采用极差检验对比方案评估两种生化检测系统检测结果的可比性

目的评估两种生化检测系统检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、尿素氮(UREA)、肌酐(CREA)、葡萄糖(GLU)的可比性。方法应用极差检验比对方案,选取患者血清样本,分别在Hitachi 7600生化检测系统、Olympus AU640生化检测系统进行ALT、AST、UREA、CREA、GLU测定,计算极差(%),以1/3个体生物学变异作为临界差值可接受标准,判断两种检测系统检测结果之间的可比性。结果⑴同一质控水平,两种生化检测系统测定各项目的变异系数(CV)较大值与较小值之比均2,符合极差法要求。⑵ALT比对样本范围分别为29.6~44.4U/L、106.1~159.1U/L,AST比对样本范围分别为29.0~43.4U/L、119.4~179.0U/L,UREA比对样本范围分别为5.9~8.9mmol/L、15.4~23.0mmol/L,CREA比对样本范围分别为100.0~150.0μmol/L、292.1~438.1μmol/L,GLU比对样本范围分别为5.6~8.4mmol/L、12.2~18.4mmol/L。⑶血清ALT、AST、UREA、CREA、GLU在低值水平、高值水平的极差(%)均临界差值可接受标准。结论两种生化检测系统测定血清ALT、AST、UREA、CREA、GLU具有一致性。     

转基因饲养层细胞体外促进脐带血CD34+HSPC增殖

hOSM基因饲养层细胞可以有效地扩增CD34+HSPC,并维持其较高的移植效率和造血活性.     

洛阳市750例学龄前儿童全血微量元素检测结果分析

目的了解洛阳市学龄前儿童全血微量元素含量。方法采用原子吸收法检测750例儿童体内锌(Zn)、钙(Ca)、铁(Fe)、铜(Cu)、镁(Mg)和铅(Pb)含量。分别按照年龄和性别分组,应用SPSS 19.0软件对各组间微量元素含量和检出异常率进行统计和分析,同时分析各种微量元素含量之间的相关性。结果 1.不同年龄组间比较,Zn、Ca、Fe和Cu含量差异有统计学意义(P0.01或0.05),Mg和Pb含量差异无统计学意义(P0.05),Zn、Ca和Fe检出异常率差异有统计学意义(P0.05),Cu、Mg和Pb检出异常率差异无统计学意义(P0.05);2.不同性别间比较,各种元素含量和检出异常率差异均无统计学意义(P0.05);3.相关分析显示,Zn、Ca、Fe、Cu和Mg含量呈两两相关性(P0.01或0.05),Pb分别与Zn、Ca和Fe含量呈负相关(P0.01或0.05)。结论洛阳市学龄前儿童Zn、Ca和Fe缺乏较严重,铅含量较高,应引起人们重视。     

脑卒中筛查患者血清同型半胱氨酸水平与血清总蛋白、清蛋白的相关性分析

目的了解脑卒中筛查的中老年患者血清同型半胱氨酸(Hcy)水平与总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)及A/G比值的相关性。方法对该院进行脑卒中筛查的860例55~65岁患者的血清Hcy、TP和ALB水平进行检测,计算A/G比值,并对测定结果进行统计分析。结果脑卒中筛查的患者中,男性的Hcy水平高于女性,而TP水平低于女性,差异有统计学意义(P0.01);相关性分析结果显示,血清Hcy水平与TP和ALB呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.085、-0.114,P0.05)。结论 55~65岁的脑卒中筛查患者中,男性患脑卒中的风险高于女性;血清蛋白水平降低,血清Hcy水平增高,从而脑卒中的发生率增加。     

人血管生成素1和血管内皮生长因子165重组腺病毒载体构建及目的基因表达*★

目的：拟构建人血管生成素1和血管内皮生长因子165腺病毒载体，观察靶细胞转染后目的基因的表达水平。 方法：通过RT-PCR方法克隆人Ang-1全长编码基因，PCR法以pcDNA3.0-VEGF165质粒为模板扩增VEGF165基因，分别将目的基因酶切连接到带有GFP标记的pTrack-CMV质粒上，构建重组质粒pTrack-CMV-Ang-1和 pTrack-CMV-VEGF165，经PCR、酶切和测序鉴定后将其PmeI线性化与腺病毒质粒pAdeasy-1共转化BJ5183细菌，获得重组腺病毒载体pAdeasy-1-pTrack-CMV-Ang-1/VEGF165，经PacI线性化后转染QBI-293A包装细胞，收获重组腺病毒Ad-Ang-1及Ad-VEGF165。 结果：PCR﹑双酶切和测序鉴定结果证实成功构建pTrack-CMV-Ang-1/VEGF165重组转移质粒，PmeI线性化后重组腺病毒载体获得成功包装。脂质体转染QBI-293A细胞后光镜下可见由腺病毒引起的细胞圆缩、聚集呈菌落状的典型细胞病理性改变；荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达，且荧光强度随培养时间延长而逐渐增强；经多轮感染、扩增后，病毒效价可达（2.0~5.0）×1010 pfu/mL。转染48 h后，293A细胞中的血管生成素1与血管内皮生长因子含量均明显提高（F=427.93，17.93，P < 0.05）。 结论：成功构建并获得了Ad-Ang-1及Ad-VEGF165重组腺病毒，血管生成素1与血管内皮生长因子165均能在靶细胞中有效表达。     

