糖尿病视网膜病变黄斑厚度定量分析

目的：研究糖尿病视网膜病变（DR）患者黄斑水肿情况及与荧光渗漏和视功能关系。方法：应用视网膜厚度分析仪（RTA）对18例（25眼）单纯型糖尿病视网膜病变的黄斑区视网膜进行扫描并对其厚度进行定量测量，并与荧光造影结果及视力进行对比分析，结果：RTA检查可清晰的观察到DR患者黄斑区的形态改变；矫正视力负对数之间呈现正相关关系。结论：DR患者黄斑区毛细血管渗漏与组织再吸收失衡是引起黄斑水肿的关键因素，黄斑水肿是导致视力下降的重要原因，RTA检查可为糖尿病黄斑水肿提供客观和精确的诊断依据。     

视网膜血管网几何参数与老年人认知能力的关系

目的研究视网膜血管网与老年人认知功能之间的关系。方法在眼科门诊就诊的60岁以上并同意接受测试的老年患者纳入研究。受试者需进行彩色眼底照相及认知能力测试,包括简易精神状态检查(MMSE)、逻辑记忆测试、瑞文标准推理测验(SPM)、词汇联想测试(COWAT),一般认知能力评分(GCA)。后期处理眼底相并测量视网膜血管网的几何参数,包括视网膜动脉当量(RAE)、视网膜静脉当量(RVE)、动静脉比率(AVR)、分支系数(BC)、分支夹角(ω)。广义线性模型使用协方差分析(ANCOVA)进行统计分析。结果 BC中位数较理论最佳BC值之间的偏差与GCA(η2=0.034,P=0.02)及语言流畅性(η2=0.037,P=0.01)存在显著相关性。分支夹角较理论最佳夹角值(75°)的偏差与逻辑记忆显著相关(η2=0.026,P=0.03)。RAE、RVE、AVR未证明存在显著相关性。结论本研究揭示了视网膜血管几何参数与认知能力之间的关系,验证了"视网膜微血管可以作为脑微血管情况的替代指标"的观点。     

糖尿病视网膜病变的病理机制和新型药物研究进展

目前全球糖尿病视网膜病变(DR)患者约9 300万,其中增殖性DR(PDR)患者1 700万,糖尿病性黄斑水肿患者2 100万,威胁视力的DR患者2 800万〔1〕。DR属于糖尿病引起的微血管病变,是一种涉及多种细胞、分子的非常复杂的视网膜疾病。     

老年黄斑变性脉络膜新生血管膜的基质侵袭增生活性

目的 研究老年黄斑变性(AMD)脉络膜新生血管膜(CNVM)的增殖活性.方法 22例AMD病人的CNV膜,用免疫组化的方法分析血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)、基质金属蛋白酶-9(MMP9)在CNV膜中的表达.结果 活动期CNV膜与消退期、静止期CNV膜对比,VEGF、MMP2、MMP9均有较高的表达;在静止期CNV膜的 VEGF、MMP2、MMP9无表达或表达较少 (P＜0.01).结论 细胞的基质侵袭力、促细胞增殖活性的VEGF、MMP2、MMP9与CNV膜的病理分期(活动期、消退期、静止期)具有明显的相关性.     

点突变导致Rb1基因内部密码形成终止

本实验中使用聚合酶链反应—单链构象多态（ＰＣＲ—ＳＳＣＰ）联合序列分析对视网膜母细胞瘤肿瘤组织Ｒｂｌ基因进行检测时，发现Ｒｂｉ基因第６Ｐ外显子内Ｔ至Ｇ，点突变、第２３外显子内Ｇ至Ｔ点突变，其结果导致Ｒｂｌ基因编码序列终止密码的形成，这种改变无疑使Ｒｂｌ基因的完整表达受挫。     

点突变对RB1基因拚接区的影响

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ联合序列分析对视网膜母细胞瘤肿瘤组织ＲＢ１基因存在状态进行检测，以掌握视网膜母细胞瘤发生时确切的ＲＢ１基因突变类型及发生位置。除发现编码区内ＲＢ１基因点突变、缺失和插入改变处，尚发现成熟ｍＲ－ＮＡ拚接位点特有序列的点突变，ＲＢ１基因此种改变尚属少见。     

