人脐静脉内皮细胞的体外分离培养及鉴定

目的探讨人脐静脉内皮细胞的原代培养方法,提高体外分离培养血管内皮细胞的成功率。建立血管内皮细胞培养模型,为体外研究血管内皮细胞提供实验基础。方法取2根脐带(至少20 cm)冲净淤血,采用加工穿刺针固定脐静脉灌注消化液,一根用0.2%胶原酶Ⅱ,另一根用0.1%胶原酶Ⅰ和0.25%胰酶等比混合消化液,比较两种酶的消化效果。收集细胞并用含有10 ng/mL的VEGF的培养基中培养,观察细胞的生长及传代。并在倒置显微镜下观察细胞的形态学特点,同时用免疫组织化学的方法对所得细胞进行鉴定。用流式细胞术观察细胞周期。结果两种消化酶方法均获得了相当数量的人脐静脉内皮细胞,胶原酶Ⅱ的消化效果稍优于混合消化酶,且比较理想的消化时间均为13 min,细胞接种后4～5 h开始贴壁生长,1周左右可生长成单层,光镜下呈多角形,"铺路石"样排列,免疫组织化学法可见内皮细胞胞浆中人第Ⅷ因子相关抗原呈阳性反应。细胞周期显示约有50.6%的细胞处于G0/G1期。结论胶原酶Ⅱ和胶原酶Ⅰ与胰酶等比混合消化液灌注法是获得脐静脉内皮细胞的一种可取方法,而胶原酶是分离培养脐静脉内皮细胞的首选消化液,成功率高,可靠性大,可成功构建体外研究血管内皮细胞的模型。     

警惕!老人视力突然下降

随着年龄的增加,老年人出现阅读等近距离工作困难,属正常的生理现象,我们通常称为老花。但如果突然出现看远处东西也不清楚甚至看不见,就应该立即去医院眼科就诊。分析认为,有些眼病如不及时治疗,就会导致失明,老年朋友切不可认为是老花眼加重而掉以轻心。常见的病因有: 1、急性闭角型青光眼:该病多     

基质金属蛋白酶在角膜疾病中的作用

MMP作为降解细胞外基质的酶家族。参与许多生理及病理过程。同样其在角膜表达水平的改变与许多角膜疾病密切相关。随着对其研究的不断深入,使得从一个新的角度来预防和治疗角膜疾病成为可能。所以十分有必要了解MMPs的结构、功能、生物合成的调节及其在角膜疾病中的作用。     

SARS病毒N蛋白真核表达质粒构建及诱导的体液免疫

目的构建SARS病毒核衣壳蛋白（N）的真核表达质粒，并研究其在小鼠体内诱导的体液免疫应答。方法采用PCR方法体外扩增SARS病毒N蛋白基因片段，定向克隆入真核表达栽体pVAC，构建pVAC-N重组质粒；大量制备该重组质粒，经基因枪腹部皮内注射免疫BALB／c小鼠三次，间接ELISA法测定免疫鼠IgG抗体效价。结果成功构建了重组表达质粒pVAC-N，免疫小鼠后可诱导产生出特异性的IgG抗体。结论构建的真核表达质粒pVAC-N能诱导小鼠产生特异性抗体，为SARS疫苗的进一步研究打下基础。     

重组人白细胞介素-1受体拮抗剂对体外培养的胎儿晶状体上皮细胞的影响

目的:探讨重组人白介素-1受体拮抗剂对培养的胎儿晶状体上皮细胞黏附和增殖的影响。方法:培养晶状体上皮细胞,取生长良好的第2代细胞用于实验。将第2代胎儿LEC于不同浓度的rhIL-1ra孵育后,用四甲基偶氮唑盐(methylthio tetrazole,MTT)法记录各孔黏附细胞数量的吸光度(A)值,并与空白组进行对照;将第2代胎儿LEC培养24h待细胞贴壁后,与不同浓度的rhIL-1ra再共育24h后,MTT法记录各孔细胞数量的吸光度(A)值,并与空白组进行对照。结果:除1μg/L浓度组外,其余各组抑制胎儿晶状体上皮细胞与胶原的黏附呈剂量依赖性,与空白组对照具有显著性差异。100μg/L浓度组细胞收缩、变圆,但仍保持贴壁状态,与空白组对照可显著抑制已贴壁胎儿晶状体上皮细胞的增殖。结论:有>1μg/L的各组rhIL-1ra能够抑制体外培养的胎儿LEC与胶原的黏附,并且浓度越大抑制作用越明显,具有浓度依赖性。仅100μg/LrhIL-1ra浓度组作用24h可显著地抑制已贴壁胎儿晶状体上皮细胞的增殖,但仍保持贴壁状态,提示该药可能具有较轻的毒副作用。     

Nd:YAG激光泪道成形术治疗泪道阻塞性疾病的临床观察

目的:观察Nd:YAG激光治疗泪道阻塞性疾病的疗效。方法:应用国产Nd:YAG泪道激光治疗机对64例(80眼)各种泪道阻塞进行治疗。用带针芯的泪道探针探查泪道至阻塞处,拔出针芯,将激光导光纤维插至泪道阻塞处,发射激光至泪道阻塞处疏通为止。结果:全部病例观察随访6～24个月,上泪道阻塞23眼,治愈率91.3%;下泪道阻塞53眼,治愈率92.5%;上下泪道联合阻塞4眼,治愈率75%;总治愈率为91.3%,无效8.7%。1次治愈63眼,占78.8%;2次治愈10眼,占12.5%。无明显并发症。结论:Nd:YAG激光治疗泪道阻塞效果好,操作简便安全,组织损伤小,经济费用低,术后恢复快,不需开刀手术,不留瘢痕,是一种理想有效的治疗方法。     

酒精中毒并发急性脑梗塞16例分析

急慢性酒精中毒是急诊科常见疾病，而脑梗塞多见于高血压、高血脂、糖尿病等疾病。我院自2000年3月-2007年12月收治酒精中毒合并急性脑梗塞病人16例，16例中只有10例合并高血压，高血脂，均无糖尿病。现将情况报告如下。目的是探讨酒精中毒与急性脑梗塞的关系。     

尿毒症高凝状态的研究

目的：探讨尿毒症患者存在高凝状态的情况及腹透或血地血浆部分凝血历子和抗凝物质的影响。方法：检测了７１例慢性肾功衰、尿毒症患者及４７例正常对照有关主凝状态的１０项指标，并对其中１６例２在透析１－３月后进行上述指标的复查。结果：尿毒症未透析者、ＣＡＰＤ者及血透者ＴＴ、ＡＰＴＴ缩短，Ｆｂｇ、ｖＷＦ：Ａｇ、ＶⅢ；Ａｇ／ＶⅢ；Ｃ比值增高，ｔ－ＰＡ及ＡＴ－Ⅲ；Ａ降低。腹膜透析能使ｖＷＦ：Ａｇ、ＶⅢ：Ｃ降低、Ａ     

输血前检测Rh血型的临床意义

Rh血型系统是仅次于ABO血型系统的又一重要血型系统，Rh血型抗体是引起溶血性反应的主要因素，Rh血型具有非常重要的临床意义。为了保证输血安全，预防迟发性溶血性输血反应和新生儿溶血病的发生，我院从2808年起开始对所有预输血患者实行Rh血型的常规检测，现报道如下：