手工组织显微切割后的快速DNA提取技术

目的:为寻找一种操作简便、结果稳定可靠的组织处理及切片染色技术,尝试应用组织切片手工显微切割后快速提取DNA的方法,观察提取的DNA质、量是否能满足后续分子水平研究的需要.方法:实验于2004-07/2007-07在广东医学院病理学实验室完成.取广东医学院附属医院病理科提供的子宫颈癌石蜡包埋组织切片,将切片贴于载玻片长时间完全脱蜡后,用苏木精对细胞核进行淡染,再在倒转置显微镜下进行显微切割,将切割下的组织放入装有提取缓冲液的EP管中,整个过程不需更换EP管,不经过复杂的酚一氯仿抽提,采用细胞裂解并蛋白酶K消化的方法,快速、简便提取DNA.结果:经分光光度计检测提取的DNA浓度为0.14～5.25 g/L,A260A280值在1.6-1.8i PCR检测扩增出了预期长度为231 bp的目的片段.结论:手工组织显微切割后快速DNA提取法可以提供足量浓度的DNA,PCR反应模板结果稳定可靠,可满足后续分子水平研究的需要.     

前列腺癌靶区位移影响因素分析

目的 深层次探究直肠肌肉张力、腹内压和盆腔骨骼3个客观因素对前列腺癌放疗前锥形束CT校准数据影响,得到影响前列腺靶区运动主要因素,为优化放疗计划设计和提高图像引导精度提供参考.方法 依据试验纳排标准,筛选符合条件的10名前列腺癌患者,接受每周两次随机治疗前锥形束CT扫描,获取前列腺靶区校准数据.扫描之后,分别采用剪切波超声弹性成像技术量化患者直肠肌肉张力影响,采用气囊测压表测量膀胱内压间接量化腹内压影响,采用误差均方根量化盆腔骨骼影响.回归分析3个因素与锥形束CT校准数据之间关系.结果 所有患者左右、前后、头脚方向上锥形束CT校准结果分别为:0.513 mm±0.072 mm、1.369 mm±0.162 mm、1.335 mm±0.271 mm;杨氏模量值:8.965 kPa±1.391 kPa、10.211 kPa±1.544 kPa、3.926 kPa±0.693 kPa,腹内压(未分方向):4.844 mmHg±1.347 mmHg(1 mmHg=133.3 Pa),误差均方根:0.020 mm±0.011 mm、0.069 mm±0.049 mm、0.052 mm±0.029 mm;前后方向上直肠肌肉张力(R=0.895)和腹内压(R=0.523)均同锥形束CT校准数据存在统计学意义相关性,头脚方向上腹内压(R=0.717)存在统计学意义相关性.结论 前后方向上直肠肌肉张力和头脚方向上腹内压是造成前列腺癌靶区位移主要因素,结果对优化放疗计划设计和提高图像引导精度具有重要意义,并为未来降低靶区位移提供了方法学指导.     

人巨细胞病毒先天性潜伏感染再激活致小鼠肠炎

目的:建立人巨细胞病毒(HCMV)先天性潜伏感染再激活致出血性坏死性肠炎BALB/c小鼠模型,为HCMV致小肠炎发病机制及临床特异性诊断和抗病毒治疗奠定基础.方法:将HCMV先天性感染的小鼠饲养于SPF级屏障系统中,18 mo后,分别取病毒感染组18只、细胞对照组9只,并按随机原则分别给病毒感染组中9只小鼠以及细胞对照组小鼠注射环磷酰胺,建立HCMV潜伏再激活感染鼠模型.采用无菌操作技术分别取细胞对照组、病毒潜伏组和病毒潜伏再激活组小鼠小肠组织,进行病理组织学检查、体外细胞共培养分离病毒、PCR和RT-PCR检测HCMV UL83基因DNA及mRNA,间接免疫荧光鉴定等.结果:病毒潜伏感染再激活组细胞共培养病毒分离实验发现小鼠小肠组织内病毒分离阳性.在镜下可见HCMV在HF细胞内增殖产生特征性细胞病变,病毒分离共培养物PCR检测到HCMV UL83 DNA,间接免疫荧光检测可见苹果绿色阳性信号:小鼠小肠组织PCR和RT-PCR分别检测到HCMV UL83 DNA和相应mRNA:HE染色镜检发现部分肠组织有非特异性小肠炎性病变,有局灶性坏死及出血.而病毒潜伏组仅小肠组织PCR检测到HCMVUL83 DNA,出血和坏死现象不是很明显;细胞对照组均是阴性.结论:成功构建了HCMV先天潜伏感染再激活小鼠小肠炎模型,病理表现为出血性坏死性肠炎.     

