白血病细胞系中WT1基因启动子区域DNA甲基化的研究

目的应用基于聚合酶链反应(PCR)的实验方法,研究白血病细胞系中WT1基因启动子区域的DNA甲基化水平及其与WT1基因表达的关系.方法采用RT-PCR技术及甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术,检测HL-60、Jurkat及KG-1等白血病细胞系中WT1基因mRNA表达水平及其启动子区域的DNA甲基化状态;以5-杂氮脱氧胞嘧啶(5-aza-CdR)对启动子区域DNA高甲基化的U937细胞系进行去甲基化处理后,观察WT1基因表达水平的改变.结果 HL-60、K562、KG-1、NB4及SHI-1细胞系中WT1水平高表达,而Jurkat和U937细胞表达水平极低,同时检测到这两个细胞系存在WT1基因启动子区域DNA高甲基化;经去甲基化处理后,U937细胞系的WT1基因表达水平较未处理者升高.结论 WT1基因启动子区域DNA高甲基化是抑制其表达的机制之一.     

WT1(17AA+)剪接变异体在白血病中表达

目的：探讨不同白血病细胞株及不同亚型急性白血病患者原代骨髓细胞中WT1（17AA＋）剪接变异体的表达水平。方法：建立实时定量RT—PCR方法，检测K562、SHI、Jurkat、NB4、NB4／WT1A、NB4／WT1D等白血病细胞株及79例初诊急性白血病患者原代骨髓细胞中WT1基因和WT1（17AA＋）剪接变异体表达水平，并计算WT1（17AA＋）／WT1比值。结果：白血病细胞株K562、SHI、NB4、NB4／WT1A、NB4／WT1D中WT1基因表达水平较Jurkat、U937高2～3个对数级，且K562和NB4细胞株中WT1表达以WT1（17AA＋）剪接变异体优势表达。79例急性白血病患者原代骨髓细胞中WT1总体表达水平在0．03～34．17之间，中位数为1．02，明显高于23例对照非白血病患者（P〈0．001），其WT1（17AA＋）／WT1比值在0．30～0．93之间，中位数为0．62，WT1（17AA＋）剪接变异体表达在不同亚型急性白血病之间无统计学差异（F=0．152，P=0．979）。结论：高表达WT1的白血病细胞株及白血病患者骨髓细胞中WT1基因以WT1（17AA＋）剪接变异体优势表达，且WT1（17AA＋）剪接变异体表达在不同亚型急性白血病之间无明显统计学差别。     

慢性粒细胞白血病患者中C/EBPζ基因转录本的定量研究

目的研究慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia，CML）患者中CCAAT／增强子结合蛋白ξ（CCAAT／enhancer binding protein，C／EBPξ）的表达及其意义。方法建立实时定量聚合酶链反应对76例不同阶段CML患者和16名正常对照的骨髓单个核细胞中C／EBPξ转录本含量进行检测。结果与正常对照（中位12．20）相比，慢性期、加速期和急变期CML患者中C/EBPξ转录本明显降低，中位含量分别为2，5、3．31和2，22（P〈0，01、〈0，05，〈0，01），8例治疗后达到细胞遗传学缓解者则恢复至正常水平（中位15．43，P〉0．05），而干扰素治疗无效的4例患者中表达水平则进一步下降（中位1．56，P〈0．01）。结论CML患者中C／EBPξ基因表达下降，可能与其发病相关。     

疗程拖延对儿童急性B淋巴细胞白血病复发的影响

目的：探讨急性B淋巴细胞白血病患儿采用CCLG-ALL-2008方案疗程拖延对疾病复发的影响。方法：对2011年1月至2014年12月在苏州大学附属儿童医院初诊并接受CCLG-ALL-2008方案治疗的急性B淋巴细胞白血病患儿进行回顾性分析,明确化疗疗程拖延与复发的关系,并探究导致疗程拖延引起复发的原因,随访至2019年7月。结果：疗程拖延周数对复发率的影响具有统计学意义（P=0.034）,风险率比提示大于4周影响显著。第12周微小残留病阳性（1×10-4≤微小残留病≤1×10-2）对复发率的影响亦有统计学意义（P=0.041）。在疗程拖延原因中,单纯骨髓抑制对复发率的影响有统计学意义（P=0.01）。结论：疗程拖延4周以上、第12周微小残留病阳性和单纯骨髓抑制是影响复发的独立预后因素。     

硫酸亚铁和叶酸防治山区孕妇贫血的效果观察

目的 为防治山区孕女贫血制定合理用药剂量。方法 在分别只给予硫酸亚铁0.3g/d或叶酸5mg/d观察结果的基础上,分组观测每日、隔日及隔2日顿服铁剂和叶酸对孕妇血清叶酸、血清铁蛋白水平及血红蛋白浓度的影响。结果 每日给药组可以有效地防治贫血的发生,隔日给药及隔2日给药均未能完全防治贫血的发生。而3种给药组均完全消除了叶酸缺乏症的出现。结论 每日服硫酸亚铁0.3g,每3日服叶酸5mg可有效防治山区孕妇贫血。     