PCR-SSCP联合序列分析法在RB1基因突变检测中的应用

用聚合酶链反应-单链构象多态(PCR-SSCP)联合序列分析，对视网膜母细胞瘤肿瘤组织RB1基因存在状态进行检测。对RB1基因全部27个外显子分别进行PCR扩增后，选用适当的限制性核酸内切酶将扩增产物切割成200bp左右的片段，加热至双链解离后，6%聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳后对有异常电泳迁移率条带所属标本的同一外显子行PCR扩增、序列分析，进一步证实突变的位置和类型。本研究发现包括点突变、缺失、插入等RBl基因改变，显示PCR-SSCP联合序列分析在已知序列基因突变检测中的敏感性和可靠性。 （中华眼底病杂志，1994，10：17-20）     

激活素A对人皮肤微血管内皮细胞周期的影响

目的 观察激活素A对人皮肤微血管内皮细胞周期的影响,探讨激活素A抗新生血管形成的可行性.方法 传代培养人皮肤微血管内皮细胞,以脂质体介导将真核表达质粒pEGFP-ActivinA转染该细胞,MTT法检测基因转染对人皮肤微血管内皮细胞增殖的影响,流式细胞仪检测激活素A基因转染后对细胞增殖周期的影响.结果 MTT结果显示,转染后48 h与72 h,转染组与对照组比较细胞增殖有明显的抑制(P＜0.05);流式细胞仪检测结果显示,激活素A基因转染组G0/G1细胞比例增加,S期细胞比例减少.结论 激活素A能够抑制人皮肤微血管内皮细胞的增殖,是一种潜在的抗新生血管药物.     

青光眼分子遗传学研究进展

近年来 ,青光眼的分子水平研究有了飞速的发展。目前已鉴定出 6个与原发性开角型青光眼有关的基因位点 ,2个与先天性青光眼有关的位点 ,以及 2个与伴有全身或眼部发育异常的青光眼有关的位点。本文就最近的文献进行了综述 ,总结了青光眼遗传学研究的进展     

大鼠视网膜干细胞与神经干细胞体外增殖、分化特点比较

目的 通过对大鼠视网膜干细胞和神经干细胞体外增殖、分化特点进行比较,进一步明确视网膜于细胞自我更新及向神经细胞方向分化的能力.方法 实验研究.分离出生10 d大鼠睫状体区组织及新生大鼠脑组织,分别应用酶消化法将两种组织制成单细胞悬液,放入含有20 μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20μg/L表皮生长因子及1×B27添加剂的无血清DMEM/F12培养液中培养,观察并比较视网膜干细胞及神经干细胞体外增殖的特点.分别取第2代细胞,应用免疫细胞化学染色法检测干细胞特异性抗原神经巢蛋白（nestin）及细胞分裂增殖标志物5-溴脱氧尿核苷（BrdU）的表达.同时,应用含50 ml/L的胎牛血清及1×N2添加剂的培养基促进其分化,观察两种细胞向神经细胞方向分化的特点：分别应用免疫细胞化学染色法对分化后的细胞nestin、神经无标志物神经元特异性烯醇酶（NSE）、神经胶质细胞标志物神经胶质酸性蛋白（GFAP）进行检测,并应用卡方检验对两种干细胞分化后的NSE及GFAP阳性细胞数比例进行比较.结果 两种细胞原代培养48 h后均可见小的球状细胞团悬浮生长,折光性强.原代培养约7 d后传代,传代后细胞能重新形成球状细胞团,应用免疫细胞化学染色方法均可检测到细胞内nestin及BrdU的阳性表达,视网膜干细胞体外增殖的能力较神经干细胞弱.两种细胞均可在血清诱导条件下转变为贴壁生长,并分化出具有神经细胞形态的细胞.诱导第7天进行免疫细胞化学染色,检测出两种干细胞表达nestin阳性细胞数比例分别为（9.5±3.5）%及（9.1±0.7）%.视网膜干细胞分化后NSE及GFAP的阳性细胞数比例分别为（11.2±2.8）%及（18.9＋2.1）%,低于神经干细胞分化后两种标志物阳性细胞数比例[（34.1±63）%及（41.9±3.3）%],NSE、GFAP在两组表达的差异均有统计学意义（x2=103.23,P＜0.05;x2=74.36,P＜0.05）.结论 来源于睫状体区的大鼠视网膜干细胞形态、体外增殖及可分化特性与神经干细胞相似,但其增殖及分化为神经细胞的能力较神经干细胞弱.