牛磺熊去氧胆酸联合多烯磷脂酰胆碱治疗非酒精性脂肪性肝病患者疗效观察

目的 观察牛磺熊去氧胆酸联合多烯磷脂酰胆碱治疗非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者的临床疗效。方法 采用随机数字表法将72例NAFLD患者分为对照组36例,给予熊去氧胆酸和多烯磷脂酰胆碱治疗,和观察组36例,给予牛磺熊去氧胆酸和多烯磷脂酰胆碱治疗,观察2个月。结果 观察组患者治疗后血清ALT、AST、TC和TG水平分别为（42.4±17.7）U/L、（31.6±11.2） U/L、（4.1±0.3） mmol/L和（1.6±0.6）mmol/L,较对照组[分别为（59.7±18.5） U/L、（46.8±15.4） U/L、（4.5±0.4） mmol/L和（2.1±0.7） mmol/L,P<0.05]降低更为显著;观察组治疗后B超检查声像图改善率也好于对照组。结论 牛磺熊去氧胆酸联合多烯磷脂酰胆碱治疗NAFLD患者疗效显著,可明显改善肝功能和血脂指标。     

急性呼吸窘迫综合征患者血浆脑钠肽水平与血管外肺水的相关性研究

目的 探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者血浆脑钠肽(BNP)水平与血管外肺水的相关性.方法 选取我院ICU收治的48例ARDS患者,分别于入院第1、4、7天测定血浆BNP水平,同时用PICCO监护仪监测血管外肺水指数(ELWI)、肺血管通透性指数(PVPI)和心指数(CI),根据预后分为死亡组和存活组,比较两组相关指标.结果 48例ARDS患者确诊后2周内存活30例,死亡18例.入院第4天与第1天相比,两组患者的BNP、ELWI、PVPI均显著升高(P＜0.05),CI显著下降(P＜0.01).入院第4天与第7天,存活组的BNP、ELWI、PVPI出现显著下降(P＜0.01),CI显著升高(P＜0.01),而死亡组的BNP、ELWI、PVPI仍持续显著升高(P＜0.05),CI持续显著下降(P＜0.01).死亡组患者在入院第1、4、7天的BNP、PVPI和ELWI均显著高于同期的存活组患者(P＜0.05),CI则显著低于存活组(P＜0.01).对两组BNP和ELWI作相关性分析,血浆BNP与ELWI呈正相关(P＜0.01).结论 ARDS患者的血浆BNP水平随血管外肺水的增多而升高,其高低与预后显著相关.     

护士职业获益感及其对职业倦怠影响的研究

目的：探讨护士职业获益感的现状及其对职业倦怠的影响,为减轻护士职业倦怠、提高护士职业健康水平提供参考与建议。方法：运用自行设计的护士职业获益感量表及Maslach倦怠量表调查298名护士的职业获益感及其职业倦怠状况,并进行二者相关性分析与多元回归分析。结果：护士职业获益感呈中等水平;职业倦怠3个维度的倦怠程度均高于常模,差异均有统计学意义。职业获益感与其职业倦怠的情感衰竭、去人格化维度得分呈负相关,与个人成就感得分呈正相关。各因素中,工作稳定收入有保障、方便照护家人、终身拥有优质医疗资源、拥有弹性的工作时间等是影响护士情感衰竭、去人格化的主要因素;而拥有学习晋升的机会、工作稳定收入有保障、工作有成就感及价值、职业发展前景好则对个人成就感有影响。结论：增强护士职业获益感有助于减轻其职业倦怠程度。护理管理者应加强对护士职业认知评价干预,深入挖掘护士职业获益的丰富内涵,引导护理人员切实感受职业获益,以增进其与职业的情感,以积极平和的心态应对工作中的各种压力和职业倦怠。     

