实时定量PCR检测胰岛素和高糖对巨噬细胞ACAT-1表达的影响

目的利用实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)mRNA的表达。探讨胰岛素和高糖对人THP-1细胞分化的巨噬细胞ACAT-1mRNA表达的影响。方法体外培养人单核细胞株THP-1细胞,由佛波醇肉豆蔻酸乙酸盐(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,后者再由胰岛素和高糖共同干预不同时间(0、6、12、24、48h),用实时定量PCR检测ACAT-1mRNA表达。结果胰岛素和高糖共同作用不同时间后巨噬细胞ACAT-1mRNA的表达量间差别有显著性意义(P<0.01),作用12h与0、6、24、48h的ACAT-1mRNA表达量间差别均有显著性意义(P<0.01),作用48h的ACAT-1mRNA表达量与0h相比差别无显著性意义(P>0.05)。结论胰岛素和高糖共同作用下,巨噬细胞ACAT-1mRNA表达逐渐增加,12h达到高峰,然后逐渐下降,48h恢复到0h时水平。成功建立和应用实时定量PCR检测巨噬细胞ACAT-1mRNA水平是准确评价巨噬细胞功能的方法之一。     

PPAR-γ对巨噬细胞ACAT-1表达的影响及可能的信号途径

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)对巨噬细胞中酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达影响及可能参与的信号途径.方法 在RPMI1640培养基中培养人单核细胞(THP-1),加入佛波酯(PMA)培养48 h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化.在高浓度胰岛素状态下,分别加入PPAR-γ的配体罗格列酮和胰岛素信号途径阻滞剂[细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂PD98059、p38促分裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂SB203580和c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125],采用Western-blot法检测巨噬细胞ACAT-1蛋白水平,实时定量PCR法检测ACAT-1 mRNA水平.结果 在高胰岛素状态下,给予罗格列酮干预后ACAT-1 mRNA和蛋白表达均降低;再加入SB203580后ACAT-1 mRNA和蛋白表达较加入罗格列酮时均增加.结论 p38MAPK途径参与了PPAR-γ抑制ACAT-1的表达,并发挥抗动脉粥样硬化的作用.     

渥曼青霉素阻断罗格列酮对人巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响

目的:研究过氧化体增殖物激活型受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)配体罗格列酮对巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响及可能机制。方法:在RPMI 1640培养基中培养人单核细胞株(THP-1),加入佛波酯培养48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。将细胞分为空白对照组、不同浓度罗格列酮组和罗格列酮 渥曼青霉素(wortmannin)组,运用实时定量PCR和Western blot,观察巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:罗格列酮可明显抑制ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性;加入磷酯酰肌醇三磷酸激酶(phosphate dylinositol 3-kinase,PI3K)信号途径抑制剂渥曼青霉素后ACAT-1表达较罗格列酮组高,较空白对照组低。结论:PPAR-γ配体罗格列酮通过PI3K途径抑制ACAT-1表达发挥其抗动脉粥样硬化的作用。     

通过ROC曲线评估联合检测TnI、hs-CRP和NT-proBNP对老年急性冠状动脉综合征的诊断价值

目的:通过ROC曲线探讨肌钙蛋白I(TnI)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和N末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)联合检测在老年急性冠状动脉(冠脉)综合征(ACS)临床诊断中的应用价值。方法:收集不稳定型心绞痛(UA组,60例)、非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI组,61例)、ST段抬高性心肌梗死(STEMI组,59例)患者及健康者(对照组,60例)血清样本,用化学发光免疫法检测TnI,电化学发光免疫法检测NT-proBNP,速率散射免疫比浊法测定hs-CRP;绘制ROC曲线并建立Logistic回归模型,分析各指标单独和联合检测在UA、NSTEMI及STEMI诊断中的作用。结果:除UA组TnI外,ACS 3个组中血清TnI、hs-CRP与NT-proBNP值显著高于对照组(P<0.05);与单独检测相比,3项指标联合检测时,UA组、NSTEMI组和STEMI组ROC曲线下面积(AUC)[(0.858±0.051)、(0.988±0.013)和(0.998±0.004)]最大,灵敏度(57.8%、95.9%和99.1%)和特异度(94.7%、100.0%和100.0%)也最好。结论:联合检测TnI、hs-CRP和NT-proBNP有助于老年ACS中UA的诊断,对NSTEMI与STEMI的灵敏度和特异度也能达到最优化,但对区分NSTEMI和STEMI效果不明显。     

肝硬化合并肝外门静脉、脾静脉血栓形成

肝硬化合并肝外门静脉、脾静脉血栓形成姜宏范世刚葛晶覃厚芳患者男，４３岁。腹胀伴尿少７天。体检：腹部膨隆，腹壁静脉轻度曲张，上行血流，移动性浊音阳性。实验室检查：血小板８５×１０９／Ｌ，凝血酶原时间１９秒，甲胎蛋白阴性，腹水为漏出液，未查见癌细胞。彩色...     