儿童血液系统疾病并发药物性胰腺炎的临床特征

目的:分析血液系统疾病患儿发生药物性胰腺炎的特点,探讨药物性胰腺炎的触发工具。方法:以血清淀粉酶、脂肪酶或尿淀粉酶中任一指标超过3倍正常上限(ULN)为筛选条件,从医院信息系统(HIS)调取2018年1月至2021年6月苏州大学附属儿童医院血液科收治的病例。根据急性胰腺炎诊断标准、国家药品不良反应监测中心制定的评价标准和诺氏药物不良反应评估量表评价病例。经4名药师和1名副主任医师共同判定药物性胰腺炎病例,分析其临床特征。结果:共筛查出实验室指标阳性信息1 522条,相关患者335例次。最终判定药物性胰腺炎50例,其中44例怀疑药物为培门冬酶,其他怀疑药物包括替加环素、阿糖胞苷等;2例各发生2次药物性胰腺炎,怀疑药物均为培门冬酶;主要症状为腹痛、呕吐、发热,4例(8.0%)发病时无典型症状;血脂肪酶401.5(194.4,884.6)U/L,血淀粉酶245.8(166.8,507.8)U/L,尿淀粉酶778.0(383.4,2 048.0)U/L;12例(24.0%)伴有感染;考虑药物性胰腺炎后均停用怀疑药物,18例(36.0%)给予吸氧,7例(14.0%)给予血液净化,治疗后均好转,好...     

去甲基化药物预防儿童急性白血病造血干细胞移植后复发的安全性及耐受性分析

目的 探讨儿童急性白血病行异基因造血干细胞移植后应用去甲基化药物(HMAs)预防白血病复发的安全性、耐受性。方法 回顾性分析2019年12月—2022年1月20例白血病患儿在移植后接受HMAs预防性治疗的临床资料,10例予地西他滨,10例予阿扎胞苷,每例在可耐受状态下完成4～6个疗程后进入随访观察。末次随访时间是2022年10月,分析HMAs治疗期间患儿的耐受情况,比较3～4级不良事件(AE)与不同HMAs、同种药物不同剂量的相关性。结果 20例中15例完成了4～6个疗程HMAs治疗方案。在完成的80个HMAs疗程中,共发生37例次3～4级AE:中性粒细胞计数减少27例次;血小板减少2例、贫血1例;肝功能异常2例;感染性疾病5例。阿扎胞苷组发生3～4级AE显著低于地西他滨组(P<0.001)。预防复发的疗效显示20例患儿除1例髓外复发外,余19例均无复发。结论 HMAs在造血干细胞移植后预防性应用安全性及耐受性良好,发生3～4级AE与HMAs的种类有明显相关性,但与其剂量无明显相关性。     

儿童异基因造血干细胞移植术后巨细胞病毒感染临床分析

目的探讨儿童异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后巨细胞病毒(CMV)感染的危险因素及临床相关特征。方法收集2016年1月至2018年12月共269例allo-HSCT患儿的临床资料。监测移植后全血CMV-DNA拷贝数,分析移植患儿CMV感染发生率、发生时间、危险因素及预后。结果 269例患儿中,男167例、女102例,中位年龄65个月(33～115个月),其中165例发生CMV感染,感染率为61.3%,感染发生时间为移植后23 d(15～34 d),感染持续时间38 d(25～66 d)。Logistic回归分析发现患儿移植年龄65个月、移植后发生Ⅱ～Ⅳ级aGVHD是发生CMV感染的危险因素,而亲缘全相合移植能降低CMV感染发生风险(P0.05)。发生Ⅱ～Ⅳ级急性移植物抗宿主病(aGVHD)及使用脐血移植与发生难治性CMV感染相关(P0.05)。难治性CMV感染组与非难治性CMV感染组总体生存率及无病生存率的差异有统计学意义(P0.05)。结论移植患儿年龄大、Ⅱ～Ⅳ级aGVHD能增加CMV感染的发生风险,亲缘全相合移植能降低CMV感染的发生风险。脐血移植后易发生难治性CMV感染;难治性CMV感染初次检测到CMV感染时间早,峰值高。     

儿童免疫性血小板减少症治疗规范化临床解读

儿童免疫性血小板减少症是儿童最常见的出血性自身免疫性疾病,本文通过解读近年来国内外有关儿童免疫性血小板减少症专家共识和治疗指南,对概念演变、排他性血小板减少症检测项目、治疗原则变化和治疗方案的规范化进行了较为详细的解读,并结合本单位的治疗经验,以期提高儿科医师对儿童免疫性血小板减少性症的认识,进一步规范中国儿童免疫性血小板减少症的临床诊断和治疗。