HBeAg真核表达载体的构建及其在Bewo细胞中的表达

目的 构建乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)的真核表达载体pcDNA3.1(+)-Hbe,并观察其在Bewo细胞中的表达.方法 用PCK方法从质粒pMD18T-HBV中扩增HBeAg基因,克隆到pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-Hbe,通过酶切、PCR及测序鉴定,并将该裁体转染Bewo细胞,72 h后,用Western 免疫印迹和微粒子酶免疫分析法(MEIA)检测HBeAg蛋白在胞内和上清中的表达.结果 通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建HBeAg表达载体,该载体可以在Bewo细胞系中表达HBeAg,并可分泌HBeAg.结论 构建了HBeAg真核表达载体pcDNA3.1(+)-Hbe,为研究胞内HBeAg对Bewo细胞Toll样受体表达的作用奠定了基础.     

2型糖尿病肾病患者外周血单个核细胞组织因子活性检测的意义

目的探讨2型糖尿病肾病患者外周血单个核细胞组织因子促凝活性（TF-PCA）的改变及其临床意义。方法 63名2型糖尿病患者按照尿白蛋白/肌酐比共分为三组：比值〈30mg/g为正常蛋白尿组（n=22）,30mg/g≤比值〈300mg/g为微量白蛋白尿组（n=26）,比值≥300mg/g为大量白蛋白尿组（n=15）;同时选择21名健康体检者作为对照组。采用一期凝固法测定外周血单个核细胞TF-PCA。常规检测空腹血糖、糖化血红蛋白、超敏CRP（Hs-CRP）、尿酸（UA）、胱抑素C（CYSC）,并进行相关分析。结果糖尿病组外周血TF-PCA随尿蛋白水平升高而升高,同时单个核细胞TF-PCA与空腹血糖、Hs-CRP、UA等呈正相关,相关系数分别为0.419、0.293、0.232（P〈0.05）。结论 2型糖尿病患者外周血单个核细胞TF-PCA明显升高,且与多种因素相关,TF-PCA升高可能与DN的发病机制、病程进展相关。     

VSD加开放松质骨植骨结合外固定支架治疗合并骨质及软组织缺损四肢开放性骨折研究

目的评价负压封闭引流(VSD)加开放松质骨植骨结合外固定支架在四肢开放性骨折合并骨质及软组织缺损治疗中的应用和临床疗效。方法应用负压封闭引流(VSD)加开放松质骨植骨结合外固定支架治疗合并骨质及软组织缺损四肢开放性骨折25例,其中男15例,女10例,年龄20-60岁,平均40岁。根据开放性骨折的Gustilo分型,全部为Ⅲ型,并且均为开放性软组织损伤的Tscherne分型中的开放性骨折Ⅲ级。结果随访12-18个月,平均14个月,皮肤重新覆盖时间为平均14d,骨折愈合时间平均16周。结论负压封闭引流(VSD)加开放松质骨植骨结合外固定支架治疗合并骨质及软组织缺损四肢开放性骨折具有操作相对简单,减少感染,缩短软组织覆盖及骨折愈合时间,减少并发症等优点。     

川芎嗪对凝血酶诱导血管内皮细胞释放vWF组织因子途径抑制物及表达组织因子的影响

目的 :探讨川芎嗪对凝血酶诱导的血管内皮细胞释放vWF、组织因子途径抑制物及表达组织因子的影响。方法 :传代培养的新生牛主动脉内皮细胞取上清液测vWF、组织因子途径抑制物 ;细胞冻融液测组织因子的活性。结果 :①与对照相比凝血酶能明显促进内皮细胞表达组织因子 ( 1 2 .8± 2 .43,P <0 .0 0 1 )和释放vWF( 1 8.43± 3.2 0 ,P <0 .0 0 1 ) ,川芎嗪则抑制组织因子表达 ( 0 .52± 0 .1 3,P <0 .0 0 1 )抑制vWF释放 ( 1 3.3± 5.6,P <0 .0 1 ) ;②与对照相比 ( 2 .64± 0 .93) ,凝血酶明显抑制内皮细胞释放组织因子途径抑制物 ( 0 .81± 0 .52 ,P <0 .0 0 1 ) ,但川芎嗪无明显作用 ,也不能抑制凝血酶的效应。结论 :川芎嗪可以抑制内皮细胞表达组织因子和释放vWF。     

慢病毒携带shRNA对内皮细胞组织因子表达的抑制作用

目的:构建RNA干扰慢病毒栽体,研究慢病毒携带的短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)对内皮细胞中组织因子(tissue factor,TF)表达的抑制作用.方法:将靶向人TF基因的2条shRNA表达序列克隆到慢病毒栽体pENTRTM/U6的黏性末端,测序鉴定后,与目标栽体pLenti6/BLOCKiTTM-DEST vector进行位点特异性重组,再测序;经脂质体导入293 FT细胞,包装成慢病毒,收集病毒上清并测定病毒滴度.RT-PCR和ELISA检测干扰后内皮细胞TF的表达.结果:将目的序列成功连接到裁体上,并经测序分析证实载体构建成功;在293FT细胞中进行慢病毒包装,收集上清并检测病毒滴度为5×105/TU.RT-PCR和ELISA检测结果证实构建的携带shRNA的慢病毒可显著抑制内皮细胞TF的表达.结论:成功构建了携带人TF基因的RNAi慢病毒载体,慢病毒携带的短发夹干扰RNA能干扰内皮细胞中TF的表达,可为血栓栓塞性疾病的防治提供一种有效的方法.     

