ACE2基因通过调控Nrf2/HO-1通路改善肾缺血再灌注损伤

目的 探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞HK-2氧化应激、炎症、凋亡及核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路的影响。 方法 将ACE2慢病毒转染HK-2细胞,按照实验需要分为常氧组(Control组)、缺氧复氧模型组(H/R组)、缺氧复氧转染阴性对照慢病毒组(H/R-NC组)和缺氧复氧转染ACE2慢病毒组(H/R-ACE2组)。细胞经H/R处理后,通过CCK-8法检测细胞活力;RT-PCR及ELISA法检测炎症因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)水平;比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)表达水平;Western blotting法检测胱天蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、Nrf2、HO-1的蛋白水平。采用Nrf2抑制剂ML385以及HO-1抑制剂SnPPIX抑制Nrf2/HO-1通路,Western blotting法检测Caspase-3、Bcl-2、Bax、Nrf2、HO-1的蛋白表达水平变化,比色法检测SOD和MDA表达变化。 结果 与Control组相比,H/R组细胞活力降低(t=7.58,P<0.001),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均增加(t_MDA=11.08,P_MDA<0.001;t_PCR-IL-6=5.82,P_PCR-IL6<0.001;t_PCR-TNF-α=7.69,P_PCR-TNF-α<0.001;t_PCR-IL-1β=4.80,P_PCR-IL-1β=0.001;t_ELISA-IL-6=34.11,P_ELISA-IL-6<0.001;t_ELISA-TNF-α=14.12,P_ELISA-TNF-α<0.001;t_ELISA-IL-1β=9.63,P_ELISA-IL-1β<0.001;t_Caspase-3=2.73,P_Caspase-3=0.026;t_Bax=27.75,P_Bax<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平下降(t_SOD=7.74,P_SOD<0.001;t_Bcl-2=75.49,P_Bcl-2<0.001;t_ACE2=11.41,P_ACE2<0.001)。与H/R组相比,H/R-ACE2组细胞活力增加(t=3.61,P=0.002),MDA含量和炎症因子IL-6、TNF-α和IL-1β表达水平以及细胞凋亡相关蛋白Caspase-3、Bax蛋白水平均下降(t_MDA=6.15,P_MDA<0.001;t_PCR-IL-6=3.34,P_PCR-IL-6=0.006;t_PCR-TNF-α=3.65,P_PCR-TNF-α=0.007;t_PCR-IL-1β=4.06,P_PCR-IL-1β=0.004;t_ELISA-IL-6=14.62,P_ELISA-IL-6<0.001;t_ELISA-TNF-α=10.42,P_ELISA-TNF-α<0.001;t_ELISA-IL-1β=8.65,P_ELISA-IL-1β<0.001;t_Caspase-3=3.74,P_Caspase-3=0.006;t_Bax=30.52,P_Bax<0.001),SOD活性、Bcl-2和ACE2蛋白水平增加(t_SOD=3.58,P_SOD=0.007;t_Bcl-2=63.86,P_Bcl-2<0.001;t_ACE2=58.72,P_ACE2<0.001),Nrf2/HO-1信号通路被激活蛋白水平增加(t_Nrf2=44.55,P_Nrf2<0.001;t_HO-1=14.19,P_HO-1<0.001)。然而ML385和SnPPIX处理会抑制ACE2基因过表达在H/R中HK-2细胞的保护作用(F_Bax=11.02,P_Bax=0.003;F_Bcl-2=21.48,P_Bcl-2<0.001;F_Caspase-3=20.80,P_Caspase-3<0.001;F_SOD=133.49,P_SOD<0.001;F_MDA=14.06,P_MDA=0.001)。 结论 ACE2在HK-2细胞缺氧复氧损伤中具有抑制氧化应激、调节炎症、改善凋亡的作用,Nrf2/HO-1信号通路发挥重要作用。     

大连地区孕妇及新生儿巨细胞病毒感染的调查

本文采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测1119例孕妇血清1人巨细胞病毒(HCMV)特异性抗体IgM，并用聚合酶涟反应(PCR)检测41例新生儿尿液中HCMV—DNA。结果：孕妇HCMV活动感染率10．10％(113／1119)，晚期孕妇感染率略高于早中期(7．43％和10．50％)，其感染与孕妇的文化程度和职业有关。母血HCMV—IgM阳性的21例新生儿尿液HCMVDNA阳性6例，(28．57％)，41例新生儿尿液检测结果可见表．母血HCMV—IgM阳性与新生儿尿液HCMVDNA阳性密切相关。     

汉滩病毒G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk细胞内相互作用

目的：研究汉滩病毒（HTNV）G1蛋白胞质区ITAM样基序与Syk的细胞内相互作用。方法：构建用于研究Syk和G1ITAM样基序之间相互作用的哺乳动物细胞双杂交系统，验证G1ITAM样基序与Syk之间是否存在细胞内相互作用。结果：哺乳动物细胞双杂交分析证实G1ITAM样基序在哺乳动物细胞内可以与Syk相互作用；而突变体分析表明，这种相互作用依赖于该基序中两个高度保守的酪氨酸残基的存在。结论：HTNVG1蛋白胞质区高度保守ITAM样基序在体外和哺乳动物细胞内可以与Syk相互作用，为进一步探讨G1蛋白ITAM样基序在HFRS免疫信号传递中的作用及其与血管内皮损伤的关系奠定了基础。     

