抗Ig融合蛋白Fc段单克隆抗体的制备、鉴定与应用研究

目的：制备并鉴定抗Ig融合蛋白Fc段的单克隆抗体(mAb)，建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法和纯化Fc融合蛋白的亲和层析法。方法：以hBCMA—Ig融合蛋白为抗原免疫BALB／c小鼠，通过细胞融合制备抗Fc段mAb，用ELISA等方法鉴定mAb的Ig亚类、表位以及种属特异性，建立用于检测Ig融合蛋白的夹心ELISA法;Western blot检测mAb对变性Ig融合蛋白的反应性。将mAb与Sepharose4B交联，制备亲和层析柱，对LAIR1-Ig融合蛋白进行纯化。结果：获得7株稳定分泌抗Fc段mAb的杂交瘤(FMUFcl-FMUFc7)。利用FMUFc4作为包被mAb，FMUFc5作为酶标记mAb，成功地建立了检测Ig融合蛋白的ELISA法，敏感度达到2μg／L；在7株mAb中，FMUFc6可用于Ig融合蛋白的western blot检测。用FMUFc 6mAb制备的亲和层析柱，可有效地纯化LAIRl—Ig融合蛋白。结论：成功地制备了抗Ig融合蛋白Fc段的mAb，建立了可用于Ig融合蛋白检测和纯化的方法，为Ig融合蛋白的应用提供了有力手段。     

透射电镜超薄切片污染产生的原因及对策

目的 分析电镜超薄切片污染产生的原因及消除污染的对策。方法 对样品制备及观察的每个环节逐一分析，对可能引起污染的各种因素采取有针对性的解决方法，严格按照透射电镜生物样品的制备要点进行操作。结果 消除了污染，保证了超薄切片的质量，电镜下拍出高质量的照片。结论 污染的原因是多方面、多因素的，只要工作中精益求精，基本上可以避免切片污染。     

LAIR-1/LAIR-2(CD305/CD306)与配体结合亲和力的比较

目的:LAIR-1/LAIR-2(CD305/306)与配体结合亲和力的比较。方法:应用不同浓度混合的LAIR-1和LAIR-2融合蛋白,同时或先后与配体表达细胞孵育后,用特异性LAIR-1或LAIR-2单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)分析,比较LAIR-1和LAIR-2融合蛋白与细胞结合的百分率的变化及相互竞争情况。结果:LAIR-1和LAIR-2膜型配体的分布较广泛,人和小鼠LAIR受体与配体的结合具有相互交叉的特点。LAIR-2能够明显阻断LAIR-1与其膜型配体的结合,而LAIR-1对LAIR-2与其配体的结合无影响。结论:LAIR-1和LAIR-2可能结合相同的膜型配体,但LAIR-2结合配体的亲和力明显高于LAIR-1结合的亲和力。此结果为深入探讨LAIR家族免疫调节的分子机制提供重要的实验依据。     

结肠癌细胞表达的细胞外基质Reelin在淋巴结转移中的作用

探讨一种由结肠癌细胞表达的细胞外基质Reelin在淋巴结转移中的作用.构建了99例结肠癌及其癌旁组织的组织芯片进行免疫组织化学染色,探测其表达强度并结合临床资料进行分析.结果显示,Duke's A,B,C,D分期与结肠癌细胞Reelin表达强度无关,结肠癌细胞Reelin表达强度与其淋巴结转移潜能相关,结肠癌细胞Reelin表达强度每增加一个单位,其转移进入淋巴结的能力将增加3.523倍.结肠癌细胞表达Reelin与其淋巴结转移密切相关,Reelin可以作为结肠癌淋巴结转移预测的一个新指标.     

rGH＋CLS减少电损伤组织坏死的研究

研究rGH CLS局部应用对减少高压电损伤组织进行性坏死的作用。使用该实验室已建立的重度高压电损伤模型,新西兰大白兔45只均分5组。治疗分别使用rCH CLS（1组）,CLS（2组）,rGH(3组）,盐水（4组）和5组对照,临床解剖探查、组织学和超微结构等方法观察。结果：治疗1组有明显的减少组织坏死作用。15d动物伤肢完整,而2,3和4组虽也各有不同程度延缓坏死的作用。但动物伤肢最终坏死丧失,5组7d大部软组织基本坏死,12d坏死离断,光电镜检查1组5d治疗后粒细胞浸润较少,炎性反应轻,有纤维组织细胞再生和新生的线粒体,10d修复过程明显,2,3,4组7d后坏死明显,5组肌坏死迅速,结果表明：CLS持续组织内透析冲洗和rGH局部肌注能有效地减少电损伤坏死速度和范围,值得研究应用。     