MSCT在强直性脊柱炎骶髂关节病变分级中的诊断价值

目的：探讨MSCT在强直性脊柱炎骶髂关节病变分级中的诊断价值。方法收集本院经临床确诊为AS SIJ病变且均行DR及MSCT检查的患者198例,分析双侧SIJ的6种征象,比较DR与MSCT在诊断及分级中的差异。结果 DR及MSCT 6种征象出现频率分别为：关节面模糊(180,201),关节面硬化(181,200),关节面下囊状、鼠咬状骨质破坏(176,205),关节间隙狭窄(183,183),关节间隙增宽(186,190),关节强直(186,190;诊断符合率分别为Ⅰ级44.7%,Ⅱ级55.7%,Ⅲ级58.8%,Ⅳ级62.5%)。结论 MSCT较DR能发现更多AS SIJ病变的细微改变,对Ⅰ、Ⅱ期的诊断优于DR,可提高本病分级诊断的准确率。     

胰岛素抵抗对巨噬细胞ACAT-1表达的影响及罗格列酮的干预作用

目的 进一步探讨动脉粥样硬化的发生机制及罗格列酮的干预作用.及过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)高亲和性配体罗格列酮的干预作用.方法 体外培养人单核细胞系THP-1细胞,诱导分化为巨噬细胞,分别采用高浓度胰岛素、葡萄糖和不同浓度罗格列酮进行干预,实时定量PCR法检测巨噬细胞人巨噬细胞酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)mRNA表达水平,Western blot检测其蛋白表达.结果 在高浓度胰岛素和葡萄糖状态下巨噬细胞ACAT-1m RNA和蛋白表达明显增加(P＜0.01);罗格列酮可明显下调其表达且呈浓度依赖性.结论 胰岛素抵抗状态下巨噬细胞ACAT-1表达水平升高,罗格列酮可明显下调其表达;此可能为其发挥抗动脉粥样硬化作用的机制之一.     

早期肠内营养对食管癌患者术后康复的影响

目的观察早期肠内营养（EEN）对食管癌患者术后恢复的影响。方法随机将186例食管癌术后的患者分为两组，其中试验组92例施行EEN，对照组94例未施行EEN。分别对两组患者的术后并发症的发生率、血清白蛋白、前清蛋白、转铁蛋白，术后肠功能恢复时间，以及血清丙氨酸氨基转移酶、胆红素、肌酐和血糖进行统计分析。结果186例患者术后出现并发症28例，其中试验组8例（8．7％），对照组20例（21．3％），两组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。试验组血清清蛋白、前清蛋白、转铁蛋白在术后第5、9天与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。试验组术后排气和排便时间明显早于对照组。两组术后肝肾功能、血糖差异均无统计学意义。结论EEN能明显降低食管癌患者术后并发症的发生率，显著改善术患者后的营养不良状况，促进患者的康复。     

人ACAT1基因P1启动子的克隆及意义

目的克隆人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT 1)基因P 1启动子。方法应用PCR方法从人单核细胞系THP-1扩增分离出ACAT 1基因P 1启动子全长片段,将PCR产物克隆入T载体,并对所获得的序列进行生物信息学分析。结果经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,克隆的ACAT 1基因P 1启动子片段碱基序列与G enB ank数据库一致,未发现突变。结论人ACAT 1基因P 1启动子克隆成功,此为动脉粥样硬化(A S)过程中ACAT 1基因转录调控机制的研究奠定了基础。     

心脏瓣膜钙化与增龄相关性改变

目的:研究心脏瓣膜钙化的增龄性改变。方法:在我院体检行超声心动检查诊断为心脏瓣膜钙化的患者1 448例,根据年龄分为<50岁组(60例)、50～59岁组(290例)、60～69岁组(375例)、70～79岁组(279例)、80～89岁组(270例)和≥90岁组(174例)。用Logistic回归分析年龄对心脏瓣膜发生钙化的相对风险(HR)。结果:各组1个瓣膜钙化的发生率分别为3.3%(2/60)、17.2%(50/290)、46.4%(174/375)、82.4%(230/279)、91.1%(246/270)、92.5%(161/174),差异有统计学意义(P<0.01);各组2个瓣膜钙化的发生率分别为0、0、1.6%(6/375)、7.2%(20/279)、18.1%(49/270)、31.0%(54/174),差异有统计学意义(P<0.01)。年龄(每10岁)对发生心脏瓣膜钙化的HR及95%可信区间(95%CI)分别为:单因素控制,HR 3.712,95%CI 3.052～4.515,P<0.01;多因素控制,HR 3.169,95%CI2.523～3.671,P<0.01。结论:心脏瓣膜钙化随年龄增长发生率明显增加,60岁以上老年人更容易出现心脏瓣膜钙化。