以杆状病毒为载体在昆虫细胞中高效表达外源基因

以杆状病毒为载体的昆虫细胞表达系统在基因工程中已获得广泛应用。该系统用于表达真核基因具有高效多用、安全可靠及成本低廉等优点。转移载体中多角体蛋白基因启动子和先导序列的完整性是影响外源基因表达的关键因素。用该系统试制人用病毒疫苗和临床诊断试剂已取得重大进展。     

异体脱细胞真皮基质的研究进展

异体脱细胞真皮基质是天然真皮的脱细胞基质,经过冷冻干燥形成的三维支架结构。作为一种新兴的生物工程支架,它通过空间诱导和组织替代作用修复组织缺损。由于其源于人体正常组织,经临床应用证实,异体脱细胞真皮基质拥有优秀的组织相容性,现已广泛地应用于临床各科的创伤修复。     

miR-133b调控GSTP1表达降低结肠肿瘤细胞在低营养环境下的生存能力

目的 探究GSTP1在不同阶段结肠癌组织中的表达水平,并查找可能对GSTP1表达产生调控作用的微小分子RNA（miR）及其对结肠肿瘤细胞的影响。方法 利用实时定量PCR和蛋白印迹分析检测GSTP1在结肠癌组织中的表达水平;构建载体pcDNA3.1GSTP1并转染到培养的人类结肠癌细胞系HCT116中,检测细胞的凋亡率与活性水平;利用TargetScan 和MicroCosm Targets程序分析GSTP1的3′UTR序列并查找能够结合GSTP1的miR,构建载体pGL3GSTP13′UTR,共转染该miR与pGL3GSTP13′UTR到人类肾脏上皮细胞系HEK293中,荧光素酶报告分析验证该miR对GSTP1表达的靶向调控作用;转染该miR到HCT116中,检测GSTP1表达水平与细胞的活性氧（ROS）水平;共转染该miR与pcDNA3.1GSTP1到HCT116中,检测细胞的ROS水平与活性水平。结果 GSTP1在不同阶段结肠癌样本中的表达水平均上升,在低营养环境下,高表达GSTP1的HCT116细胞凋亡率下降,细胞活性上升。而miR133b在GSTP1的3′UTR序列区域有特异性结合位点,在转录后水平下调GSTP1的表达。在低营养环境下,过表达miR133b的HCT116细胞活性水平显著下降,ROS水平显著上升;在正常营养环境下,高表达miR133b无显著影响。此外,在低营养环境下,过表达miR133b的HCT116细胞同时过表达GSTP1,则细胞活性水平下降程度和ROS水平上升程度均减小。结论 低营养环境下miR133b能够通过对GSTP1的抑制作用削弱结肠肿瘤细胞的生存能力。     

超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法测定中药及保健食品中17种非法添加的解热镇痛及止咳类药物

摘要：目的:建立超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱仪快速检测中药及保健食品中17种非法添加的解热镇痛类及止咳类药物。方法:采用甲醇超声对样品进行提取,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18反相色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速0.2 ml·min-1;采用Q-TOF-MS为检测器,采用电喷雾离子源检测,MSE（±）扫描模式采集,通过比对保留时间、精确分子量及二级碎片来进行定性分析。结果:17种药物的检出限为0.01～5 ng。对收集的30批样品进行定性检测,结果5批次检出醋酸泼尼松、4批次检出吲哚美辛,2批次检出茶碱,其余检出成分均为1批。结论:本方法灵敏度、准确度均较高,适用于常见的解热镇痛类及止咳类药物的快速检测。     

一侧后牙缺失与颞下颌关节血流变化

目的：了解一侧后牙缺失及偏侧咀嚼对下颌关节血流的影响。方法：在中国实验用小型猪拔除一侧后牙并在拔牙前后不同时间用核素三相骨显像方法观察颞下颌关节血流变化情况。结果：一侧后牙缺失后１个月时,失牙侧关节血流相时间－放射性强度曲峰值降低,血流到达时间延迟;血池相和延迟相的放射性计数值比例增大;牙缺失３个月时,失牙侧颞下颌关节血流到达时间更晚,血池相和延迟相的计数值更大。非失牙侧关节区血池相在拔牙后１个月时放射性计数值比值升高,至３个月时未再明显升高。结论：一侧后牙缺失会影响两侧颞下颌关节的血流,以失牙侧受累为重,且随时间迁延加重。     

不同体位下软腭位置与腭后气道的相关性研究

目的：通过不同体位下软腭及腭后气道的相关性研究。了解二者关系,为阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（OSAS）的诊断治疗提供参考。方法：青年男性30人,每人分别拍常规头影测量侧位片及仰卧位头颅侧位片,将软腭大小及位置与腭后气道大小做相关分析。结果：两种体位下腭后气道大小与软腭长度及悬雍垂顶点到颅底距离均呈显著负相关,两种体位下腭后气道有显著差异。结论：软腭的大小及位置可做为判定腭后气道大小的重要指标,体位变化亦对腭后气道产生影响。     

涎腺粘膜相关淋巴瘤的临床特点

粘膜相关淋巴组织（MALT）淋巴瘤的特点是病变主要发生在结外粘膜免疫系统,多属低度恶性非霍奇金淋巴瘤。涎腺区MALT淋巴瘤是比较少见的肿瘤,目前国内外对其病理形态和免疫表型已有不少研究,但对其临床特点的分析较少。为此,我们对9例涎腺区MALT淋巴瘤的临床特点进行了临床分析。 　　一、对象与方法 　　1．对象：为中国人民解放军总医院口腔科1994～1998年收治的9例涎腺MALT淋巴瘤患者,其中男3例,女6例,年龄20～68岁,中位年龄56岁。肿瘤发生于单侧腮腺6例,双侧腮腺1例,颌下腺1例,腮腺并舌下腺1例。按Ann Arbor-Cotswald分期,本组中有7例患者病变仅局限于一侧腺体,属Ⅰ期;1例患者在腮腺及舌下腺均发病,属Ⅱ期;1例患者为双侧腮腺发病并转移到腹腔器官,属Ⅲ期。     

熊果酸对小鼠成牙骨质细胞系OCCM-30细胞分化的促进作用

目的：探讨熊果酸对小鼠成牙骨质细胞系OCCM-30细胞分化的影响,为牙根吸收的修复提供理论依据。方法：将对数生长期的OCCM-30细胞分为对照组和不同浓度熊果酸组。其中熊果酸组OCCM-30细胞以3种浓度（0.625、1.250和2.500 μmol·L^-1）的熊果酸处理,对照组不做任何处理。采用MTT法检测不同时间点（24、48和72 h）各组OCCM-30细胞增殖抑制率,碱性磷酸酶（ALP）法检测细胞体外分化和矿化情况,实时定量PCR法检测24h内骨桥蛋白（OPN） mRNA表达水平,Western blotting法检测给药3和5 d时OPN蛋白表达水平。结果：不同浓度熊果酸组与对照组OCCM-30细胞增殖抑制率比较差异无统计学意义（P>0.05）。与对照组比较,2.500μmol·L^-1熊果酸组熊果酸处理3、5和7 d后,OCCM-30细胞中ALP活性明显升高（P<0.05）,不同浓度熊果酸组OCCM-30细胞中OPN mRNA和蛋白表达水平明显升高（P<0.01）。结论：一定浓度熊果酸对小鼠成牙骨质细胞系OCCM-30细胞增殖无明显抑制作用,但可促进其分化并上调OPN mRNA和蛋白表达水平。