实验室玻璃器皿管理之浅见

现总结我校实验室玻璃器皿管理的策略.不仅实验室管理人员应该改进对玻璃器皿的管理方法,而且要加强学生对玻璃器皿的管理.     

海带多糖对人肝癌bel-7402细胞存活和凋亡的影响

目的探讨海带多糖对人肝癌bel-7402细胞存活和凋亡的影响。方法 1体外培养人肝癌bel-7402细胞,加入海带多糖(浓度分别为5、10、20、30 g/L)继续培养48 h,另将不用药物干预的肿瘤细胞组设为对照组;倒置显微镜观察细胞形态的变化,MTT法测定细胞存活率。2体外培养人肝癌bel-7402细胞,设对照组及海带多糖组,海带多糖用药组分别加入海带多糖(10、20、30 g/L),采取相应干预措施。用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡情况。结果 1海带多糖(5、10、20、30 g/L)分别作用bel-7402细胞48 h后,随着海带多糖浓度的增加,bel-7402细胞逐渐变小、固缩、变形;细胞存活率明显降低。2海带多糖作用48 h后,bel-7402细胞凋亡率为(14.8±1.7)%,坏死率为(19.8±2.3)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论海带多糖可抑制bel-7402细胞存活,促进bel-7402细胞凋亡及坏死。     

越橘花色苷对被动吸烟大鼠SOD、GSH-Px、GH影响

目的探讨越橘花色苷对被动吸烟损伤的防治效果。方法 32只大鼠随机分成正常对照组、模型组、低剂量花色苷组和高剂量花色苷组,检测大鼠体重增长、肺重量和肺系数、生长激素(growth hormone,GH)、超氧化物岐化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力。结果模型组GSH-Px活力(1 924±70.20)μmol/L明显低于正常对照组(2 022±125.38)μmol/L(t=2.513,P<0.05);高剂量花色苷组GSH-Px活力(2 004±67.03)μmol/L明显高于模型组(1 924±70.20μmol/L)(t=2.615,P<0.05)和低剂量花色苷组(1 902±116.03μmol/L)(t=3.077,P<0.05);模型组SOD活力与正常对照组比较差异无统计学意义;高剂量和低剂量花色苷组SOD活力分别为(112.26±9.36)、(114.15±14.59)U/mL明显高于模型组(92.53±27.77)U/mL(t=3.722t,=4.078,P<0.05);模型组大鼠体重增长及GH明显低于正常对照组,高剂量和低剂量花色苷组GH明显高于模型组(P<0.05)。结论高剂量花色苷可改善被动吸烟所造成生长发育和过氧化的影响,可能是通过增加血清中SOD、GSH-Px拮抗被动吸烟的损伤。     

翻译抑制剂对紫杉醇诱导肺癌细胞凋亡的影响

目的 研究抑制翻译过程对紫杉醇(PTX)诱导细胞凋亡的影响.方法 体外培养人非小细胞肺癌A549;采用PTX单独或与翻译抑制剂cycloheximide联合处理细胞,采用流式细胞术分析细胞凋亡.结果 2.5、5、10和20 nmol/L PTX作用24 h,细胞凋亡百分率分别为(16.70±2.08)%、(28.08±3.15)%、(17.12±2.57)%和(11.43±2.08)%;30 nmol/L cycloheximide使10和20 nmol/L PTX诱导凋亡效应分别增加了69.01%和165.62%.结论 翻译抑制剂可增加10和20 nmol/L PTX诱导细胞凋亡效应,而对低浓度PTX诱导细胞凋亡无影响.     

正交试验优选长白山笃斯越橘中花色苷提取工艺

目的:优选越橘中花色苷的提取工艺。方法:以提取温度、固液比、提取时间和提取次数为考察因素,以提取率为指标优选最佳工艺。结果:最佳提取工艺为提取温度60℃,提取料液比1∶5,提取时间60min,提取次数3次。结论:该工艺条件简便、稳定,可为进一步研究和开发利用越橘提供科学依据。     

基础医学实验微格教学中批判性思维培养的实践研究

基础医学实验课程具有较强综合性和实践性的特点,知识点多且对操作技能掌握的要求高。传统实验课的教学模式和方法已无法满足培养具备批判性思维的高水平应用型人才的需要。微格教学是一种特别适合实践技能类学科教学的现代化教学方法,已广泛应用于教学研究和实践中。本文依据在基础医学实验课程中实施微格教学的实践经验,探讨微格教学对医学专业本科学生在强化实验操作技能和培养批判性思维的重要价值和意义。     

NPPB对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用及其机制

目的：探讨氯通道阻断剂5-硝基-2-（3-苯丙胺）苯甲酸（NPPB）对人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡的诱导作用,并阐明其可能的机制。方法：体外培养脑胶质瘤SHG-44细胞,分为对照组及50、100和200 μmol·L^-1 NPPB组。采用MTT法检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用免疫组织化学法和蛋白免疫印记法分别检测SHG-44细胞中凋亡蛋白的表达水平。结果：MTT检测,与对照组比较,作用24和48 h,100和200 μmol·L^-1 NPPB组SHG-44细胞活力明显降低（P < 0.01）。流式细胞术检测,100和200 μmol·L^-1 NPPB组细胞凋亡率分别为24.64%和41.85%,高于对照组（4.17%）（P < 0.01）。免疫组织化学和蛋白免疫印记法检测,100 μmol·L^-1 NPPB组SHG-44细胞中caspase-3和Bax蛋白表达水平升高（P < 0.05或P < 0.01）,Bcl-2蛋白表达水平降低（P < 0.05）。结论：NPPB可以通过下调Bcl-2的表达、上调Bax的表达,使caspase-3活化,进而引起SHG-44细胞凋亡。     

