cAMP受体蛋白对嗜水气单胞菌生长初期胆汁耐受性的影响

  目的  本研究拟确定cAMP 受体蛋白 对嗜水气单胞菌胆汁耐受性的影响。  方法  构建嗜水气单胞菌的luxS、crp的缺失株及crp回补株，通过胆汁生长实验确定嗜水气单胞菌及其构建株的胆汁耐受性。  结果   嗜水气单胞菌BJ018、BJ018ΔluxS和BJ018Δcrp在LB培养基中生长速度基本一致。 10%胆汁LB中，BJ018和缺失株ΔluxS前8 h生长被抑制，后期呈对数快速生长；其缺失株Δcrp生长速度领先于野生株，早期生长未被抑制。 嗜水气单胞菌BJ018Δcrp的回补株早期生长重新被抑制，与野生株BJ018基本一致。 其他两株嗜水气单胞菌BJ017、BJ054及其缺失株Δcrp胆汁生长结果与BJ018、BJ018Δcrp一致。 这些结果提示嗜水气单胞菌CRP影响菌株对胆汁的耐受。   结论  CRP的存在影响嗜水气单胞菌在胆汁中的生长，可能在胆汁耐受调控中起到重要作用。     

乳果糖口服液联合四磨汤口服液治疗4岁以上小儿功能性便秘疗效分析

目的:探讨乳果糖口服液联合中成药四磨汤口服液治疗4岁以上小儿功能性便秘(FC)的临床疗效,为治疗小儿功能性便秘提供参考。方法:将60例4岁以上功能性便秘患儿随机分为两组,均予包括排便习惯训练、合理饮食、足量饮水、增加活动量及心理行为治疗等基础治疗,治疗组予以乳果糖口服液联合四磨汤口服液治疗3周,对照组予四磨汤口服液治疗3周,分别记录第1周、第3周的疗效及停药4周后的复发率。结果:两组功能性便秘患儿症状均获得明显改善,治疗第1周和第3周后治疗组总有效率为76.7%和93.3%,对照组总有效率为50.0%和73.3%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);停药4周的复发率治疗组为7.1%,对照组为22.7%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:乳果糖口服液联合四磨汤口服液治疗4岁以上小儿功能性便秘疗效好,具有临床应用价值。     

snoRNA87在原发性肝癌中的表达及意义

目的探讨小核仁RNA87(snoRNA87)在原发性肝癌患者肝癌组织中的表达及意义。方法取100例原发性肝癌患者的肝癌组织及对应的癌旁组织,免疫组化法检测snoRNA87的阳性表达率,分析其与原发性肝癌患者临床特征的关系。荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测snoRNA87的相对表达量,并据此分为高表达组(n=62)和低表达组(n=38),Kaplan-Meier法绘制生存曲线,生存率的比较采Log-rank检验,比较两组患者平均生存时间、中位无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)。探讨snoRNA87对原发性肝癌的诊断价值。结果肝癌组织中snoRNA87的阳性表达率为91%,明显高于癌旁组织的14%,差异有统计学意义(P<0.01)。不同分化程度、TNM分期、血清甲胎蛋白(AFP)浓度原发性肝癌患者肝癌组织中snoRNA87阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。高表达组患者的5年生存率为14.52%(9/62),明显低于低表达组患者的42.11%(16/38),高表达组患者的5年平均生存时间为(2.13±0.50)年,明显短于低表达组患者的(3.56±1.01)年,差异均有统计学意义(P<0.01)。高表达组患者的中位PFS为10.6个月,长于低表达组患者4.5个月,中位OS为20.4个月,短于低表达组患者的32.2个月。snoRNA87诊断原发性肝癌的ROC曲线下面积(AUC)为0.734(0.577~0.980),当截断值为38.12时,诊断灵敏度为93.12%,特异度为94.25%;当截断值为17.59时,诊断灵敏度为97.58%,特异度为91.32%。结论snoRNA87在原发性肝癌患者肝癌组织中阳性表达率较高,且可能与原发性肝癌患者的分化程度、TNM分期和血清AFP浓度有关,对原发性肝癌的诊断价值较高。     

CXCL16基因多态性与C反应蛋白的相关性研究

目的探讨健康人群趋化因子CXC配体16（CXCL16）基因多态性与血清CXCL16、C反应蛋白（CRP）水平的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测204名健康体检者CXCL16基因A181V多态性,同时分别应用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫比浊法检测血清CXCL16和高敏CRP（hs-CRP）水平,并进行统计学分析。结果 AA基因型血清hs-CRP水平明显高于GG、GA基因型（P=0.01）;多元线性回归显示A等位基因是高hs-CRP水平的独立危险因素（OR=1.25,95%CI：1.08~2.59,P=0.021）;以血清hs-CRP水平中位数（0.91 mg/L）为界定值分为2组,AA基因型和A等位基因频率在hs-CRP〉0.91 mg/L组中显著升高（P=0.008,0.036）;而血清CXCL16水平与其基因型间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 CXCL16基因A181V位点基因多态性与血清hs-CRP水平相关,A等位基因可能参与机体炎症反应的发生、发展。     

