复方SZ滴眼液对晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用及其信号转导机制

目的： 探讨复方SZ滴眼液（Co-SZ）抑制H₂O₂诱导的晶状体上皮细胞（LEC）凋亡的作用及信号转导机制。为将Co-SZ作为防治白内障的有效药物提供实验依据。 方法： (1)将H₂O₂与Co-SZ和SD大鼠晶状体共同孵育后：TUNEL法检测LEC凋亡率。透射电镜观察LEC超微结构改变及凋亡形成。(2)H₂O₂与Co-SZ和体外培养的牛LEC共同孵育后,四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的Co-SZ抑制LEC凋亡率。流式细胞仪（FCM）检测LEC细胞核内DNA含量。荧光分光光度法检测LEC内游离Ca2+浓度。放射免疫分析法检测LEC内环化腺苷酸（cAMP）和环化鸟苷酸（cGMP）浓度。 结果： TUNEL法检测Co-SZ组LEC凋亡率显著低于H₂O₂组。Co-SZ组LEC超微结构变化也显著轻于H₂O₂组。MTT检测Co-SZ组细胞活性明显高于H₂O₂并具有剂量依赖关系。Co-SZ组LEC核内DNA含量增加。Co-SZ使LEC内游离Ca2+、cAMP降低、cGMP升高。结论：Co-SZ能有效抑制H₂O₂诱导的LEC发生的凋亡 。Co-SZ抑制LEC凋亡的机制可能是通过抑制LEC核内DNA降解，并通过抑制细胞内游离钙离子浓度升高、阻断Ca2+-钙调蛋白依赖性蛋白激酶途径和Ca2+-蛋白激酶C信号转导途径。     

老年性白内障的锌代谢异常

老年性白内障是致盲的主要原因之一。探讨老年性白内障的病因、研究其发生发展的机理,寻求预防甚至逆转晶体混浊的方法,一直是重要的研究课题。近年来,随着微测定技术的发展,微量元素锌与老年性白内障在病因学和发病学中的关系已日益引起国内外学者的关注。本文通过16例老年性白内障及G例健康对照者锌代谢的研究,探讨锌与老年性白内障之     

金雀异黄素对氧化损伤的人晶状体上皮细胞凋亡的超微结构的影响

目的探讨金雀异黄素(Gen)对氧化损伤的人晶状体上皮细胞(HLEC)凋亡有无抑制作用。方法在终浓度3×10-4mol/L H2O2培养液中复制HLEC凋亡模型,并以雌二醇(E2)作为阳性对照,在透射电镜下观察HLEC超微结构的改变。结果超微结构研究显示,H2O2组绝大多数HLEC发生凋亡,并呈凋亡各期改变的全过程;E2、Gen组仅少数HLEC发生凋亡,并多为早期或中期的轻微改变。结论 Gen可减轻实验性氧化损伤的HLEC凋亡程度。     

异补骨脂素对氧化损伤的人晶状体上皮细胞的防护作用及其机制

白内障是世界范围内最主要的致盲性眼病.晶状体氧化损伤导致白内障,晶状体可依靠一系列抗氧化系统保护其免受氧化损伤.抗氧化系统中,有酶性抗氧化物和非酶性抗氧化物.     

尾加压素Ⅱ对人晶状体上皮细胞一氧化氮合成的影响

目的探讨新型生物活性物质尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ,U-Ⅱ)对人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)内一氧化氮合酶(nitric oxide sythase,NOS)活性及一氧化氮(nitric oxide,NO)合成的影响。方法用不同浓度的U-Ⅱ(1×10-9mol.L-1、10×10-9mol.L-1、100×10-9mol.L-1)干扰体外培养的HLEC,采用化学比色法和硝酸还原酶法测定HLEC内NOS活性和NO含量。结果空白对照组、(1×10-9mol.L-1、10×10-9mol.L-1、100×10-9mol.L-1)U-Ⅱ组的NOS活力值分别为(3.407±0.168)U.mg-1、(4.058±0.169)U.mg-1、(4.921±0.298)U.mg-1和(5.598±0.897)U.mg-1;NO含量分别为(0.747±0.183)μmol.g-1、(1.238±0.232)μmol.g-1、(1.531±0.101)μmol.g-1、(1.850±0.114)μmol.g-1。与空白对照组相比,U-Ⅱ呈浓度依赖性增强细胞内的NOS活性,刺激NO合成,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。结论 U-Ⅱ可使HLEC内NOS活性增强和NO生成增多,提示U-Ⅱ可能通过NOS/NO途径促进HLEC增殖。     