柴胡皂苷 d 对SH-SY5Y细胞体外抑制作用及机制

目的 探究柴胡皂苷(SS)d对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的体外抑制作用及分子机制。方法 体外常规培养神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞,分别在浓度0、4、8、10μmol/L SSd的杜尔伯科改良伊格尔培养基(DMEM)中作用48 h,设为对照组及4、8、10μmol/L SSd组,荧光探针(DCFH-DA)法检测各组细胞中活性氧(ROS)的产生情况,试剂盒检测不同浓度SSd对SH-SY5Y细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)含量的影响;Western印迹法检测细胞内细胞周期蛋白(Cyclin)D1、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2及Bcl-2相关X基因(Bax)表达水平。结果 与对照组相比,8、10μmol/L SSd组ROS水平、MDA含量显著升高,Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),且有浓度依赖趋势;4、8、10μmol/L SSd组LDH活性、Bax蛋白表达明显升高,CyclinD1蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 SSd能够通过提高细胞的氧化应激水平,抑制CyclinD1信号转导通路而促进SH-...     

抗氧化酶抑制剂对肿瘤坏死因子-α诱导HepG2细胞凋亡的影响

目的探索抗氧化酶抑制剂对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导人肝癌HepG2细胞内氧化损伤以及对细胞凋亡发生的影响。方法将处于对数生长期的HepG2细胞悬液以50μg/L重组人TNF-α诱导细胞凋亡8 h,建立细胞凋亡模型。将细胞分为正常对照组、凋亡模型组和超氧化物歧化酶(SOD)抑制[2 mmol/L二乙基二硫代氨基甲酸(DETC)]组、过氧化氢酶(CAT)抑制[10 mmol/L氨基三唑(ATZ)]组、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)抑制[0.1 mmol/L青霉胺(PEN)]组、CAT和GPx共同抑制组,暴露2 h后,检测细胞内SOD、CAT和GPx的活力;暴露4 h后,测定细胞内过氧化氢和还原型谷胱甘肽(GSH)的含量,超氧阴离子和羟自由基的产生能力;暴露12 h后,检测细胞存活率、凋亡率和死亡率。结果凋亡模型组细胞内SOD、CAT、GPx活力及产生超氧阴离子、羟自由基能力和过氧化氢、GSH的含量与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常对照组和凋亡模型组相比,各抑制组细胞内相应抗氧化酶活力均下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组和凋亡模型组相比,SOD抑制组及CAT和GPx共同抑制组细胞产生超氧阴离子水平以及CAT和GPx共同抑制组细胞产生羟自由基水平均升高,而SOD抑制组细胞产生羟自由基水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05);此外,与正常对照组和凋亡模型组相比,SOD抑制组细胞内过氧化氢含量和CAT抑制组细胞内GSH含量均降低,而CAT抑制组、GPx抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞内过氧化氢含量和GPx抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞内GSH含量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组相比,其他各组细胞的存活率均降低,凋亡率和死亡率均升高,除凋亡模型组和SOD抑制组细胞死亡率外,差异均有统计学意义(P<0.05)。与凋亡模型组相比,各抑制组细胞存活率降低,SOD抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞凋亡率升高,CAT抑制组、GPx抑制组、CAT和GPx共同抑制组细胞死亡率也升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抗氧化酶抑制剂可通过抑制细胞内抗氧化酶活力破坏细胞内氧化还原平衡,对细胞凋亡的发生造成影响。细胞内氧化还原系统中超氧阴离子可能是促进细胞凋亡发生的关键分子,过氧化氢及其进一步产生的羟自由基可能与细胞死亡密切相关。     

蛹虫草提取物对人结肠癌细胞SW111C抑制作用的研究

目的探讨蛹虫草提取物(RW)对结肠癌细胞株SW111C的抑制作用及可能的机制。方法通过四甲基耦氮唑盐(MTT)法、台盼蓝拒染法检测RW对SW111C增殖的抑制作用,琼脂糖(DNA)凝胶电泳检测细胞凋亡;流式细胞术(FCM)PI染色法检测RW所引起SW111C的凋亡百分率和细胞周期的分布变化。结果 MTT法与台盼蓝拒染法检测结果表明RW对SW111C细胞有明显抑制作用,RW作用24、48、72h后的IC50分别为77.78、32.19、26.20mg/L,且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性;DNA凝胶电泳检测发现32mg/L RW组出现DNA"梯状"条带;FCM检测发现凋亡率随浓度的增高而增高,2、8、32mg/L的凋亡率分别为(6.8±2.32)%、(11.8±2.58)%、(16.9±1.93)%,与对照组[(1.9±1.3)%]相比差异有统计学意义(P<0.01)。细胞周期阻滞于G1期,S期细胞减少。结论 (1)RW对体外培养的SW111C细胞的增殖有抑制作用,并呈现浓度和时间的依赖性,这种抑制作用可能与诱导SW111C细胞凋亡、改变其细胞周期分布有关。