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目的对一起副溶血性弧菌引起的食物中毒病原菌进行分型溯源和毒力基因分析。方法采用荧光定量PCR对分离副溶血性弧菌株检测致热性溶血素TDH基因,并利用脉冲场凝胶电泳进行分子分型,利用BioNumerics软件对图谱进行聚类分析。结果从抽检食物中毒样品中分离的5株副溶血性弧菌TDH基因检测结果显示均为阳性;PFGE分型4株副溶血性弧菌带型一致,1株带型与其他分离株有1条带的差异。结论利用脉冲场凝胶电泳对食物中毒病原菌进行分子分型并进行毒力基因检测,为食源性疾病溯源及分子流行病学研究提供科学依据。 相似文献
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目的建立和评估多重荧光PCR方法快速鉴定伤寒、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌的方法,并应用于临床血培养样品的检测。方法收集留取医院的可疑伤寒患者的血培养标本,用多重实时荧光PCR法和传统分离培养法同时进行分离鉴定,分析比较双盲实验结果,评价多重实时荧光PCR方法的灵敏度、特异度等检测性能指标。结果共检测临床样本538例,多重荧光PCR法检出阳性218例,比传统培养法多检出6例;阴性320例,与传统培养法一致。以传统检测方法为金标准,多重荧光PCR方法的灵敏度为100%,特异度为98.2%。结论建立的多重荧光PCR检测方法操作简便,可快速、特异、灵敏地检测出伤寒、甲、乙、丙型副伤寒沙门菌,可以应用于临床标本的早期快速分型诊断,提升重大传染病的应急处置能力和监测能力。 相似文献
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邹旋 吴永胜 刘晓剑 黄素丽 何建凡 赵锦 武南 张仁利 梅树江 刘佩意 张振 石晓路 吕星 卫兰 马起山 逯建华 李媛 冯铁建 彭朝琼 张顺祥 夏俊杰 《中华流行病学杂志》2020,41(8):1225-1230
目的 对深圳市新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)应急响应策略和措施的效果进行评价,明确人口密度高、流动性强的超大城市新冠肺炎策略和措施的有效性。方法 绘制新冠肺炎流行曲线,划分流行期和防控阶段,观察防控措施效果。制作双层阶发病标点地图,明确不同时点传染源的分布和传播风险。建立传播动力学模型,预期发病数与实际发病数对比。新型冠状病毒核酸检测阳性率,反映人群风险水平。借助深圳市人群新冠肺炎相关知识、态度和行为调查结果,估计人群防护和响应能力。结果 深圳市新冠肺炎流行经历了上升期、平台期和下降期,疫情上升快,但高峰期持续时间短,而发病降低的速度快和幅度大;流行曲线虽然呈现人传人现象,但“拖尾”现象不明显。从发病标点地图看,在新冠肺炎防控干预期,传染源分布广泛;人口密度越高的区域,病例数越多;而防控干预措施见效后,传染源减少。从预期发病数对比可见,实际病例数大幅减少。高危险人群新型冠状病毒核酸检测阳性率呈下降趋势,2月16日之后未能检出。市民新冠肺炎知识、态度和行为水平较高,防护能力和应急响应度较高。结论 深圳市早期由部门主导的防控机制发挥了重要作用,但不足以阻断新冠肺炎流行;一级响应策略和措施效果明显,确保了春节后复工复产的启动;对超大城市,采取综合性阻断策略和措施,同样可以控制新冠肺炎的流行。 相似文献
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目的:建立检测香港海鸥形菌的实时荧光PCR方法。方法:根据香港海鸥形菌以16SrDNA基因设计探针和引物,建立检测香港海鸥形菌荧光PCR方法,并对建立的方法进行特异性、灵敏性的评价。结果:检测体系灵敏度高,菌液的最低检出限可达40 CFU/反应体系;特异性好,对329株细菌的检测符合率达100%。结论:建立的实时PCR检测方法可应用于食源性致病菌中香港海鸥形菌的快速检测。 相似文献
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目的对2006年广州地区食源性疾病中分离的肠炎沙门菌进行分子分型,探讨广州地区肠炎沙门菌的分子型别和多态性,为食源性疾病溯源及致病菌数据库的建立提供依据。方法采用限制性内切酶XbaI,对2006年分离到的菌株进行PFGE分子分型,使用BioNumericsVersion4.0软件(使用Dice系数和UPGMA法)对菌株进行聚类分析,并与深圳市的肠炎沙门菌PFGE型别进行比较。结果所有74株肠炎沙门菌均得到一致的PFGE克隆型,表明两次不同的食源性疾病均由同一PFGE型引起。广州与深圳的肠炎沙门菌PFGE图谱的比较表明,两地食源性疾病分离株具有很近的亲缘关系。结论PFGE分子分型与流行病学资料紧密结合可增强对肠炎沙门菌食源性疾病的溯源和预警。 相似文献