冠心病患者支架植入术后近期心绞痛

目的　观察 2 2例冠心病患者PTCA术后 1个月心绞痛发生率 ,分析其原因。方法　选 4 2例冠脉造影证实有狭窄、支架植入术后 1个月内非急性冠脉闭塞患者 ,按冠心病易患因素 (高血压、高血脂、高血糖、吸烟 )多少分 3组 ,A组 17例含 0～ 1个因素 ,B组 12例含 2个因素 ,C组 13例含 3个以上因素。PTCA术共 2 2例 ,3组分别为 4例、7例、11例。结果　 2 2例支架植入术后 1个内发生心绞痛 ,A组 1例 ,B组 5例 ,C组 10例 ,占支架植入总数的 72 7% (16 / 2 2 )。A组明显低于C组和B组 (合并C组 ) ,用Fishers精确概率检验法 ,P值分别是 0 0 33和 0 0 4 5。结论　PTCA术后 1个月内非急性冠脉闭塞性、非再狭窄性心绞痛发生率是比较高的 (72 7% ) ,这可能是冠状循环微血管病变导致的心绞痛 ,与冠心病易患因素增多有关。     

氧自由基与心血管系统疾病的关系

氧自由基 (ｏｘｙｇｅｎｆｒｅｅｒａｄｉｃａｌｓ,ＯＦＲ)与心血管系统疾病的关系密切 ,现综述如下。1　病毒性心肌炎病毒性心肌炎的发病机制迄今仍不完全清楚。近年来由于研究的深入和自由基医学的发展 ,肯定了氧自由基也参与了心肌炎的发病过程。很多临床资料表明患者血中红细胞超氧化物歧化酶 (ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅ ,ＳＯＤ)活性普遍降低 ,血清脂质过氧化物 (ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄｅ ,ＬＰＯ)和红细胞过氧化氢溶血率明显高于正常人 ,提示心肌炎的病理改变与ＳＯＤ活性降低 ,Ｏ·2 堆积有关。当心肌缺氧、缺血及…     

外伤性肠系膜血管断裂的诊治体会

本组收集了近 12年来工作中遇到的外伤性肠系膜血管损伤病例介绍如下 :本组 16例 ,男 12例 ,女 4例 ,年龄 2 9～ 6 1岁。 15例为腹部挫伤 ,1例为刀刺伤。其中 7例为单一肠系膜血管断裂伤。9例分别合并空肠、回肠、横结肠、后腹膜及肾脏胰腺等脏器损伤。病人均有腹痛和失血性休克表现。腹部表现为腹式呼吸运动减弱或消失 ,有压痛和反跳痛 ,移动性浊音阳性 ,肠鸣音弱 ,腹穿抽出不凝固血液。合并肠管破裂者 ,有板状腹表现。其中空肠血管支断裂 8例 ,回肠血管支断裂 7例 ,中结肠血管壁裂伤 1例。手术经过 :经术前抗休克治疗 ,较满意后急诊手术探…     

糖尿病29例死亡原因分析

随着糖尿病 (ＤＭ)发病率的上升 ,糖尿病的病死率也逐渐上升 ,位居心脑血管疾病、癌症之后 ,是威胁人类生命的“第三杀手”。我科 1996— 2 0 0 0年收治糖尿病患者 82 7例次 ,死亡2 9例 ,现对 2 9例糖尿病患者的死亡原因分析如下。1　临床资料1.1研究对象　 2 9例中 ,男 17例 ,女 12例 ,年龄 18～ 74岁 ,平均 5 6 .2 8岁 ,病程 0～年 13例 ,5～年 7例 ,15～年 2例 ,>2 0年 1例 ,其中 1型糖尿病 2例 ,2型糖尿病 2 7例。1.2　死亡原因与ＤＭ的关系　 2 9例中死亡原因与ＤＭ有直接关系的 2 1例 :6例死于糖尿病酮症酸中毒 (ＤＫＡ) ,严重的离子…     

小儿特重型颅脑损伤的急救

我院自 1992年 4月～ 1998年 7月急救小儿特重型颅脑损伤 8例 ,ＧＣＳ评分均为 3～ 5分 ,由于在急诊科采取了积极的钻孔放血减压术后 ,为进一步手术治疗创造了时间 ,使患儿的生存率及愈后ＧＯＳ评分均得到了提高 ,收到了良好的效果 ,现分析如下。1　资料与方法1 1　一般资料 :本组男 6例 ,女 2例 ;年龄 <1岁 1例 ,1～ 3岁 5例 ,3～ 5岁 2例 ;致伤原因 :车祸伤 2例 ,打击伤1例 ,平地摔伤 4例 ,坠落伤 1例 ;受伤至就诊时间均在 3小时以内 ,有中间清醒期 4例 ,1例无昏迷史。1 2　症状与体征 :8例患儿均处于濒死状态 ,两侧瞳孔散大 ,无光反应 ;…