广州市2001-2015年登革病毒2型E基因进化分析

目的 了解2001-2015年广州市登革病毒2型（DENV2）的流行情况;通过对分离DENV2 E基因的进化树和分子钟分析,掌握毒株的进化情况和趋势。方法 将登革热确诊病例的血清用荧光PCR进行检测,DENV阳性血清用C6/36细胞进行病毒分离,测定分离毒株的E基因序列,利用Mega 4.0软件构建进化树,采用BEASTv1.8.2绘制分子进化钟。结果 2001-2015年共分离到26株DENV2,从基因型上分类属于全球型和亚洲1型,并与东南亚地区分离到的毒株相似率较高;BEASTv1.8.2计算出广州市DENV2全球型在46年前和35年前进一步出现亚型的分化,广州市DENV2的平均变异率为每年每位点7.1×10^-4。结论 广州市DENV2与东南亚地区的毒株有较高同源性和进化上的联系,广州市DENV的输入压力较大,存在重症登革热暴发的潜在风险。流行于广州市的全球型DENV2可能存在2个不同输入来源,广州市DENV2的变异率与周边地区基本持平。     

金黄色葡萄球菌所致食源性疾病的病原学研究

目的：从微生物学角度寻找食源性疾病的病因。方法：采用食品卫生微生物检验国家标准(GB／T4789)，霍乱诊断标准及处理原则(GB15984-1995)，结合mini-VIDAS全自动荧光酶标免疫测试仪和VrrEKl20全自动微生物分析仪对可疑食品进行食源性致病菌检测。结果：从面包样品中直接检出葡萄球菌肠毒素；且面包检出产肠毒素的金黄色葡萄球菌；大多数面包细菌总数和大肠菌群超标。药敏试验显示，分离到的金黄色葡萄球菌对青霉素G、头孢他定、四环素、利福平耐药。结论：结合流行病学调查、临床表现和微生物学检测结果，确认这起食源性疾病是由产生肠毒素的金黄色葡萄球菌污染面包所致。     

2006年、2007年广州大学城流感病毒的分子生物学检测及基因分析——附83份咽拭子标本检测报告

目的：应用分子生物学方法了解2006年与2007年引发广州大学城流行性感冒（流感）疫情的病原体。方法：在3个校区采集流感样症状患者的咽拭子标本,使用A、B型流感病毒荧光PCR检测试剂盒,按照试剂盒说明书进行检测,以Ct值小于30判定为阳性,初步鉴别为流感病毒后,再用荧光PCR法进行病毒型别鉴定,并与MDCK细胞培养法及红细胞凝集抑制试验进行比较。同时用逆转录PCR法对流感病毒血凝素（HA）基因进行扩增,并测序分析其同源性。结果：83份咽拭子标本中,MDCK细胞培养法的检测阳性率为47％,而荧光PCR法的检测阳性率为58％。引起2006年和2007年广州大学城流感爆发疫情的分别是H1和H3亚型毒株。2006年与2007年广州大学城不同校区的流感病毒株HA基因的同源性分别为96．4％及99．2％～99．6％。结论：2006年和2007年广州大学城爆发流感疫情的病原体分别为H1和H3亚型流感病毒,同一年内发生在大学城不同校区的流感疫情是由同一病毒株引起的。荧光PCR法检测需时短,特异度和敏感度较高,不仅能快速准确地检测流感病毒,还能针对不同亚型进行分型。     

O139群霍乱弧菌地方分离株的分子特征研究

目的研究本地分离出的O139群霍乱弧菌的分子特征,建立霍乱暴发和散发的快速检测及流行病学溯源的有效手段。方法采用PCR方法对霍乱弧菌进行4种毒力基因的检测,用随机扩增多态性分析(RAPD)及SPSS软件对以上菌株进行多态性分析,对霍乱弧菌毒力进行快速测定和分子分型。结果5株O139群霍乱弧菌均可检出四种毒力基因。所有霍乱弧菌的RAPD结果经聚类分析可分为3个聚类群,较好地反应了不同群的霍乱弧菌之间的亲缘关系。结论可将PCR和RAPD方法结合分析用于霍乱疫情的快速检测和流行病学溯源。     

中国内地首宗二代甲型H1N1流感病例分析

2009年5月28日广州发现中国内地首宗二代甲型H1N1流感病例.我们对这宗案例涉及的3例患者持续进行了病毒核酸检测,以了解甲型H1N1流感在传播过程中的病毒排毒和病程演变情况,为我国甲型H1N1流感疫情防控提供实验室数据.     