低分子肝素钙对肺源性心脏病心力衰竭患者临床疗效及血浆N-末端脑钠肽前体、D-二聚体水平的影晌

目的：观察低分子肝素钙对肺源性心脏病（肺心病）心力衰竭患者血液流变学、血浆N-末端脑钠肽前体（NT-proBNP）及D-二聚体（D-D）水平的影响。方法选取2011年1月-2014年1月肺心病心力衰竭患者95例,随机分为观察组45例及对照组50例。2组均给予常规治疗,观察组在此基础上加用低分子肝素钙皮下注射。观察2组临床疗效、不良反应、治疗前后血液流变学、血浆NT-proBNP及D-D水平的变化。结果治观察总有效率95．56％,显著高于对照组总有效率82．00％（P＜0．05）,2组不良反应无显著差异（P＞0．05）;2组治疗后血液流变学、血浆NT-proBNP及D-D水平均较治疗前显著改善（P＜0．05或P＜0．01）;观察组显著优于对照组（P＜0．05或P＜0．01）。结论低分子肝素钙联合多巴酚丁胺和硫酸镁治疗肺心病心力衰竭患者安全有效,可显著改善患者血液流变学指标,降低血浆NT-proBNP及D-D水平。     

“年轻护士素质提高行动”实施体系的构建与实践

目的：建立年轻护士规范化培训体系,评价其在“年轻护士素质提高行动”实施过程中的实践效能。方法采用整群抽样的方法,以无锡市二院2010年10月-2011年12月新招聘的202名新毕业护士为培训对象,根据培训目标制定系统的规范化培训方案,通过设立多个培训基地,采取阶段量化培训、全程“夜自习”管理、一对一导师带教以及实境培训和情景模拟相结合的方式,强化年轻护士的基本理论、基本知识、基本技能和提高人际沟通能力,培养敏锐的临床观察力和评判性思维能力,并对规培计划完成情况及培训效果进行评价与考核。结果通过实施“年轻护士素质提高行动”,促进了202名年轻护士自我效能感和核心能力的培养,自我效能感培训后（2．69±0．40）分显著高于培训前（1．73±0．51）分,差异有统计学意义（t＝3．59,P＜0．01）;护士核心能力培训后的护士总得分（137．21±25．42）分较培训前（118．53±19．28）分上升,差异有统计学意义（t＝5．87,P＜0．01）;理论与技能成绩分别从培训前的（81．18±6．12）,（81．58±3．22）分上升到培训后的（89．36±4．34）,（87．98±5．52）分,差异均有统计学意义（ t分别为3．37,2．86;P＜0．01）;护理综合满意度从2011年的院87．6％显著上升至2012年的94．95％,差异有统计学意义（χ2＝5．86,P＜0．01）;通过实施情景模拟教学,普遍提升了年轻护士的临床综合能力。结论“年轻护士素质提高行动”实施体系通过精心设计、合理实施,科学评价,能够提高年轻护士的综合能力,是一种值得推广应用的培训方法。     

徐州地区汉族RhD阴性人群RHD基因多态性研究

目的：研究徐州地区汉族RhD阴性人群RHD基因多态性。方法采用常规血清学技术检测RhD抗原表型,采用抗球蛋白试验（IAT）确认结果。采用序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP-PCR）方法检测RHD基因。结果110例RhD阴性个体中,SSP-PCR检测RHD基因结果为RHD 阳性基因携带者5例,RHD阴性基因携带者47例,RHD-CE（2-9）-D 基因携带者22例,DVI Ⅲ型基因携带者17例,弱D15基因携带者2例,DEL-1227A基因携带者17例。结论徐州地区汉族人群RhD阴性个体呈现RHD基因结构复杂的多态性,以变异体等位基因RH-CE（2-9）-D 基因、DVI Ⅲ型基因、DEL-1227A基因为主。