SELDI-TOF-MS联合蛋白质芯片技术在病理性近视早期诊断中的应用

目的:运用蛋白质芯片联合表面增强激光解吸附离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测病理性近视患者血清蛋白质的差异改变,寻找病理性近视特异的生物标志,以期用于病理性近视的早期诊断.方法:使用CM10芯片联合SEIDI-TOF-MS技术检测9例病理性近视患者和9例健康对照人血清中蛋白质谱的改变.结果:病理性近...     

增殖细胞核抗原法研究莪术和三氧化二砷对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的:探讨用增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达法研究莪术和三氧化二砷对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用,为防治后发性白内障提供实验依据。方法:采用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导体外培养的牛晶体上皮细胞(LEC)增殖;流式细胞术(FCM)检测莪术(RC)和三氧化二砷(As2O3)对增殖状态的牛LEC增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的抑制作用,并探讨浓度—效应关系。结果:①rhbFGF使PCNA蛋白表达率明显上升(89.82±2.79)%,与对照组(63.13±3.23)%比较有显著性差异(P<0.01);②RC和As2O3对LEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用,低、中、高不同浓度的RC和As2O3作用24h后,其PCNA蛋白表达率分别为(51.00±3.34)%、(34.29±3.66)%、(23.06±2.91)%和(46.67±4.63)%、(21.97±1.75)%、(13.89±1.61)%。与增殖组(89.82±2.79)%比较有显著性差异(P<0.01);③随着RC和As2O3浓度升高,PCNA蛋白表达率下降,呈明显的剂量—效应关系(P<0.01)。结论:莪术和三氧化二砷可抑制晶状体上皮细胞增殖,对防治后发性白内障具有广阔的前景。     

五味子乙素对晶状体上皮细胞内Ca2+cAMP cGMP的影响

目的研究旨在探讨五味子乙素对氧化损伤的晶状体上皮细胞内Ca2+、环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,从细胞信号转导角度揭示天然药物防治白内障的细胞和分子学机制.方法采用牛晶状体上皮细胞进行晶状体上皮细胞(LEC)原代和传代培养,以含有过氧化氢(H2O2)的培养液孵育LEC复制氧化损伤模型,并加入五味子乙素单体共同孵育.分别采用四甲基偶氮唑兰(MTT)比色测定法观察在不同时间和浓度条件下LEC活性变化,采用荧光分光光度计测定不同时间细胞内钙离子浓度[Ca2+]i以及放射免疫分析法测定不同时间LEC内cAMP、cGMP的含量变化.结果①H2O2组可引起LEC吸光度值(A)明显下降(P＜0.01),五味子乙素能明显增强氧化损伤的LEC活性,并呈剂量-效应关系和时间-效应关系.②氧化损伤的LEC[Ca2+]i升高(P＜0.01);五味子乙素可以降低由H2O2引起的细胞[Ca2+]i的升高,并呈时间-效应关系.③H2O2组cAMP浓度升高;cGMP浓度下降(P＜0.01);五味子乙素使cAMP水平下调,cGMP水平上升(P＜0.01),并呈时间-效应关系.结论五味子乙素可明显抑制LEC氧化损伤及凋亡,其作用机制可能是通过钙信号系统、cAMP信号系统、cGMP信号系统及其相互作用来调节生物学效应.     

榄香烯对HLE-B3内蛋白激酶A及其mRNA表达的影响

探讨中药单体榄香烯(Ele)对人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)内蛋白激酶A(PKA)及mRNA表达的影响. 方法 利用碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导HLE-B3增殖,将80mg/L的Ele作用在处于增殖状态下的HLE-B3 24 h,流式细胞术检测HLE-B3内PKA的表达,RT-PCR法检测HLE-B...     

丹栀逍遥散治疗中浆病与性激素水平的关系探讨

中心性浆液性脉络膜视网膜病变（central serous chorioretinopathy,CSC）是发生在黄斑部及其附近视网膜的局限性浆液性视网膜神经上皮层与色素上皮层分离的病症,简称＂中浆病＂。本病常由精神紧张和过度疲劳等诱发,近年来,有学者提出本病与机体内分泌功能紊乱有关。     