广州市2019年登革热确诊病例空间聚集性及登革病毒E基因进化特征分析

目的:分析2019年广州市登革热流行情况,评估登革病毒4种血清型对流行的影响。方法:在传染病报告信息管理系统中收集2019年广州市登革热确诊病例信息,使用ArcGIS 10.2软件进行空间自相关性和聚集性分析,使用荧光定量PCR对血清标本进行核酸检测,将结果为阳性的血清标本进行病毒分离并测定E基因序列,用PhyML 3...     

2000-2004年广州市登革热血清学和病原学分析

目的 对2000-2004年广州市登革热（DEN）病原体分离鉴定及流行特点分析，为该病的诊断、预防和治疗提供依据。方法 采用间接酶联免疫（ELISA）法、免疫斑点法、免疫层析法、对疑似患者的血清特异性抗体IgM、IgG进行检测。用C6／36细胞对早期病例血清进行病毒分离，以间接免疫荧光（McAb-IFA）、RT-PCR方法鉴定。RT-PCR法检测成蚊、蚊幼。结果 病毒分离株经用单克隆抗体间接免疫荧光（McAb-IFA）、RT-PCR检测鉴定为Ⅰ级登革病毒。检出幼蚊有登革病毒Ⅰ型。结论2001-2004年广州市的登革热流行是由Ⅰ型登革病毒感染所致，2002年出现暴发与流行并延伸到2003年。     

广州市生育期妇女乙型肝炎病毒和SEN病毒感染状况调查

目的了解广州市生育期妇女乙型肝炎病毒和SEN病毒感染状况。方法对2006年在广州市某三甲医院妇产科就诊的年龄介于18～47岁的3208名生育期妇女的血清标本用酶联免疫法检测乙肝两对半,并随机抽取其中200份标本用聚合酶链反应法检测SEN病毒D和H亚型。结果HBsAg阳性率为14.3%（459/3208）,其中HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性占3.2%（103/3208）,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc三项阳性占8.4%（269/3208）,未检出SENV-D和H。结论广州市生育期妇女乙肝病毒携带率高,必须强化乙肝疫苗预防接种,确保新生儿及时、全程接种乙肝疫苗,杜绝乙肝病毒经血传播。SEN病毒感染状况有待进一步研究。     

广州市2011年登革病毒流行状况及E基因进化特征分析

目的 了解2011年广州市登革热的流行情况,分析新分离毒株的E基因分子特征.方法 收集2011年广州市登革热的流行病学资料和血清标本.采用荧光定量PCR检测并确定血清型,C6/36细胞进行病毒分离,测定新分离毒株的E基因序列,利用Mega 4.0软件分析.结果 2011年广州市登革热发病高峰在9-11月.在患者血清中检测出登革热病毒1、2、4型,分离出5株登革热1型毒株.在基因型上,4株属于亚洲型,1株属于美洲/非洲型.结论 广州市登革病毒与东南亚地区的毒株有较高同源性,且存在登革热暴发的潜在风险,该病毒在广州市可能已出现本地化趋势.     

吲哚-3-甲醇抑制人肝癌细胞株SMMC-7721生长作用及机理探讨

目的探讨吲哚-3-甲醇(I3C)抑制人肝癌细胞株SMMC-7721生长作用及机理。方法采用人肝癌细胞株SMMC-7721制备荷瘤裸鼠;通过测量肿瘤大小和病理学检测,观察I3C对肿瘤细胞的抑制作用;采用流式细胞仪检测肿瘤细胞周期、线粒体膜电位;采用Western blot法检测相关蛋白的表达。结果经I3C作用后,SMMC-7721细胞生长变慢,细胞周期、线粒体膜电位、相关蛋白的表达改变。结论 I3C能够抑制SMMC-7721细胞生长,细胞周期和细胞凋亡相关信号分子可能在其中发挥了一定作用。