．但仍不理想,且不同基因型的应答率之间存在较大差异,价格也昂贵。因此,研发HCV疫苗和创新治疗方法越来越引起人们重视。     

丙型肝炎病毒复制子细胞培养体系的发展及应用

<正> 丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是丙型肝炎的病原体。目前全世界约有1.2亿～1.8亿慢性HCV感染者,是世界范围内导致慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌的主要病因之一。传统的感染细胞模型HCV复制效率非常低,缺乏合适的体外细胞培养模型及小动物感染模型,使得HCV各方面的     

乙型肝炎肝衰竭预后的影响因素

目的 探讨影响乙型肝炎肝衰竭预后的因素.方法 回顾性分析106例乙型肝炎肝衰竭患者的临床资料,应用Logistic回归分析筛选影响预后的独立危险因素.结果 在106例乙型肝炎肝衰竭患者中,急性肝衰竭2例(1.90/o),亚急性肝衰竭2例(1.9%),慢加急性肝衰竭102例(96.2%);HBeAg阳性37例(34.9%),HBeAg阴性69例(65.1%),入院后抗病毒治疗46例(43.4%);好转55例(51.9%),无效51例(48.1%).单因素Logistic回归分析显示,肝病基础状态、总胆红素(TBil)、直接胆红素(DBB)、白蛋白(ALB)、血清钠离子(Na+)、血清氯离子(Cl-)、凝血酶原时间(PT)、并发细菌感染、肝性脑病、电解质紊乱、肝肾综合征和入院后是否抗病毒治疗,均与乙肝肝衰竭患者预后相关(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,肝病基础状态、凝血酶原时间及入院后是否抗病毒治疗和预后相关(P<0.05)).结论 肝病基础状态和凝血酶原时间是影响乙肝肝衰竭患者预后的独立危险因素,抗病毒治疗有利于改善乙肝肝衰竭患者的预后.     

丙型肝炎病毒1b型核心蛋白和NS4B蛋白与肝癌形成的关系研究进展

<正>目前,全世界丙型肝炎的感染率为3%,估计约有1.7亿人感染丙型肝炎病毒(HCV),每年新发病例约3.5万例,在我国一般人群中抗HCV的阳性率为3.2%,丙型肝炎患者约4 000万,丙型肝炎病毒是导致慢性肝炎、肝硬化和肝细胞肝癌的主要原因之一。     

拉米夫定治疗引起HBVYMDD变异的检测及临床意义

目的 探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎引起的HBVYMDD变异与HBVDNA病毒载量与血清谷丙转氨酶(ALT)之间的关系.方法 140例拉米夫定治疗48～96周的慢性乙型肝炎患者为研究对象.用荧光定量PCR法检测HBVDNA,基因序列分析检测HBVYMDD变异,全自动生化分析仪检测ALT水平.结果 140例检测标本46例存在YMDD变异,变异率为32.86%,其中29例(20.71%)为rtM204V/rtL180M变异,16例(11.43%)为rtM 204 I变异,1例(0.72%)为rtM204I/rtL180M变异.HBVDNA＞105拷贝/mL的发生率变异株组(40/46,86.96%)明显高于野生株组(6/94,6.38%)(χ2=90.889,P＜0.01).血清ALT水平变异株组(143.96±192.97)u/L明显高于野生株组(41.29±31.54)u/L(F=25.409,P＜0.01).结论 慢性乙型肝炎患者应用拉米夫定48～96周YMDD变异率为32.86%,变异类型以rtM204V/rtL180M为主,其次为rtM 204I.变异时HBV-DNA病毒载量及ALT水平升高.     

