HPV6型E6与结核杆菌HSP70融合基因的构建及原核表达

目的构建HPV6型E6抗原与结核杆菌HSP70的融合基因,在大肠杆菌中进行表达和纯化。方法利用PCR方法扩增结核杆菌HSP70基因,插入原核表达载体pGEX-4T-1;经测序正确后,再通过PCR方法扩增HPV6型E6基因片段,测序后插入HSP70基因的5′端,构建HPV6E6与结核杆菌HSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-E6-HSP70;在含有该质粒的大肠杆菌DH5α,进行诱导表达和分离纯化。结果成功地构建了pGEX-E6-HSP70原核表达质粒,诱导表达产物与抗GST抗体在113 kD处有很强的交叉反应;大肠杆菌超声破碎后的上清液用SDS-PAGE检测到表达的蛋白多为可溶性融合蛋白;经GST融合蛋白表达系统纯化,得到了E6与结核杆菌HSP70的可溶性融合蛋白。结论成功获得HPV6型E6与结核杆菌HSP70的融合蛋白,为研究HPV6型E6与结核杆菌HSP70融合蛋白疫苗在尖锐湿疣治疗中的作用提供了材料。     

淋病奈瑟菌中高水平的喹诺酮耐药:2例病例报告

氟喹诺酮类药物是广泛应用于治疗淋病奈瑟菌的口服制剂,其耐药性呈散在发生,形成较慢,且水平较低,最小抑菌浓度(MICs)的增加大多与药物使用剂量较高有关。该文报告2例由高水平喹诺酮耐药株引起的淋球菌感染、用大剂量(500mg)环丙氟哌酸治疗失败的病例。     

EB病毒膜蛋白gp350对培养CD5+B细胞产生天然自身抗体的影响

目的:探讨EB病毒膜表面糖蛋白gp350是否刺激培养的CD5 B细胞产生具有天然自身抗体性质的免疫球蛋白. 方法:无菌采集新生儿脐带血,RosetteSepTM法分离总B细胞,免疫磁珠分离CD5 B细胞,将分离得到的总B, CD5 B和CD5-B 3组细胞分别用EB病毒、紫外线照射灭活的EB病毒(UV-EBV)、gp350及TPA刺激,于培养的10~30 d间,每4 d分别留取上清,ELISA法检测培养上清中的IgG, IgM及抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)IgG, IgM,阳性对照为健康成人血清,阴性对照为未加刺激的培养细胞上清. 结果: EB病毒感染的3组细胞于培养的第7日发生转化,表现为细胞成团生长,体积增大,不断增殖,14 d以后的培养上清中IgM, AK auto Ab IgM A值较对照组显著升高(P<0.01);紫外线照射灭活的EB病毒、gp350刺激的细胞存活15 d,14 d CD5 B细胞培养上清中IgM A值高于对照组(P<0.05);TPA及未刺激的细胞存活7 d,培养上清中未检测到免疫球蛋白. 结论: EB病毒可能通过其膜表面糖蛋白gp350刺激培养的CD5 B细胞产生具有天然自身抗体性质的免疫球蛋白.     

复方青黛胶囊治疗寻常型银屑病50例疗效观察

我院于１９９６年１０月～１９９７年５月间使用复方青黛胶囊（陕西省榆林地区中药厂生产）治疗寻常型银屑病５０例,并与复方青黛丸（榆林地区中药厂生产）进行对照比较,观察了复方青黛胶囊治疗寻常型银屑病的疗效及不良反应,现报告如下。１一般资料所有病例均按临床计...     

人乳头瘤病毒6型E7与结核杆菌热休克蛋白70融合基因的构建及原核表达

目的：构建结核杆菌热休克蛋白(HSP)70与人乳头瘤病毒(HPV)6型E7抗原的融合基因,在大肠杆菌中进行表达和纯化。方法：利用PCR方法扩增结核杆菌HSP70基因,插入原核表达载体pGEX-4T-1;经测序后,再通过PCR方法扩增HPV6型E7基因片段．测序后插入HSP70基因的5’端,构建HPV6E7与结核杆菌HSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX—E7-HSP70：在含有该质粒的大肠杆菌DH5α中,进行诱导表达和分离纯化。结果：成功地构建了pGEX—E7-HSP70原核表达质粒：在含有该质粒的大肠杆菌DH5α中,经异丙醇-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后表达相对分子质量约为108000的蛋白;经谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达系统纯化,得到E7与结核杆菌HSP70的可溶性融合蛋白。结论：成功获得HPV6型E7与结核杆菌HSP70的融合蛋白,为研究该融合蛋白疫苗在尖锐湿疣治疗中的作用奠定了基础。     

朗格汉斯细胞膜上B7的表达及功能

朗格汉斯细胞（ＬＣ）是骨髓来源的表达主要组织相容性抗原（ＭＨＣ）的树突状细胞 ,占整个表皮细胞数的１ %～２ % ,是主要的抗原提呈细胞（ＡＰＣ）［１］。当ＬＣ捕获经过皮肤进入体内的外界抗原时 ,它本身也受到来自周围的角质形成细胞等释放的细胞因子如粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ ＣＳＦ）的调节 ,使ＬＣ进入真皮和淋巴管。在ＬＣ移动的同时也伴随着其功能的成熟 ,即ＭＨＣ和包括Ｂ７在内的共刺激分子的表达增加。最终通过双信号模型激活Ｔ细胞 ,导致Ｔ细胞的克隆增殖和细胞因子的产生 ,细胞因子反过来又可调节共刺激分子的…     

银屑病与T细胞和自身免疫

银屑病的发病机制涉及到４种重要的细胞类型,大量证据表明Ｔ细胞可能起着重要作用,该文列举了Ｔ细胞功能原发缺陷的证据,皮损内Ｔ淋巴细胞活化是银屑病表皮过度增殖的介体,皮损中存在着特定类型的Ｔ细胞亚群,细菌超抗原与体内角蛋白之间叉交表的位存在是银屑病中自身免疫反应的主要机制。     

银屑病与T细胞和自身免疫

银屑病的发病机制涉及到4种重要的细胞类型,大量证据表明T细胞可能起着重要作用,该文列举了T细胞功能原发缺陷的证据,皮损内T淋巴细胞活化是银屑病表皮过度增殖的介体,皮损中存在着特定类型的T细胞亚群,细菌超抗原与体内角蛋白之间交叉表位的存在是银屑病中自身免疫反应的主要机制。     

卡马西平致重症红皮病伴间质性肾炎1例

患者男，６７岁，以面部、躯干、四肢弥漫性潮红、脱屑、丘疹伴剧痒２０余天，加重２天之主诉入院。２０天前患者出现发热，全身散在米粒至绿豆大小丘疹伴瘙痒，曾在当地以“肺炎”、“过敏性皮炎”之诊断给予静脉滴注先锋霉素Ｖ和双黄连注射液，并辅以抗组胺药物治疗，发...     

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎研究进展

抗中性粒细胞胞浆抗体相关性血管炎的发病机制至今不明。近来的研究发现，针对蛋白酶3和髓过氧化物酶等胞浆成分的抗中性粒细胞胞浆抗体与该类血管炎密切相关，抗中性粒细胞胞浆抗体与中性粒细胞和单核细胞发生相互作用，导致白细胞活化，并黏附于血管内皮，释放活性氧中间体，导致内皮细胞损伤，最终引起血管的坏死性炎症。