输血前不规则抗体检验的应用价值分析

目的 探讨和分析输血前进行不规则抗体检验的临床价值,从而为临床输血的安全性提供指导和保障。方法 选取2019年1月—2021年2月在本院进行输血治疗的535例患者为研究对象,所有患者均进行输血前不规则抗体检查,分析患者不规则抗体阳性率及类型。结果 535例患者不规则抗体阳性率为3.18%。男性患者不规则抗体阳性率为0.98%,女性为6.14%,其中有妊娠史者阳性率为8.89%,无妊娠史者阳性率为2.15%;患者中有输血史者不规则抗体阳性率为4.36%,无输血史者为1.05%,数据比较差异均有统计学意义（P <0.05）。17例不规则抗体患者主要类型为抗-C型、抗-D型、抗-E型、抗-M型和非特异性抗体。其中以抗-E型（29.41%）、抗-M型（35.29%）占比最多。输血后观察到患者中出现2例不良输血反应,占比0.37%,其中过敏和发热各1例。经对应治疗后好转,不影响患者治疗。结论 输血前不规则抗体检查对保证输血安全、提高输血疗效、减少或杜绝溶血等不良输血反应的发生具有重要意义。     

荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA基因及其与胃癌转移的关系

Objective To investigate the relationship between tumor metastasis-related Rac1 mRNA expression levels and gastric carcinomas metastasis, and to investigate the significance of Rac1 as a tumor marker for the evaluation of gastric carcinomas metastasis and distinguish between benign and malignant lesions. Methods This experiment used fluorescence quantitative RT-PCR TaqMan probe technology, chose Rac1 target gene fragment, which was cloned into the pET-20b (+) vector, constructed recombinant plasmid, and established the Rac1 mRNA fluorescence quantitative RT-PCR standard curve. And then the Rac1 mRNA levels were detected in 52 cases of gastric carcinoma tissues,52 cases of para-carcinoma tissues and 12 cases of benign gastric disease tissues. Its association with the metastasis of gastric carcinomas was analyzed. Results The positive rates and levels (median, P25-P75) of Rac1 mRNA were 100. 0% ,7.41 ×105 (3. 50 × 105-4. 36 × 106) copies/μl in gastric carcinomas, 46. 2% ,0(0-1.73 × 104) copies/μl in parscarcinoma tissues, 33. 3%, 0(0-3.55 × 103) copies/μl in benign tissues. The positive rates and leves(x2 =43.16,x2Xk-w = 64. 19, P ＜0. 01)among the three groups were significantly different. When the critical value of Rac1 mRNA level was 1.73 × 104 copies/μl determined by ROC, the sensitivity and specificity were 88. 5% and 100% respectively. When the critical value of Rac1 level was 7.49 × 105 copies/μl, the sensitivity and specificity were 57.9% and 78. 6% respectively. ConclusionThe Rac1 mRNA level detected with fluorescence quantitative RT-PCR has reference value to distinguish between benign and malignant lesions and evaluate gastric carcinoma metastasis.     

肝细胞生长因子基因转染5-aza诱导后的骨髓基质干细胞及其表达、分化的研究

目的 将重组腺病毒(Ad-HGF)转染5-氮胞苷(5-aza)诱导后的骨髓基质干细胞(BMSCs),检测其心肌样细胞分化和HGF基因表达,探讨其用于缺血性心脏病治疗的可行性.方法 以5-aza诱导比格犬BMSCs向心肌样细胞分化,形态学观察、免疫组化检测心肌样细胞标志--β-肌球重链蛋白(β-MHC)和(α-横纹肌肌动蛋白的表达;以Ad-HGF转染5-aza诱导后的BMSCs,RT-PCR、ELISA检测肝细胞生长因子(HGF)的表达.结果 形态学观察与免疫组化结果表明,5-aza诱导BMSCs向心肌样细胞分化,Ad-HGF转染5-aza诱导后的BMSCs在mRNA和蛋白水平均有HGF表达,转染后48h表达量最高,达103ng/ml.结论 Ad-HGF可高效转染5-aza诱导后的BMSCs,为其应用于缺血性心脏病的生物治疗奠定了基础.     

更昔洛韦眼用凝胶治疗单疱性病毒性角膜炎的疗效分析

目的:探讨更昔洛韦眼用凝胶治疗单疱性病毒性角膜炎的疗效分析.方法:将2016年1月～2017年1月在我院眼科治疗的86例(100眼)单疱性病毒性角膜炎患者随机分为两组,对照组采用更昔洛韦滴眼液治疗,观察组采用更昔洛韦眼用凝胶治疗,比较两组临床疗效、症状改善情况、体征改善情况.结果:观察组治疗有效率为94％,明显高于对照组的74％,组间有明显差异(P<0.05);观察组治疗后畏光、流泪、疼痛、异物感等症状积分明显低于对照组,组间有明显差异(P<0.05);观察组治疗后角膜基质水肿、睫状充血、角膜上皮缺损、角膜荧光素染色等体征评分明显低于对照组,组间有明显差异(P<0.05).结论:更昔洛韦眼用凝胶治疗单疱性病毒性角膜炎的疗效显著,利于眼部症状及体征的明显改善,具有临床意义.     

