β_1整联蛋白、Fas蛋白在晶状体上皮细胞中的表达与白内障的关系

目的:了解糖尿病性白内障及并发性(高度近视)白内障患者晶状体上皮细胞(LECs)中1β整联蛋白与Fas蛋白的表达情况与LECs凋亡的关系。方法:应用流式细胞和共聚焦显微镜分别定量及定位检测1β整联蛋白、Fas蛋白两种蛋白在LECs中的表达。结果:LECs中1β整联蛋白Fas蛋白的表达在两种白内障间差异有统计学意义(P<0.05)。发现1β整联蛋白与Fas蛋白大部分共同定位于LECs的细胞膜上。结论:在糖尿病性白内障的形成中1β整联蛋白的作用很可能是一种促进LECs凋亡的蛋白,它与Fas蛋白一起促进LECs凋亡。     

pAdCMV-tk/pJM17同源重组及扩增方法的研究

目的 :探讨磷酸钙沉淀法同源重组穿梭质粒 p Ad CMV- tk与腺病毒基因组改装质粒 p JM17的可行性。方法 :用磷酸钙沉淀法将质粒 p Ad CMV- tk与质粒 p JM17共转染至 2 93细胞 ,获得复制缺陷的重组腺病毒 Ad-CMV- tk,将其在 2 93细胞中扩增 ,氯化铯密度梯度离心法纯化扩增病毒 ,空斑实验测定病毒滴度。结果 :质粒 Ad-CMV- tk与质粒 p JM17在 2 93细胞中同源重组后 7～ 10天出现完全的细胞病变态反应。纯化后病毒滴度为 3× 10 1 0pfu/ ml。结论 :磷酸钙沉淀法能成功获得同源重组病毒 ,氯化铯密度梯度离心法纯化病毒可得高滴度腺病毒     

多重聚合酶链反应快速诊断感染性眼内炎的研究

目的：探讨多重聚合酶链反应（MPCR）快速诊断细菌性、真菌性眼内炎及混合感染的价值。方法：MPCR法检测常见致病性细菌和真菌菌株，并检测38例患者41只眼（双眼3例，单眼35例）眼内液标本，与细菌和真菌培养结果比较。结果：MPCR法5h即可检测出标本中微量细菌和真菌，41份标本MPCR检测阳性34份（82．9％），其中细菌阳性26份，真菌阳性6份，细菌和真菌均为阳性2份，MPCR阳性率明显高于细菌或真菌培养（X^2=9．60，P〈0．05）。结论：MPCR速度快、敏感性和特异性高，有助于细菌性和真菌性眼内炎的快速明确诊断。     

靶向Ccnd1基因的siRNA对大鼠晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的探讨靶向Ccnd1基因小干扰RNA(si RNA)对培养的大鼠晶状体上皮细胞(LECs)Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1表达及细胞增殖的抑制作用。方法合成3条靶向大鼠Ccnd1基因的siRNA(si-Ccnd1-1,si-Ccnd1-2,si-Ccnd1-3),LipofectamineTM2000转染体外培养的大鼠LECs,应用RT-PCR和Western blot方法分别检测Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1表达变化,筛选最有效si RNA序列。MTT法连续测定转染最有效si RNA序列后24、48、72、96和120 h细胞增殖情况。结果与对照组相比,3条si RNA均能不同程度地抑制Ccnd1 mRNA和周期蛋白D1的表达,以si-Ccnd1-3最为有效(P<0.05)。与对照组比较,si-Ccnd1-3转染后24 h开始明显发挥对细胞增殖的抑制作用,并持续至120 h以后(P<0.05)。结论靶向Ccnd1的si RNA能有效降低大鼠LECsCcnd1 mRNA和周期蛋白D1蛋白表达,抑制LECs增殖。     