糖尿病伴发肺结核38例分析

目的总结糖尿病伴发肺结核的临床特点、疗效及预后.方法比较分析A组38例糖尿病伴发肺结核患者和B组45例单纯肺结核患者的临床表现、空洞形成,合并肺部感染情况、痰菌阳性和疗效进行比较.结果 A组咯血18例,合并肺部感染20例,痰菌阳性18例,空洞形成15例,明显高于B组13例、12例、12例、9例.疗效及预后均较B组差.结论糖尿病患者易患肺结核,且随糖尿病病情加重肺结核病情恶化,痰菌阳性率升高,对糖尿病合并肺结核应早期诊断和早期治疗,以提高疗效.     

新生大鼠海马神经元原代培养方法的研究

目的 :研究和比较 3种不同培养神经元的方法 ,提供一种纯化效率和存活率均较高的培养技术。方法 :取新生SD大鼠的海马区 ,应用一般培养法、加阿糖胞苷法、加阿糖胞苷和神经生长因子法培养神经元 ,观察神经元的形态。用倒置显微镜观察和MTT比色分析检测神经元的存活率。用ABC免疫组化染色法 ,比较 3种不同培养方法在不同培养时间所获得神经元的纯度。结果 :加阿糖胞苷和神经生长因子培养组神经元生长良好 ,纯度和存活率均较高。结论 :加阿糖胞苷和神经生长因子培养神经元的方法具有简便可行 ,易于生长的优点 ,可作为神经元体外培养的良好模型     

斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段的克隆和序列分析

目的　克隆斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,并对其进行测序和序列分析。方法　利用简并引物 ,进行RT PCR ,扩增斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段。TA克隆装入pUCm T载体 ,进行鉴定、测序 ;利用DNASIS程序推导其所编码的氨基酸序列 ,并与相关虫种半胱氨酸蛋白酶进行氨基酸序列的同源性分析。结果　RT PCR扩增出了一约5 0 0bp的cDNA片段 ,对阳性克隆测序后获得其核酸序列 ,长 4 95bp。将推导的氨基酸序列作同源性分析显示 ,该序列与相关虫种半胱氨酸蛋白酶存在着较高的同源性 ,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守。结论　克隆获得了斯氏肺吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段 ,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点。     

内蒙乌拉特前旗男性酒依赖流行病学调查

对内蒙古巴盟乌拉特前旗旗镇成年男性进行了酒依赖流行病学调查，该人群酒依赖患病率为８６．４‰。通过非条件ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析，发现酒依赖的发生与饮酒年数多、饮酒频度高、国家行政职能机关的干部职业、蒙古族有关。     

充血性心力衰竭患者外周单核细胞分泌TNF-α水平变化及胺碘酮对其影响的研究

目的：探讨充血性心力衰竭（CHF）患者血清TNF-α水平变化，以及胺碘酮对培养的正常人及CHF患者外周血单个核细胞（PBMC）分泌TNF-α的影响。方法：取20例正常人和20例Ⅱ°-Ⅲ° CHF患者静脉血：(1) 测其血清TNF-α含量；(2) 离心取PBMC，分别加入胺碘酮和LPS等，使胺碘酮的终浓度为0 mmol/L、0.1 mmol/L、1 mmol/L和10 mmol/L进行培养，经24 h孵化后，取培养上清液，用ELISA法测血清和培养上清TNF-α含量。结果：CHF患者血清TNF-α含量明显高于对照组（P<0 01），并随心衰程度的加重而增加（P<0 01），胺碘酮对两组PBMC分泌TNF-α均有抑制作用，并呈剂量依赖性。结论：(1) TNF-α可能参与CHF过程；(2) 胺碘酮可能抑制TNF-α的产生。     

一例促皮质素静脉外渗至局部皮肤坏死的案例解析与改进

对1例癫痫性痉挛患儿采用促皮质素静脉给药时发生静脉外渗至局部皮肤坏死的案例进行解析。针对事件发生原因,制定并采取措施:静脉穿刺难度事前评估,优化临床监护,加强相关知识培训,以肌肉注射代替静脉滴注等,避免了此类事件的再次发生,提升了临床合理用药水平,确保了患者安全。     

“六新”模式推动临床护理高质量发展:以陕西省人民医院为例

护理学科高质量发展促进公立医院高质量发展。介绍了陕西省人民医院以符合时代要求的护理管理、患者体验、人才队伍、学科建设、效率提升、文化建设为切入点的临床护理高质量发展“六新”模式,对实施成果进行总结分析,并从信息化建设角度思考如何进一步推进临床护理高质量发展,为推动临床护理高质量发展提供参考。