显微镜检查在尿干化学分析仪、UF-50沉渣仪常规检测中的重要性

目的 强调在使用尿干化学分析仪和UF-50沉渣仪常规检测中显微镜检查的重要性.方法 随机收集医院住院患者晨尿600例,分别使用干化学分析仪、UF-50沉渣仪和显微镜检查,比较三种方法的检测结果.结果 干化学分析仪法红细胞阳性率14.3%,尿沉渣仪镜检红细胞阳性率26.3%,尿沉渣镜检红细胞阳性率为19%,而三种方法的白细胞阳性率分别为13%,14.8%和16%.结论 干化学法和沉渣仪法在检测红细胞的时候均出现一定的假阳性,而在检测白细胞时则有较好的符合率,因此,当结果出现异常,特别是红细胞出现异常,就必须对每份标本进行镜检.     

a-β2 GPⅠ、Hcy水平检测及临床风险因子对缺血性脑卒中患者的意义

目的 探讨抗β2糖蛋白Ⅰ抗体(a-β2 GPⅠ)、同型半胱氨酸(H cy)水平检测及临床风险因子对缺血性脑卒中患者的意义.方法 将2018年12月至2020年3月于该院就诊并确诊为缺血性脑卒中的患者共167例纳入研究,作为患者组.另外,选取同期于该院行体检健康者120例作为对照组.检测上述人群血清a-β2GPⅠ、Hcy水平及白细胞计数(WBC)、大血小板比率(LPR)、血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV),对a-β2GPⅠ和Hcy水平进行组间比较.采用受试者工作特征(ROC)曲线分析a-β2GPⅠ、Hcy在缺血性脑卒中诊断中的价值.分析a-β2GPⅠ、Hcy水平、临床风险因子之间的相关性.将患者组167例患者分为初发组(107例)和复发组(60例),比较两组a-β2 GPⅠ、Hcy水平及高血压、冠心病、糖尿病、手术史、颈动脉斑块形成等临床风险因子的情况.结果 患者组a-β2GPⅠ和Hcy水平均高于对照组(P<0.05).ROC曲线分析显示,a-β2GPⅠ和Hcy检测在缺血性脑卒中的诊断中有一定的应用价值,两者联合检测时表现出更高的灵敏度,曲线下面积(AUC)最大.通过相关性分析发现,缺血性脑卒中患者a-β2 GPⅠ和Hcy水平与高血压、糖尿病以及冠心病呈正相关(r>0,P<0.05),但a-β2GPⅠ与Hcy水平无相关性(P>0.05).缺血性脑卒中患者a-β2GPⅠ、Hcy水平与其他实验室指标间的相关性分析显示,仅Hcy与PLT之间呈负相关(r=-0.169,P<0.05).复发组患冠心病、糖尿病和颈动脉斑块形成发生率均高于初发组(P<0.05).结论 a-β2GPⅠ、Hcy水平联合检测并结合临床风险因子进行评估有助于对缺血性脑卒中患者病情进行判断.     

转基因饲养层细胞体外促进脐带血CD34+HSPC增殖研究

目的 构建转hOSM基因细胞系作为饲养层细胞，观察其对脐带血CD34+HSPC的扩增作用。方法 用分子生物学技术建立转hOSM基因细胞系，免疫磁珠法分离脐带血CD34+HSPC，将其与饲养层细胞共培养7d后，流式细胞术检测其增殖，将扩增后染色的CD34+细胞移植入SCID小鼠体内，应用荧光显微镜和RT-PCR法观察移植效果。结果 CD34+HSPC与饲养层细胞共培养后扩增了9.4倍，其表面归巢相关分子CXCR4和CD54阳性率仍较高，植入小鼠体内4周后，可成功归巢到小鼠骨髓。结论 建立的转hOSM基因饲养层细胞可以有效的扩增CD34+HSPC，并维持其较高的移植效率和造血活性。     

再生丝素膜对Ad-VEGF165转基因成纤维细胞基因表达的影响

背景：前期实验已证实再生丝素膜可促进pcDNA3.0-VEGF165转染的L929细胞表达血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)。 目的：进一步观察再生丝素膜对经腺病毒介导的人VEGF (Ad-VEGF165)转基因成纤维细胞基因转录表达的影响。 设计、时间及地点：对比观察细胞基因工程实验，于2007-11/2008-04在苏州大学细胞与分子生物实验室完成。 材料：再生丝素膜由苏州大学材料工程学院李明忠教授提供。 方法：将Ad-VEGF165腺病毒感染培养在再生丝素膜、聚氯乙烯膜及聚乙烯膜上的QBI-293A人胚肾和WI-38人胚肺成纤维细胞，以空载体Ad-GFP腺病毒和未接种病毒的PBS组为对照。 主要观察指标：通过实时定量RT-PCR法检测不同材料对成纤维细胞VEGF mRNA转录的影响；ELISA法检测其对VEGF、血管生成素1、碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍化生长因子表达的影响。 结果：再生丝素膜组成纤维细胞VEGF mRNA呈高水平表达，但聚氯乙烯膜组转录水平明显下降(P < 0.05)。再生丝素膜组Ad-VEGF165转基因293A细胞及WI-38细胞不仅目的基因VEGF细胞因子的分泌呈高水平表达，并可促使血管生成素1基因表达水平明显提高(P < 0.05)，而且再生丝素膜还可使成纤维细胞自身分泌的碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍化生长因子呈现正常表达水平。 结论：再生丝素膜不仅利于VEGF目的基因在成纤维细胞中呈现高效表达，并促进血管生成素1基因的表达，而且能维持成纤维细胞自身分泌的与组织损伤修复相关基因碱性成纤维细胞生长因子、血小板衍化生长因子的正常表达。