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探讨糖化终末产物(AGE)对小鼠胰岛细胞株MIN6细胞活力及活性氧(ROS)水平的影响.制备BSA-AGE,用不同浓度AGE(100、200、400 mg/L)干预MIN6细胞不同时间后,MTF比色法检测细胞活力变化.以活性氧捕获剂双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)孵育细胞,通过流式细胞仪检测细胞内二氯荧光黄(DCF)的荧光强度而测得细胞内活性氧水平,并测定胰岛素分泌的变化.随着AGE浓度的升高和作用时间的延长,细胞活力明显下降(P<0.05).经DCFH-DA孵育后流式细胞仪检测显示,AGE处理组细胞内DCF平均荧光强度较对照组明显升高(P<0.05).胰岛素分泌量随着AGE浓度的增高和时间的延长,呈下降趋势(P>0.05).提示BSA-AGE抑制MIN6活力,使细胞内活性氧生成增加,诱导MIN6细胞氧化应激.Abstract: To explore the effect of advanced glycation end-products(AGEs)on cell viability and level of reactive oxygen species(ROS)in MIN6 cells. After intervention of various concentrations(100,200, and 400 mg/L)of AGEs for some time, cell viability was detected by MTT assay. 2', 7'-dichlorofluorescein diacetate(DCFH-DA)was used as a reactive oxygen species capture agent. The fluorescent intensity of 2', 7'-dichlorofluorescein(DCF), which was the product of cellular oxidation of DCFH-DA, was detected by flow cytometry. The level of ROS and insulin secretion was thus measured. Viability of MIN6 cells was inhibited by AGEs in a dose and time dependent manner(P<0.05).Intracellular fluorescent intensity of DCF was markedly elevated in the AGEs groups as compared with that in the control group(P<0.05).Insulin secretion was decreased in the AGEs groups than that in the control group(P>0.05). The results suggest that AGEs inhibit the viability and induce oxidative stress in MIN6 cells by overproduction of ROS. 相似文献
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聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)-1是一类具有重要生理功能的核酶,它在糖尿病神经病变的发病中发挥重要作用.PARP-1活化导致NAD~+耗竭、能量衰竭、转录调控和基因表达发生改变、3-磷酸甘油醛脱氧酶受抑制,从而参与糖尿病神经病变的发生、发展.多个动物实验显示PARP-1抑制剂对糖尿病神经病变有改善作用,为治疗糖尿病神经病变的新药研发指明了方向. 相似文献
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目的 分析肾小球滤过率(GFR)公式估算值(eGFR)与99锝-二乙烯三胺五醋酸 (99mTc-DTPA)法测定值(99mTcGFR)的相关性,探讨适合中国慢性肾脏病(CKD)住院患者eGFR的估算方法。方法 选择1 033例慢性肾脏病住院患者作为研究对象,99mTc-DTPA肾动态显像法测定 99mTc-GFR,酶法检测血清肌酐(SCr)水平。采用Cockcroft-Gault公式、肾脏病膳食改良试验(MDRD)公式、简化MDRD公式、中国MDRD公式、中国简化MDRD公式及CKD-EPI公式计算并用体表面积(BSA)校正后得到eGFR,分别以C-G GFR、7GFR、aGFR、c-7GFR4、c-aGFR4和CKD-EPI-GFR表示。分析99mTc-GFR与eGFR的相关性。结果 相关回归分析显示,C-G GFR、7GFR、aGFR、c-7GFR4、c-aGFR4和CKD-EPI-GFR与99mTc-GFR的相关系数(r)分别为0.805、0.797、0.783、0.791、0.777和0.800,与99mTc-GFR偏差值均值分别为-2.46、-14.24、-16.53、-20.92、-22.92和-13.56。患者99mTc-GFR与SCr水平呈近似双曲线的关系。结论 在基于SCr的公式估算得到的eGFR中,C-G GFR与99mTc-GFR的相关程度最高。提示当以酶法SCr测定结果作为数据源时,C-G公式较适合中国CKD住院患者eGFR的估算。 相似文献
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目的观察银杏叶提取物对糖基化终末产物(AGEs)引起的大鼠肾脏TGF-β及CTGF过表达的影响。方法每日给正常大鼠尾静脉注射AGE-修饰大鼠血清蛋白(AGEs组),部分大鼠同时灌胃给予银杏叶提取物(GBE组),注射天然大鼠血清蛋白(RSP组)和不施加处理的正常大鼠(空白对照组)作为对照。Elisa法检测肾皮质TGF-β及CTGF蛋白的表达,RT-PCR检测TGF-β及CTGF mRNA的表达。结果与RSP组及空白对照组比较,AGEs组大鼠尿蛋白含量明显增加(P〈0.05),TGF-β及CTGF蛋白、mRNA的表达均增高(P〈0.01),给予GBE后尿蛋白含量明显降低(P〈0.01),TGF-β及CTGF蛋白含量及mRNA表达均明显降低(P〈0.05,P〈0.01)。结论 GBE改善AGEs引起的肾功能变化,减轻AGEs诱导的大鼠肾皮质TGF-β及CTGF过表达。提示GBE可通过抑制AGEs引起的TGF-β及CTGF过表达而在糖尿病中起到肾脏保护作用。 相似文献
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环状定点诱变技术在单碱基定点诱变中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的采用环状定点诱变技术将重组真核表达质粒pcDNA3.1-hTSHR中hTSHRcDNA序列上发生突变的单碱基诱变回正常的序列。方法设计1对含预期突变的完全互补的诱变引物,以环状质粒为模板进行PCR扩增,得到带缺口的突变质粒,酶消化去除模板质粒,将PCR产物转化DH5α感受态细胞进行缺口修复和克隆。结果DNA测序表明,在预期位点已成功发生诱变,且目的基因其他部位的碱基序列均未发生随机突变。结论环状定点诱变技术是一种高效、简便、快捷的诱变方法,通过该方法成功实现了目的碱基的定点诱变,为后续研究奠定了基础。 相似文献
380.
钩藤碱化学分析研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
钩藤碱(rhynchophylline)为传统中药钩藤属植物有效成分的主要成分之一,对人体心血管系统、中枢神经系统以及血液系统等具有明确的生物活性作用,是治疗高血压方剂的常用药源。随着现代分析技术的不断发展,钩藤碱的研究取得了很多新进展。为了加快钩藤属中药材的深入开发应用研究,笔者就近十几年来钩藤碱化学分析的研究进展作一综述。 相似文献