重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因经角膜基质瓣转染兔角膜基质细胞的实验研究

目的 研究重组腺相关病毒 (rAAV)介导增强型绿色荧光蛋白 (EGFP) 基因经角膜基质瓣转染兔角膜基质细胞的有效性和安全性。方法 微型角膜刀制作兔角膜基质瓣;转染组用含rAAV－EGFP转染液浸泡角膜瓣和角膜基质床10 min,对照组用等量BSS液浸泡角膜瓣和角膜基质床10 min,不同时间点(1、3、7、14、21d)通过荧光体视镜观察角膜出现EGFP荧光的起始时间及分布情况,收集角膜,其中一半用激光共聚焦显微镜观察、照相,另一半固定后行HE染色。结果 转染组于转染第3天,体视荧光显微镜下观察到兔眼角膜瓣内面及基质床中开始有GFP阳性表达;7d达到高峰, 21d时仍有微弱表达。第7天 在激光共聚焦显微镜下可观察到兔角膜基质中有明显的荧光表达。对照组角膜始终未见荧光表达。转染组和对照组角膜HE染色均未见炎症细胞浸润及新生血管等异常。结论 rAAV- EGFP经兔角膜基质瓣转染角膜基质细胞的方法可将基因安全、相对高效地转入角膜基质细胞。为转基因治疗角膜病提供了新的转染途径。     

CDR3谱型分析在肿瘤研究中的应用进展

肿瘤特异性T细胞通过其表面T细胞受体(Tcell receptor,TCR)识别肿瘤,进而杀伤肿瘤细胞,其所介导的细胞免疫在机体抗肿瘤免疫应答中发挥极其重要的作用.寻找肿瘤特异性T细胞克隆是当前肿瘤研究领域的热点,而应用最广泛、最灵敏地寻找肿瘤特异性T细胞的方法是通过基因扫描(Ge-neScan)对TCR互补决定区3(complementary deter-mining region 3,CDR3)谱型进行分析.     

T细胞受体编辑与修正

在T、B细胞早期发育过程中,获得识别自我的能力,并出现"克隆禁忌"、"克隆缺失"一直是免疫学家坚持不懈、努力阐明的现象之一.     

急性冠脉综合征患者血尿酸变化的临床意义

随着生活方式及饮食结构的改变,冠心病的发病率明显增多,高血压、糖尿病、高血脂是冠心病的易患因素被临床广泛重视. 近年来的研究发现,高尿酸血症与冠心病的发生密切相关,是独立的危险因素. 但临床上对尿酸的重视程度不及高血压,高血糖,高血脂. 本文对50例急性冠脉综合征患者进性血尿酸检测,探讨其临床意义.     

天津6 085名健康成人静脉血细胞分析的参考区间调查

目的:调研天津地区健康成人静脉血细胞的参考区间,为建立可行、实用的血细胞参考区间提供数据支撑。方法:研究对象为在天津医科大学总医院健康管理中心进行体检的成年人,参照CLSI C28-A3文件的标准,排除血液病、甲状腺疾病和肾病等可能会影响血细胞参数的疾病,于清晨采集空腹静脉血,用日本sysmex XN9000血细胞分析仪及配套试剂在2 h内进行血细胞分析（包括WBC、RBC、Hb、PLT、HCT等参数）,从采样到分析过程严格质量控制工作;采用统计软件包SAS 9.3对数据进行统计分析,实验结果与现行的国家行业标准及其它地区的参数进行比较。结果:本研究共筛选出6 085名健康体检者,年龄19~96岁,其中男2 853名,平均年龄44.2岁;女3 232名,平均年龄45.8岁。血细胞主要参数参考区间:WBC男（3.6~9.1）×109/L,女（3.3~8.8）×109/L,RBC男（3.6~5.9）×1012/L,女（3.9~5.2）×1012/L,PLT男（146~348）×109/L,女（158~371）×109/L,Hb男（139~176）g/L,女（117~153）g/L,HCT男（41~52）%,女（36~46）%;男性WBC、RBC、Hb和HCT均高于女性（P<0.05）,而PLT小于女性（P<0.05）,并且随着年龄增长,该5项参数均有下降趋势;本研究所得WBC较现用行业标准偏低,而RBC、Hb、PLT和HCT均较行业标准高。结论:本研究结果表明天津地区的血细胞分析参考区间与现行国家行业标准、其他地区有所差异,性别和年龄对血细胞参考区间有所影响,提示建立适合本地区的血细胞分析参考区间非常必要,并且注意性别和年龄组的差异。     

1型重组腺相关病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因转染人脐静脉内皮细胞的体外研究

目的 评价1型重组腺相关病毒(rAAV1)作为新生血管性角膜病变基因治疗载体的可行性.方法 rAAV1-EGFP按转染倍数(MOI)5×103,5×104,5×105转染ECV304细胞,转染后在倒置荧光显微镜下观察ECV304细胞中GFP阳性表达情况和细胞生长形态特点等,流式细胞仪检测rAAV1-EGFP对EVE304细胞的转染效率.MTT法检测rAAV1-EGFP对EVC304细胞增殖的影响.结果 转染后2 d,MOI=5×105组细胞中的GFP开始表达;表达强度随MOI值的增高而增强,同时GFP的表达强度随着时间延长而逐渐增强,转染后第7天达到高峰,此时流式细胞仪检测rAAV1-EGFP对ECV304细胞的转染率分别为45.90％(MOI=5×103),58.56％(MOI=5×104),68.31％(MOI=5×105).AAV1-EGFP转染ECV304细胞后.细胞生长及形态正常.MTT法显示转染后72、96 h各转染组与未转染组之间A值无显著性差异.结论 rAAV1-EGFP对ECV304细胞转染稳定、有效,重组腺相关病毒对细胞增殖无明显抑制,重组腺相关病毒可作为基因治疗角膜新生血管性病变的载体.