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目的 建立快速检测葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)基因的聚合酶链反应(PCR)方法.方法 ①根据SEB基因的序列,设计PCR引物特异性扩增靶基因片段.通过对1株产SEB金黄色葡萄球菌和9株对照菌株进行PCR检测,评价该方法的特异性;通过对产SEB金黄色葡萄球菌菌株做10倍系列稀释后进行PCR检测,评价该方法的敏感性;②分析30株金黄色葡萄球菌SEB基因的携带情况.结果 ①建立PCR方法快速检测SEB基因,扩增产物长度为494 bp.PCR反应体系中有26 CFU的产SEB金黄色葡萄球菌即可检出SEB基因;②30株分离的金黄色葡萄球菌中有2株携带有SEB基因.结论 PCR法可以快速、敏感地检测SEB基因,为金黄色葡萄球菌食物中毒诊断提供依据. 相似文献
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目的了解深圳市淡水鱼受香港海鸥菌污染的状况。方法于2011年2-3月共采集深圳市2家农贸批发市场和1家商场淡水鱼共计329份,将鱼肠中、后段内容物直接涂布改良麦康凯琼脂平板,凡生化符合的同时用特异性荧光PCR确诊香港海鸥菌。结果在329份淡水鱼中共检出香港海鸥菌7份,总阳性率为2.13%,其中塘虱鱼的阳性率最高为7.50%,鳙鱼的阳性率为2.50%,草鱼的阳性率为1.22%,其它淡水鱼未检出。7株香港海鸥菌生化反应阳性的,荧光PCR结果均为阳性。结论深圳市场淡水鱼中香港海鸥菌的污染不容忽视,应加强对淡水鱼产品中香港海鸥菌污染的监测,及时进行食品安全的预防和预警。 相似文献
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目的建立分子信标荧光PCR体系检测产气荚膜梭菌的快速检测方法,应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检验。方法根据GenBank公布的保守序列,针对α毒素基因设计一对引物和分子信标探针,用FAM荧光剂标记探针的5’端,并进行特异性和灵敏度分析,同时以10种细菌作对照。结果分子信标荧光PCR反应体系检测10种细菌,只有产气荚膜梭菌出现特异荧光信号,其他均无荧光信号,而且与其他细菌无交叉反应。对40份食品样品进行检测,3份产气荚膜梭菌PCR阳性,其余样品为阴性,检测仅需2 h。3份阳性样本经传统方法培养,2份有检出产气荚膜梭菌。结论分子信标荧光PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于产气荚膜梭菌食物中毒的快速诊断和食品污染物及感染性腹泻等监测工作中,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。 相似文献
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目的 探讨心衰后大鼠心肌的Na+-K+泵活性及其α亚基的变化。方法 建立大鼠多柔比星(adriamycin,ADM心衰模型。以酶解法急性分离大鼠左室心肌细胞,以膜片钳技术记录Na+-K+泵电流,并以Western blot技术检测Na+-K+泵α亚基的表达。结果 ADM致大鼠心衰后Na+-K+泵电流密度显著下降,由(0.507 0 ±0.062 97 pA/pF降到(0.210 6±0.048 90 pA/pF,且拟合曲线显示主要为高亲和力泵发生了改变,其K值由6.74×10-8 mol·L-1升至2.97×10-7 mol·L-1;Western blot检测结果也进一步表明低亲和力α1亚基蛋白表达无明显改变,而高亲和力α2亚基蛋白表达则明显下降。结论 心衰可通过减少Na+-K+泵高亲和力α2亚基表达而降低大鼠心肌Na+-K+泵活性。 相似文献
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目的建立丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的实时荧光PCR快速检测方法,用于沙门菌属内的分型鉴定。方法根据GenBank公布的丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌的保守序列,设计引物和改良分子信标探针,建立实时PCR检测方法。结果检测体系灵敏度高,纯DNA和菌液的最低检出限分别可达10fg和20CFU/反应体系;特异性好,对71株细菌的检测符合率达100%。20株沙门菌采取盲号模拟血培养标本进行血培养检测及鉴定,检出5株丙型副伤寒沙门菌和4株猪霍乱沙门菌,与试验的菌株相符。70份食品中用实时荧光PCR同时检测丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌均为阴性,而用传统方法分离培养未检出。结论建立的实时PCR检测方法可以快速、特异、灵敏地检测出丙型副伤寒沙门菌和猪霍乱沙门菌。 相似文献