乙型肝炎病毒基因型与拉米夫定疗效的相关性研究

目的探讨衡阳地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型、以及对拉米夫定疗效的影响。方法对170例慢性乙型肝炎患者进行HBV基因分型、血清标志物、HBVDNA含量、ALT水平以及YMDD变异检测。结果170例患者中检测出B基因型135例（79．41％），C基因型34例（20．00％），BC混合基因型1例（0．59％）。接受拉米夫定治疗前B基因型与C基因型患者血清HBeAg阳性分别为113例与28例（x^2=0．04，P〉0．05），HBVDNA〉10^7拷贝／mL分别为106例与29例（x^2=0．77，P〉0．05），ALT〉120u／L分别为86例与10例（x^2=13．02，P〈0．05）。拉米夫定治疗24—48周时，B基因型和C基因型患者血清HBeAg阴转率各为24．78％和28．57％（x^2=0．20，P〉0．05），抗-HBe阳转率各为14．55％和15．88□（=x^2=0．31，P〉0．05），HBVDNA阴转率各为73．33％和55．88％（x^2=3．93，P〈0．05），ALT复常分别为77．04％和58．82％（x^2=4．61，P〈0．05）。拉米夫定治疗32—144周时，77例患者发生YMDD变异，变异发生率为45．29％，其中rtM204V型变异35例（20．59％），rtM204I型变异25例（14．71％），rtM204V／rtM20I型变异16例（9．41％），并有35例伴rtL180M突变。B基因型与C基因型患者发生YMDD变异各为61例与16例（45．19□与47．06□）（x^2=0．04，P〉0．05）。结论衡阳地区慢性乙型肝炎患者HBV基因型存在B型、C型以及BC混合型，B基因型为优势基因型并与肝脏疾病的活动性相关；B基因型与C基因型患者HBVDNA栽量、HBeAg表达、以及HbeAg／HBeAb的转换率差异均无显著性；拉米夫定对B基因型患者的疗效优于C基因型；YMDD变异发生率与基因型无相关性。     

筛选丙型肝炎病毒1b型非结构蛋白4B慢病毒LO2稳定株差异表达基因和基因通路

目的:筛选表达丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV) 1b型非结构蛋白4B(nonstructural protein 4B,NS4B)的慢病毒稳定细胞株L02-NS4B差异表达基因和基因通路,为深入研究HCV NS4B在慢性丙型肝炎和肝细胞癌发生中的作用及机制提供依据.方法:将已构建好的2株慢病毒稳定细胞株LO2-NS4B和阴性对照慢病毒稳定细胞株LO2-mkate2复苏扩增;应用Human Gene 1.0ST芯片筛选出LO2-NS4B与LO2-mkate2差异表达基因.基于京都基因和基因组百科全书(kyotoencyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库,利用Fisher精确检验和卡方检验,对差异基因参与的信号转导通路进行显著性分析.应用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,real-time QPCR)方法验证基因芯片中5个表达上调且与凋亡有关的基因,即蛋白激酶Cδ结合蛋白(protein kinaseC delta binding protein,PRKCDBP)基因、肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,TP53)基因、v-akt鼠科胸腺瘤病毒癌基因同源物Ⅰ(v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 1,AKT1)基因、含3个杆状病毒凋亡蛋白抑制因子重复序列(baculoviral IAP repeat containing 3,BIRC3)基因和B细胞淋巴瘤2样1基因(B-cell lymphoma 2-like1,BCL2L1)的mRNA水平.结果:以LO2-NS4B与LO2-rnkate2之间基因荧光强度的比值大于1.2或小于0.8为差异表达基因,在已知的28 869个人类基因中L02-NS4B中有2 682个差异表达基因,包括1 446个基因表达上调和1 236个基因表达下调.上调基因参与的显著性信号转导通路41项,主要有凋亡通路、细胞外基质受体相互作用通路、细胞周期通路、癌症通路和Toll样受体信号通路等;下调基因参与的显著性信号转导通路20项,主要有癌症通路、Wnt信号通路和细胞周期通路等.Real-time QPCR验证5个表达上调基因中有3个基因表达变化与基因芯片结果一致,分别是AKT1,BIRC3和BCL2L1,吻合率为60％.结论:HCV NS4B可以调节LO2细胞中与细胞凋亡、细胞周期和细?     

Plk1和Cdk1在细胞周期和肿瘤中的研究进展

保罗样激酶(polo-like kinase,Plk)1和细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin dependent kinase,Cdk)1均属于丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族中的成员,在细胞周期进程中,尤其是在G2/M期中具有重要调控作用。Plk1和Cdk1在增殖活跃细胞中呈高表达,Plk1和Cdk1高表达均与肿瘤患者预后差密切相关。细胞周期是一个细胞复制其基因组、生长和分裂