阴沟肠杆菌喹诺酮耐药基因的检测

目的调查阴沟肠杆菌中喹诺酮耐药基因（qnr）的携带状况,为临床治疗提供依据。方法使用VITEK-AMS鉴定病原菌;qnr与超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药基因型检测采用聚合酶链反应（PCR）扩增技术;耐药基因水平传播采用质粒接合试验;根据CLSI指南进行药敏试验。结果55株阴沟肠杆菌中,23.6%qnr基因检测阳性,其中46.2%的qnr基因阳性菌株对环丙沙星敏感,qnr基因阴性菌株的敏感率为83.3%;38.2%的产ESBLs菌株qnr基因检测阳性,2株qnr基因阳性菌株接合试验成功。结论产ESBLs阴沟肠杆菌中常同时携带qnr基因,qnr基因可以进行菌株间的水平传递。     

检验医师规范化培训的实践与探索

实验室检验为临床提供及时、准确可靠的检测数据，在疾病诊断、疗效观察和预防活动中起到重要作用。随着医学检验发展成为检验医学，其所承担的职责范围也超出传统的医学检验范畴，例如临床沟通、指导检验项目选择、检验结果解释和咨询等。因此，培养既懂临床又懂检验的检验医师成为必然选择。     

CRISPR/Cas系统在病原体检测方面的研究进展

规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(clustered regularly interspaced short palindromic repeats /CRISPR-associated, CRISPR/Cas)是一种广泛存在于细菌和古细菌内部的特有的适应性免疫系统,用于抵抗外来核酸入侵。目前,该系统被分为6个类型和22个亚型,常见被应用于核酸检测的Cas9、Cas12和Cas13分别属于II型、V型和VI型。根据世界卫生组织的标准,理想的病原体检测方法应该具备灵敏、特异、快速、低成本、易于使用和无需大型设备等特点,而CRISPR/Cas的特性使其在病原体检测方面显示出了巨大的潜力。本文主要总结了Cas9、Cas12、Cas13和Cas14在病原体检测中的应用,并对CRISPR/Cas未来的应用前景进行了展望。     

泌尿系感染病原菌分布及耐药性分析

目的调查泌尿系统感染患者病原菌分布及常用抗生素耐药情况,以指导临床合理用药.方法用无菌方法收集患者尿液标本,采用Vitek-AMS鉴定病原菌和CLSI/NCCLS推荐的纸片扩散法进行药敏试验.结果从1882例患者的尿液标本中分离出1917株病原菌,大肠埃希菌、假丝酵母菌、肠球菌及表皮葡萄球菌分列前4位（32.2%、16.3%、10.8%和8.3%）.产超广谱β-内酰胺酶菌株（ESBLs）、耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）、耐万古霉素肠球菌（VRE）和高水平庆大霉素耐药肠球菌（HLGR）检出率分别为30.5%、74.4%、0.78%和72.5%.MRSE和非MRSE对环丙沙星、复方新诺明、庆大霉素、红霉素及克林霉素的耐药率分别为72.3%和24.4%、63.0%和48.8%、37.8%和0、82.4%和68.3%、56.3%和12.2%.HIGR和非HIGR对环丙沙星、青霉素、氨苄西林和呋喃妥因的耐药率分别为86.7%和66.1%、66.0%和39.3%、74.0%和45.6%、19.2%和10.2%.结论大肠埃希菌为泌尿系感染的主要病原菌,假丝酵母菌分离率显著上升;特殊耐药菌株对常用抗菌药物的耐药率明显高于相应的普通菌株.     

细胞中同时检测特定标志物蛋白和基因表达方法的建立

目的在同一细胞中通过免疫组化和荧光原位杂交联合检测特定标志物的蛋白和基因水平。方法采用人乳腺癌细胞系JIMT-1作为研究对象,分别采用免疫荧光(IF)和免疫组织化学(IHC)检测JIMT-1细胞中HER2表达情况,并比对两种方法得到的HER2蛋白细胞定位和表达水平是否相同;在JIMT-1细胞中分别采用IF和荧光原位杂交法(FISH)以及两者联合检测法检测HER2蛋白和基因表达水平;在JIMT-1细胞中对HER2、Pan-CK、Ki67蛋白和基因水平进行联合检测。结果JIMT-1细胞中IF和IHC检测HER2蛋白水平和细胞定位相同;IF和FISH单独检测HER2蛋白和基因表达与两种方法联合使用的检测结果一致,IF和FISH联合检测不会影响HER2蛋白的细胞定位和表达水平的判读,同时对于HER2基因拷贝数判读无影响;通过对不同细胞定位的标志物检测,发现细胞膜、细胞浆和细胞核蛋白标志物均可联合FISH检测,并且不会影响标志物蛋白表达和定位的判读以及基因拷贝数的判读。结论采用IF和FISH联合检测可以在同一细胞中对特定标志物蛋白和基因水平同时检测。