ATP与P2X7受体在Müller细胞激活导致视网膜神经节细胞株RGC-5凋亡中的作用研究

目的:探讨Müller细胞胶质化激活对RGC-5细胞的影响及ATP与P2X7受体在其中的相关作用?方法:纯化培养Müller细胞?RGC-5细胞株,免疫荧光进行细胞鉴定,并观察加入DHPG后Müller细胞的GFAP表达情况?荧光素酶法检测加入DHPG后Müller 细胞外ATP的含量变化;DHPG刺激后的培养液作为条件培养基加入RGC-5细胞株(RGC-5预先使用MPEP及MPMQ处理2 h),TUNEL法检测RGC-5凋亡情况,预先加入P2X7受体阻断剂亮蓝G(brilliant blue G,BBG)后检测RGC-5的凋亡情况?同时使用Western blot检测抗凋亡蛋白及促凋亡蛋白Bcl-2和Bax的变化情况?免疫荧光及Western blot检测RGC-5上P2X7受体的表达变化?结果:DHPG激活Müller 细胞后可以导致细胞外ATP的增加;激活的Müller 细胞条件培养基(conditioned medium,CM)可以导致RGC-5凋亡的明显增加?而BBG可以抑制RGC-5凋亡的增加,同时Western blot也显示与对照组相比CM显著降低RGC-5细胞上的Bcl-2蛋白水平,但增加了Bax的蛋白表达,而当预先加入BBG后再用CM处理则呈现相反的结果?另外Western blot及免疫荧光显示加入条件培养基后RGC-5细胞的P2X7受体蛋白表达增加?结论:Müller细胞的激活可以导致RGC-5细胞的凋亡,该现象可能与Müller细胞激活引起的ATP释放增加及RGC-5上P2X7受体有关?     

刺五加联合尼莫地平对原发性闭角型青光眼的临床疗效观察

目的:观察口服刺五加联合尼莫地平片对原发性闭角型青光眼视神经损害的临床疗效。方法:原发性闭角型青光眼术后眼压控制正常的患者25例(35跟),随机分为观察组14例(21眼),口服刺五加联合尼莫地平治疗,对照组11例(14眼),仅口服肌苷片,治疗后3月两组进行闪光视网膜电图(F-ERG)及图形视诱发电位(P-VEP)的检查。结果:观察组F-ERG的b波振幅值、P-VEP的P100波潜伏时及振幅值改善明显高于对照组(P<0.05)。观察组F-ERG的b波潜伏时较对照组有所提前。结论:刺五加药片联合尼莫地平可改善原发性闭角型青光眼视功能损害。     

我国眼病抽样调查中的常见偏倚问题与对策

偏倚是眼病抽样调查中常见的人为误差,是影响调查结果真实性与可靠性的主要原因.本文分析评论了我国眼病抽样调查中常见的几种偏倚,包括抽样偏倚、无应答偏倚及诊断偏倚等的产生原因及其对策;强调控制偏倚足确保调查研究质虽的关键;指出只要随机化抽样、样本量足够、认真检录和询问病史、提高受检率、准确检查诊断、严格培训及预试验,并做好质量控制工作,就可以将偏倚消除或减少到最低程度,从而提高我国眼病抽样调查质量.     

眼内应用γ-干扰素防治白内障的实验研究

目的 :探讨γ 干扰素眼内应用时对眼组织的毒性反应 ,为γ 干扰素的临床应用提供实验依据。方法 :前房注药组 :大耳白兔 15只 ,分为 5组 ,向前房内注入γ 干扰素 0 .2ml,浓度分别为 5 0万IU、2 5万IU、12 .5万IU和 6 .2 5万IU ,对照组注射平衡盐液 0 .2ml。晶状体囊袋内注药组 :大耳白兔12只 ,分为 4组 ,右眼经透明角膜切口行超声乳化晶状体摘除术并植入人工晶状体 ,向囊袋内注入γ 干扰素 0 .2ml,浓度分别为 5 0万IU、2 5万IU及 12 .5万IU。对照组同时行手术 ,术中囊袋内注入平衡盐液 0 .2ml。结果 :前房注药组 :5 0万IU组用药后 1～ 3d前房反应与对照组相比差异有显著性(P <0 .0 5 ) ,2 5万IU组用药后第 1天前房反应与对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,其余各组与对照组相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。所有实验组兔眼角膜透明 ,眼底未见异常 ,眼压与对照组相比差异无显著性。病理切片检查 :5 0万IU用量组有一只眼见虹膜少量炎症细胞浸润 ,其余实验组兔角膜、虹膜及视网膜均未见异常反应。晶状体囊袋内注药组 :5 0万IU用量组术后 1～ 3d前房反应经单因素方差分析 ,与对照组相比差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,其余各组与对照组相比差异无显著性 (P >0 .0 5 )。病理切片检查所有实验组角膜、虹膜及视     

多焦点人工晶状体研究进展

近年来,白内障摘出术联合人工晶状体植入已成为白内障治疗的主要手术方式。然而,随着越来越多的中老年患者对视力要求的提高,单焦点人工晶状体提供的远视力或者近视力已然无法满足其对生活工作的需要,因此,多焦点人工晶状体(MIOL)应运而生。MIOL种类繁多,光学特性各异,为了使患者术后达到更好的屈光状态和更高的视觉质量,需个性化选择MIOL。因此,本文就MIOL的类型、特点、临床选择的影响因素及预后的研究进展作一综述。