小儿急性肾小球肾炎92例心电图分析

小儿急性肾小球肾炎(简称急性肾炎)是儿科最常见的泌尿系统疾病之一，临床上可累及多脏器，特别是心、肾功能的损害，心电图(EKG)检查亦发现有不少的改变。现将本院1991年至2000年收治的92例急性肾炎住院患儿的EKG检查情况。分析报告如下。……     

甲状腺功能亢进性心脏病误诊冠心病12例分析

甲状腺功能亢进性心脏病(简称甲亢心)患者, 尤其是中、老年人, 当以心绞痛、心房纤颤和心肌缺血心电图改变为突出表现或首发症状时极易误诊为冠心病, 我院自1991年10月～2000年12月共收治了12例误诊为冠心病的甲亢心, 占同期住院的甲亢心6/19, 这12例患者由于长期误诊为冠心病, 都未能得到及时正确的治疗, 其中有1例病情发展到危重程度时才得以确认. 现将误诊病例报道如下.……     

腹腔镜阑尾切除术103例报告

我院自 1996年 8月开展腹腔镜胆囊切除术, 1998年 2月始开展腹腔镜系列手术,包括:阑尾切除术、脾切除术、肾切除术、输尿管切开取石术、胆总管切开取石术、结肠癌手术、食管癌手术、肺叶切除术、子宫附件手术等,现将 1998年 2月～ 2002年 6月所行腹腔镜阑尾切除术 103例报告如下.     

妊娠期糖尿病患者凝血功能和血脂检测的临床价值

目的探讨凝血四项及血脂检测在妊娠期糖尿病(GDM)患者中临床价值。方法选取2017年1月至2018年3月我院就诊的GDM患者62例作为实验组,同期健康体检的正常妊娠孕妇46名作为对照组,检测孕妇外周血中孕早期(A)、孕中期(B)和孕晚期(C)三个不同时间段中的凝血功能及血脂变化,凝血功能包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)及凝血酶时间(TT),血脂检测包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),比较两组凝血功能及血脂指标的特点。结果不同孕期各指标变化较大,其中早期时两组凝血指标PT、APTT、Fg、TT无明显变化,差异均无统计学意义(P0.05)。两组血脂水平比较TG升高,组间差异具有统计学意义(P0.05),其他TC、HDL-C、LDL-C均无明显变化,组间无统计意义(P0.05);孕中期两组比较,PT、APTT缩短,HDL-C减低,Fg、TG、TC、LDL-C均明显升高,组间差异均具有统计学意义(P0.05),TT组间变化较小,差异无统计学意义(P0.05);孕晚期两组比较Fg、TG、TC、LDL-C均明显升高,TT、APTT、PT、HDL-C均较对照组孕妇组明显缩短,组间差异显著,均具有统计学意义(P0.05);此外还发现GDM患者各期凝血及血脂指标差异较大,除孕早期TT与孕中期TT组间差异较小无统计学意义外,其他均具有统计学意义(P0.05)。结论妊娠糖尿病在怀孕的各个时期凝血功能和血脂存在高凝等异常状态,临床在控制血糖的同时应及时进行干预凝血功能和血脂的变化,预防血栓性疾病和心脑血管疾病的发生风险,及时、有效地保障母婴健康。     

急性阑尾炎超声影像特征分析

目的 总结急性阑尾炎超声表现,探讨超声图像特征对急性阑尾炎及其病因的诊断价值.方法 回顾性分析70例临床手术确诊的急性阑尾炎患者阑尾超声声像图特征.结果 本组70例患者中,有明确病因的27例（38.6％）,均为粪石阻塞.60例（85.7％）超声检查阑尾及其周围示明显改变.阑尾改变包括形态改变、管壁厚度改变、管壁回声改变、管腔内容物.阑尾外周改变包括回盲部水肿、胃肠道积气积液扩张、外周肠间隙积液、阑尾周围强回声组织包绕、小网膜囊积液、盆腔积液、门静脉栓子.结论 急性阑尾炎超声诊断符合率高,对粪石阻塞引起的阑尾炎有很高的诊断价值.超声对急性阑尾炎的分型诊断有重要作用,可为临床进一步治疗提供依据.