五味子乙素对氧化损伤的晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的:探讨五味子乙素(Sch B)对实验性氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的影响。方法:采用无菌操作摘取SD大鼠双眼,并在手术显微镜下分离晶状体,随机分为空白对照组、过氧化氢组(H₂O₂)、吡诺克辛(PS)组和Sch B组。使晶状体孵育在300μmol·L^-1H₂O₂培养液中复制LEC凋亡模型,同时加入终浓度为0.5mmol·L^-1的SchB,置二氧化碳培养箱共同孵育24h。取晶状体前囊膜,采用TUNEL法检测LEC凋亡及凋亡率,透射电子显微镜观察LEC超微结构改变和凋亡小体形成。结果:H₂O₂组LEC凋亡率(92.0±2.6)显著高于空白对照组(3.5±1.8)(P<0.01);SchB组LEC凋亡率(13.8±3.0)显著低于H₂O₂组,且与PS组(56.0±9.9)有显著的差异(P<0.05)。超微结构研究显示,H₂O₂组绝大多数LEC发生凋亡,并呈凋亡各期严重改变的全过程;Sch B组仅少数LEC发生凋亡,并多为早期或中期的轻微改变。结论:Sch B可明显抑制实验性氧化损伤大鼠LEC凋亡,且明显优于PS滴眼液。     

尾加压素Ⅱ生物学效应机制的研究

尾加压素Ⅱ(Urotensin Ⅱ，UⅡ)最初是从硬骨鱼的脊髓尾垂体中分离出来的一种生长抑素样环形肽。1998年Coulouarn等首次从人体中克隆出人UⅡ(human Urotensin Ⅱ，hUⅡ)。研究发现，UⅡ具有分布广泛、生物活性多样的特点，近年来UⅡ已引起了学术界的普遍关注。     

四种归肝经明目中药防护晶状体氧化损伤和上皮细胞凋亡的研究

目的 :探讨四种归肝经明目中药车前子、青葙子、菊花和熟地对晶状体氧化损伤及晶状体上皮细胞 (lensepithelialcell,LEC)凋亡的防护作用。方法 :将 2 1只 (42眼 )新西兰白兔晶状体分成 7组 :空白对照组、Fenton组、吡诺克辛钠 (PS)组和车前子、青葙子、菊花及熟地四种归肝明目中药组。采用Fenton反应复制兔晶状体氧化损伤模型 ,在显微镜下观察各组晶状体的混浊程度 ,并分别测定晶状体酶性和非酶性抗氧化剂水平。同样 ,将 2 1只 (42眼 )SD大鼠双眼随机分成上述 7组 ,采用H2 O2 复制LEC凋亡模型 ,同时分别采用上述不同药物干预。应用TUNEL法检测LEC凋亡及凋亡率、透射电子显微镜观察LEC超微结构改变和凋亡小体形成。结果 :四种归肝明目中药组的晶状体混浊程度均明显轻于Fenton组 ;四种归肝明目中药组晶状体中酶性抗氧化剂的活性和非酶性抗氧化剂的含量均明显高于Fenton组。四种归肝明目中药组LEC凋亡率均显著低于H2 O2 组 (P <0 .0 1) ,且与PS组均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。超微结构研究显示 ,H2 O2 组绝大多数LEC发生凋亡 ,并呈凋亡各期改变 ;四种归肝明目中药组均仅有少数LEC发生凋亡 ,并多为早期或中期的轻微改变。结论 :四种归肝经明目中药均可通过提高晶状体的抗氧化能力对抗晶状体的氧化损伤 ,抑     

雷公藤内酯醇对牛晶状体上皮细胞增殖及胞浆内游离Ca2+浓度的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇(Tri)对牛晶状体上皮细胞(1ens epithelial cell,LECs)增殖的影响及可能的机制.方法:取体外培养的第4代牛LECs,分5组培养.空白对照组:以DMEM培养;增殖对照组:以DMEM 50μg/L rhEGF培养;Tri高、中、低剂量组分别以含50μg/L rhEGF和40μg//L、20μg/L、10μg/L Tri的DMEM培养.分组培养6 h、12 h、24 h、48 h、72 h后用MTT比色法及流式细胞仪检测细胞增殖抑制率和增殖细胞核抗原(PCNA)阳性表达率;用荧光指示剂Fura-2/AM测定空白对照组、增殖对照组、Tri中剂量组分组培养48 h后胞内游离Ca2 浓度.结果:随着作用时间的延长和浓度的增加,Tri对rhEGF诱导的LECs增殖的抑制率逐渐增大;Tri各剂量组PCNA阳性表达率低于增殖对照组;Tri中剂量组胞内Ca2 浓度高于增殖对照组和空白对照组.结论:Tri对LECs的增殖有明显的抑制作用,该作用可能通过影响胞内Ca2 浓度来完成.     