姜黄素抑制人晶状体上皮细胞增殖与胶原蛋白合成的研究

目的:探讨中药单体姜黄素(Cur)对人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)增殖及细胞内Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白合成的影响。方法:20mg/L的Cur作用于HLE-B3 24h后MTT法检测吸光度值(OD值),苏木精-伊红染色观察细胞形态,流式细胞术检测细胞周期变化,ELISA法检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达。结果:rhbFGF组OD值较正常组升高,Cur组OD值较rhbFGF组降低,抑制率达53.70%;Cur组细胞数目明显减少,胞浆减少,轮廓不清,交织的网状结构减少,甚至有的细胞变圆,细胞核凝集,见核固缩现象,胞浆嗜酸性染色;G1期的细胞Cur组较rhbFGF组明显增加,S期的细胞Cur组较rhbFGF组明显减少,G2期的细胞Cur组较rhbFGF组无明显变化;Ⅰ型胶原蛋白浓度为Cur组较rhbFGF组明显下降,Ⅲ型胶原蛋白浓度Cur组较rhbFGF组也明显下降。结论:Cur抑制rhbFGF诱导的HLE-B3增殖的同时也能抑制HLE-B3内Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白合成,干扰HLE-B3纤维化,可望成为防治后囊膜混浊的理想药物。     

五种天然药物抑制晶状体上皮细胞增殖效应比较

目的：对五种天然药物姜黄素（curcumine,Cur）、榄香烯（elemene,Ele）、三氧化二砷（arsenite trioxide,As2O3）、雷公藤内酯醇（triptolide,Tfi）、莪术（rhizoma curcumae,Rc）抑制重组人碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF）诱导的牛晶状体上皮细胞（lens epithelial cell,LEC）增殖效应进行比较。方法：将rhbFGF诱导体外培养的LEC发生增殖,并用Cur、Ele、As2O3、Tri、Rc分别与其共同孵育后,用MTT法检测LEC的活性：用流式细胞术（flow cytometer,FCM）检测LEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达。结果：增殖组LEC活性、PCNA蛋白表达显著高于对照组（P〈0．01）;Cur组、Ele组、As2O3组、％组、Rc组的LEC活性、PCNA蛋白表达均比增殖组显著降低（P〈0．01）。其中Cur、Ele的作用最强,As2O3的作用次之,Tri作用较弱,Rc作用最弱（P〈0．01）。Cur和Ele的作用相近（P〉0．05）。结论：五种天然药物Cur、Ele、As2O3、Tri、Rc均可抑制LEC增殖。Cur和Ele的作用最佳,有希望成为防治后发性白内障的有效药物。     

异补骨脂素防护人晶状体上皮细胞的凋亡

目的:探讨异补骨脂素(ISR)对氧化损伤的人晶状体上皮细胞(HLEC-B3)凋亡有无抑制作用.方法:本研究在终浓度300μmol/L H_2O_2培养液中复制HLEC-B3凋亡模型,并以雌二醇(E_2)作为阳性对照,在透射电子显微镜下观察HLEC-B_3超微结构的改变,采用FCM法检测HLEC-B_3凋亡率及线粒体膜电位的变化.结果:超微结构研究显示,H_2O_2组绝大多数HLEC-B_3发生凋亡,并呈凋亡各期改变的全过程;E_2、ISR组仅少数HLEC-B_3发生凋亡,并多为早期或中期的轻微改变.FCM结果显示:H_2O_2组HLEC凋亡率显著高于空白对照组;E_2和ISR组凋亡率均低于H_2O_2组(P<0.01).H_2O_2,组线粒体跨膜电位比对照组显著下降;E_2组和ISR组的线粒体跨膜电位均比H_2O_2组升高(P<0.01).结论:ISR可减轻实验性氧化损伤的HLEC-B2凋亡程度,为寻求防治老年性白内障的药物提供实验依据.     

复方SZ滴眼液抑制晶状体上皮细胞凋亡及其信号转导机制的实验研究

目的：探讨复方SZ滴眼液（Co-SZ）抑制H202诱导的晶状体上皮细胞（LEC）凋亡的作用及信号转导机制。为将Co-SZ作为防治白内障的有效药物提供科学的实验依据。方法：1、将H202与Co-SZ和SD大鼠晶状体共同孵育后：（1）TUNEL法检测LEC凋亡率。（2）透射电镜观察LEC凋亡形成。2、H2O2与Co-SZ和体外培养的牛LEC共同孵育后：（1）四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测不同浓度的Co-SZ抑制LEC活性的作用。（2）流式细胞仪（FCM）检测LEC细胞核内DNA含量。（3）荧光分光光度法检测LEC内游离Ca^2＋浓度。（4）放射免疫分析法检测LEC内环化腺苷酸（cAMP）和环化鸟苷酸（cGMP）浓度。     

近视眼患者血清多巴胺含量测定

目的　通过对近视眼患者的血清多巴胺含量测定 ,从临床角度探讨近视眼的发病机制。方法　采用高压液相色谱 /电化学检测法测定中学生近视眼组和正常对照组血清中多巴胺 (DA)的含量 ,并进行分析和比较。结果　近视眼组血清中多巴胺含量明显低于正常对照组 (P <0 0 1) ,近视眼组血清中多巴胺含量与性别和近视程度无明显相关(P >0 0 5 )。结论　青少年学生体内多巴胺的平衡失调 ,可能与青少年学生近视眼形成密切相关。