五种天然药物抑制晶状体上皮细胞增殖效应比较

目的：对五种天然药物姜黄素（curcumine,Cur）、榄香烯（elemene,Ele）、三氧化二砷（arsenitetrioxide,As203）、雷公藤内酯醇（triptolide,Tri）、莪术（rhizomacureumae,Re）抑制重组人碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF）诱导的牛晶状体上皮细胞（1ensepithelial cell,LEC）增殖效应进行比较。方法：将rhbFGF诱导体外培养的LEC发生增殖,并用Cur、Ele、As20,、Td、Rc分别与其共同孵育后,用MTT法检测LEC的活性;用流式细胞术（flow cytometer,FCM）检测LEC增殖细胞核抗原（prolif-erating cell nuclear antigen,PcNA）表达。结果：增殖组LEC活性、PCNA蛋白表达显著高于对照组（P〈0．01）;Cur组、Ele组、As,O,组、Tri组、Rc组的LEC活性、PCNA蛋白表达均比增殖组显著降低（P〈0．01）。其中Cur、Ele的作用最强,A鄢O,的作用次之,畅作用较弱,Rc作用最弱（P〈0．01）。Cur和Ele的作用相近（P〉0．05）。结论：五种天然药物Cur、Ele、As,Q、％、Rc均可抑制LEC增殖。Cur和Ele的作用最佳,有希望成为防治后发性白内障的有效药物。     

蜕皮甾酮和异补骨脂素在HLEC中抗氧化损伤的信号转导机制

目的：研究异补骨脂素（Isopsoralen,ISR）和蜕皮甾酮（Ecdysterone,ECR）对经H2O2处理的HLEC内磷酸化ERK（p-ERK）的表达,从而探讨雌二醇（β-Estradiol,E2）,ECR和ISR是否通过启动或干预ERK/MAPK信号转导途径来发挥抗氧化损伤作用,以揭示E2和ECR及ISR抗氧化损伤的信号转导机制。方法：本研究采用ECR和ISR与人晶状体上皮细胞（HLEC）共同孵育,以E2作为阳性对照,再用H2O2对HLEC造成氧化损伤后,采用流式细胞术（flow cytometer,FCM）检测不同时段的p-ERK蛋白表达。结果：正常HLEC内存在p-ERK表达;H2O2组p-ERK表达量随时间的延长而减少;E2和ECR与ISR各组p-ERK表达量分别在1,6,12h达到高峰。结论：E2和ECR与ISR的抗氧化损伤作用可能是与ERK/MAPK信号通路有关。     

重组人表皮生长因子对牛品状体上皮细胞增殖的影响

目的观察重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)对牛晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)增殖的影响。方法体外培养牛LEC,在培养液中分别加入0μg.L-1、1μg.L-1、10μg.L-1、20μg.L-1、50μg.L-1、100μg.L-1、1000μg.L-1rhEGF,加药后72h采用MTT法,在酶标仪490nm波长处测定吸光度值并观测细胞增殖变化。结果0μg.L-1、1μg.L-1、10μg.L-1、20μg.L-1、50μg.L-1、100μg.L-1、1000μg.L-1的rhEGF作用于LEC72h后MTT法测得的OD值分别为0.166±0.029、0.195±0.017、0.232±0.034、0.263±0.019、0.315±0.009、0.261±0.005、0.206±0.043。结论rhEGF对牛LEC增殖有明显的促进作用,且呈浓度相关。     

白内障术后房水一氧化氮及一氧化氮合酶的动态变化

目的：探讨白内障术后房水一氧化氮（NO）与炎症反应的关系。方法：用新西兰白兔动态观察对照组、晶状体囊外摘出术组（ECCE）和晶状体囊外摘出＋人工晶状体植入术组（ECCE＋IOL）眼内炎症反应及房水一氧化氮合酶（NOS）和NO2－／NO3－的活性。结果：白内障术反应与房水NOS和NO活性呈动态变化，ECCE＋IOL组明显高于ECCE组，且上两组均高于对照组。结论：房水NO的变化与白内障术后眼内炎症反应密切相关。     

FCS-Ⅰ型离心沉淀仪对晶体溶解性青光眼房水细胞学检查2例分析

晶体溶解性青光眼多发予过熟期白内障的眼中，亦可见于外伤性白内障或白内障囊外摘除术后皮质残留的眼中。在过熟期白内障，晶状体囊变薄，自发性囊皮破裂，晶体中大分子量蛋白漏出至前房与房水中吞噬细胞一起，随着房水循环而沉积予房角处，阻塞了滤帘间隙，致房水排出通道受阻，引起眼压升高。晶体溶解性青光眼房水细胞学报道少见，现将我院2例晶体溶解性青光眼房水细胞学结果报告如下。