实验性电离辐射白内障及其微量元素研究

为探索微量元素在电离辐射白内障中的改变本研究采用大剂量60°C_or射线照射新西兰幼兔双眼,动态研究微量元素在兔眼电离辐射白内障的病因和发病学中的意义。材料与方法一、材料: 1、实验动物:选用5～6周两性健康新西兰白兔43只(由第四军医大学实验     

微量元素对Wistar乳鼠硒性白内障抑制作用的研究

采用Ｗｉｓｔａｒ乳鼠经皮下注射亚硒酸钠诱发白内障，同时皮下注射汞、银、锂、钴等微量元素，动态观察白内障的发生与发展并测定晶体内有活性的超氧化物歧化酶。结果表明：微量元素汞、银、锂、钴可不同程度地抑制和延缓硒性白内障的发生与发展，晶体内有活性的ＳＯＤ含量与硒性白内障的发展有一定的相关性。     

莪术、三氧化二砷对晶状体上皮细胞增殖及信号转导分子的影响

目的：探讨莪术(RC)、三氧化二砷(As₂O₃)对晶状体上皮细胞(LEC)增殖及细胞信号转导的影响,为防治后发性白内障提供实验依据。方法：采用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导牛LEC增殖；四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测RC,As₂O₃对LEC增殖的抑制率；流式细胞术(FCM)检测RC,As₂O₃对LEC增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的抑制作用；荧光分光光度法检测LEC内［Ca²⁺］i、放射免疫分析法检测cAMP和cGMP。结果：RC,As₂O₃对rhbFGF诱导的LEC增殖的抑制率增加(P＜0.01)；明显下调rhbFGF诱导增殖的LEC内PCNA蛋白表达(P＜0.01)；使增殖的LEC内［Ca²⁺］i和cAMP显著增高(P＜0.01),cGMP显著降低(P＜0.01)。上述指标均呈剂量-效应关系。结论：RC,As₂O₃能显著抑制LEC增殖；Ca²⁺,cAMP和cGMP细胞信号转导是其抑制LEC增殖的重要分子机制；RC,As₂O₃对防治后发性白内障具有广阔的前景。     

重组人表皮生长因子对牛品状体上皮细胞增殖的影响

目的 观察重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)对牛晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)增殖的影响.方法 体外培养牛LEC,在培养液中分别加入0 μg·L-1、1 μg·L-1、10μg·L-1、20μg·L-1、50μg·L-1、100μg·L-1、1000 μg·L-rhEGF,加药后72 h采用MTT法,在酶标仪490 nm波长处测定吸光度值并观测细胞增殖变化.结果 0μg·L-1、1μg·L-1、10μg·L-1、20μg·L-1、50μg·L-1、100 μg·L-1、1000μg·L-1的rhEGF作用于LEC 72 h后MTT法测得的OD值分另4为0.166±0.029、0.195±0.017、0.232±0.034、0.263±0.019、0.315±0.009、0.261±0.005、0.206±0.043.结论 rhEGF对牛LEC增殖有明显的促进作用,且呈浓度相关.     

菊花防护晶状体上皮细胞氧化损伤及信号转导机制的实验研究

目的通过菊花影响过氧化氢（H2O2）氧化损伤的晶状体上皮细胞（LEC）内钙（Ca^2＋）、环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）信号转导的实验研究，探讨归肝经明目中药防治白内障的细胞和分子机制。方法将传代培养的牛LEC与H2O2共同孵育复制氧化损伤模型，同时加入菊花水提取液孵育后，四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测LEC活性、荧光分光光度法检测LEC内的钙离子浓度（[Ca^2＋]i）、放射免疫分析法检测LEC内cAMP和cGMP含量，探讨不同浓度菊花及孵育12h、24h和36h的影响。结果①H2O2组LEC活性下降，菊花使氧化损伤的LEC活性显著增高（P〈0．01），呈浓度依赖关系和时间依赖关系。（②H2O2组LEC的[Ca^2＋]i升高，菊花使氧化损伤所致的LEC的[Ca^2＋]i显著降低（P〈0.01），并呈时间-效应关系。③H2O2组LEC的cAMP浓度升高、cGMP浓度下降，菊花可使氧化损伤的LEC的cAMP水平显著降低（P〈0．01）、cGMP水平显著升高（P〈0．01），也呈时间-效应关系。结论通过[Ca^2＋]i、cAMP和cGMP信号转导系统及其相互作用调节生物学效应，可能是菊花防护LEC氧化损伤及减少细胞凋亡的细胞和分子生物学机制。     

阿魏酸钠对实验性晶体氧化损伤的抑制作用

本研究旨在探讨阿魏酸钠 (SF)对实验性晶体氧化损伤的抑制作用 .实验设对照组 ,Fenton模型组 ,吡诺克辛 (PS)组和 SF组并分别配制培养液 .将新西兰白兔双眼随机分组后无菌操作摘出眼球 ,立即在手术显微镜下取出晶体 ,称重后将晶体分别放入各组培养液中置二氧化碳培养箱温育 2 4 h.将温育后的晶体冰浴下制成匀浆 .取匀浆测定晶体可溶性蛋白 (SP) ,谷胱甘肽 (GSH) ,维生素 C(Vit C)和丙二醛 (MDA)含量及超氧化物歧化酶 (SOD) ,谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH- Px)的活性 .结果表明SF组的晶体 SP,SOD,GSH- Px,GSH,Vit C的含量及活性均显著高于 Fenton组和 PS组 ,而脂质过氧化终末产物 MDA水平显著低于 Fenton组和PS组 .结果提示 SF对实验性晶体氧化损伤有很强的抑制作用 ,并明显优于 PS滴眼液