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老年性聋是伴随老化过程而出现的一种渐进性双侧对称的耳聋.已发现它与耳蜗形态学退行性改变相关,包括毛细胞、柱细胞、血管纹、螺旋韧带以及基底膜。但涉及年龄相关的盖膜生化组成改变的研究很少。事实上大量的研究表明盖膜的生化组成与其生理作用直接相关。因此,本文作者就老化对盖膜复合糖组成的作用进行了初步的研究。 相似文献
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目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其双受体系统串珠素(perlecan)和高亲和力酪氨酸激酶受体(FGFR)在人喉癌细胞Hep-2中的表达.方法:培养Hep-2和正常永生化表皮细胞系HaCaT细胞,应用RT-PCR方法检测bFGF、perlecan及FGFR1~4 mRNA的表达.结果:bFGF、peflecan、FGFR1、FGFR2及FGFR4 mRNA在Hep-2细胞中的相对表达量高于HaCaT细胞(t分别为17.540、19.684、13.371、12.692和12.586,P均<0.05).2种细胞中均未检测到FGFR3 mRNA.结论:bFGF、perlecan及FGFR与喉癌细胞的生长关系密切. 相似文献
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目的探讨c-Jun氨基末端激酶(c-Juna mino-terminal kinase,JNK)信号通路在老年大鼠耳蜗细胞凋亡中的作用,为老年性聋的预防和治疗提供更多的切入点。方法Wistar大鼠24只,其中12只为对照组(3~4月龄),12只为自然衰老组(22~24月龄);听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)检测听力学改变;采用透射电镜观察老年大鼠耳蜗的超微病理变化;用免疫组化及Western blotting方法检测p-JNK和p-c-Jun蛋白的表达。结果老年组大鼠听力〔(72.083±13.345)dBSPL〕较对照组〔(32.083±3.878)dBSPL〕明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01);透射电镜下可见外毛细胞有凋亡样改变,螺旋神经节细胞内大量脂褐素沉着;在耳蜗石蜡切片中可观察到p-JNK和p-c-Jun免疫反应阳性细胞,定位于细胞核,老年组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);Western blotting结果显示老年组内耳组织p-JNK和p-c-Jun的蛋白表达明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在大鼠老年性聋的发生过程中,各种损伤因素可能通过激活JNK信号通路而促使耳蜗细胞的凋亡。 相似文献
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过氧化氢体外诱导大鼠螺旋神经节细胞死亡机制的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察过氧化氢(H2O2)对大鼠螺旋神经节细胞(SGCs)的作用,探讨氧自由基损伤SGCs的机制.方法:新生大鼠SGCB原代培养,取培养第4天细胞加入H2O2,浓度分别为0、100、200、500μmol/L,作用2、4、6 h.光镜下观察细胞形态改变,hochest33258及PI染色,计数受损伤细胞的百分比.结果:在H2O2的作用下,原代培养的SGCs随着H2O2浓度的增加以及作用时间的延长,受损伤的细胞数目呈增加趋势.同时,低浓度(100及200 μmol/L)H2O2作用下,SGCs的损伤主要以凋亡表现为主,PI染色多为阴性;高浓度H2O2(500μmol/L)作用下的SGCs损伤以坏死为主.结论:H2O2可以引起SGCs凋亡,且作用有明显的剂量及时间依赖性.凋亡的发生可能和凋亡相关基因的启动有关,但仍需进一步实验证实. 相似文献
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Expression of Vascular Endothelial Growth Factor and Cyclooxygenase-2 in Laryngeal Squamous Cell Carcinoma and Its significance 总被引:2,自引:0,他引:2
n order to study the expressions of vascular endothelial growth factor (VEGF) and cyclooxygenase-2 (COX-2) in human laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC) and its significance, the expression of VEGF mRNA and COX-2 mRNA in 62 cases of LSCC and 54 adjacent noncancerous laryngeal tissues and 9 normal human laryngeal mucous tissues was detected by using techniques of semi-quantitative RT-PCR. It was found that the expression level of VEGF and COX-2 mRNA was significantly increased in LSCC as compared with that in the normal human laryngeal mucous tissues (both P〈0. 01), and the expression level of VEGF and COX-2 mRNA were significantly increased in stage Ⅲ+ Ⅳtissues of LSCC as compared with the stage Ⅰ + Ⅱ tissues of LSCC (P 〈0.01). There was a high positive correlation between VEGF and COX-2 expression in LSCC (r= 0. 756,P〈0.01). These data raise the possibility that VEGF and COX-2 may play key roles in the growth, invasion and metastasis of LSCC. 相似文献
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目的:探讨谷氨酸对体外原代培养的大鼠耳蜗螺旋神经节细胞(SGC)兴奋性毒性作用。方法:SGC在体外培养4d,加入1mmol/L谷氨酸,继续培养24h后,用荧光显微镜观察Annexin-V-FITC和PI双标的细胞形态改变,以及用激光共聚焦方法观察细胞内游离钙离子浓度的变化。结果:体外培养4d的SGC,用1mmol/L谷氨酸处理24h后,与对照组相比,出现大量的细胞受损,表现为死亡或凋亡(P〈0.05);用Fluo-3染色,激光共聚焦显微镜观察,加入谷氨酸后,80%的SGC细胞内钙离子迅速增加,150s达到高峰。结论:谷氨酸诱导的SGC钙离子内流与细胞受损有明显的关系。 相似文献
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人Bcl-2基因重组腺病毒的构建及其在螺旋神经节细胞中的表达 总被引:3,自引:0,他引:3
目的构建表达人Bcl-2基因的重组腺病毒,并研究其在原代培养螺旋神经节细胞(spiral ganglion cells,SGC)的表达特性。方法采用细菌内同源重组法,从pUC-CAGGS,/Bcl-2质粒中获得人Bcl-2 cDNA,克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,后者和腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在细菌内同源重组,在HEK293细胞中包装成为重组Ad增强型绿色荧光蛋白/Bcl-2腺病毒,电镜观察病毒颗粒,用病毒感染原代培养的大鼠螺旋神经节细胞,在荧光显微镜下观察感染效率,用逆转录聚合酶链反应方法检测Bcl-2基因在螺旋神经节细胞的转录表达,用Western Blot检测其蛋白的表达。结果经酶切鉴定证实重组腺病毒质粒构建成功,电镜显示包装细胞中有大量病毒颗粒存在,呈规则六边形。荧光显微镜下观测到感染病毒的SGC细胞发出明亮的绿色荧光。分别在mRNA水平及蛋白水平证实有外源性Bcl-2基因的表达。结论细菌内同源重组法是一种简便、高效的制备方法。构建的重组Ad增强型绿色荧光蛋白/Bcl-2腺病毒能有效的感染SGC,并可在SGC中正确地转录和翻译,为进一步研究腺病毒介导的Bcl-2基因对螺旋神经节损伤的保护作用奠定基础。 相似文献