日本血吸虫DNA疫苗辅以FQ2诱导小鼠保护性免疫的实验研究

目的探讨日本血吸虫Sj26GSTDNA疫苗辅以佐剂FQ2共同作用对小鼠的免疫保护作用。方法采用FQ212"g/只分别与Sj26GSTDNA疫苗混合经股四头肌接种BALB/c小鼠,共接种3次,同时设Sj26GSTDNA疫苗组与生理盐水对照组,接种后4周以日本血吸虫尾蚴攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计数减虫率和减卵率。结果FQ2 疫苗组的减虫率与减卵率分别为34.24%与41.12%,而疫苗组的减虫率与减卵率各为28.76%与29.03%,结果显示FQ2 疫苗组的减虫率与减卵率均高于疫苗组,减卵率差异显著(P<0.05)。结论FQ2对Sj26GSTDNA疫苗有明显的增效作用,提高了DNA26Kda疫苗对小鼠的保护作用。     

偶联植物多糖对日本血吸虫疫苗PV1223增效作用及其机制的初步探讨

 目的以天然提取香菇多糖和茶叶多糖混合物(茶叶多糖-香菇多糖=1∶1)为佐剂,探讨疫苗-佐剂偶联物对血吸虫疫苗的保护性免疫的增效作用及其机制。方法采用10⁸ CFU日本血吸虫疫苗PV1223与植物多糖偶联后皮下接种小鼠,同时设立对照组。接种后第8周以日本血吸虫尾蚴攻击感染,感染后6周剖杀小鼠,计算减虫率、减卵率,并测定血清中特异性抗体水平。结果实验组减虫率和减卵率分别达到65.96%,80.88%,与对照组相比有非常显著意义(P<0.01),而免疫前后各实验组IgG水平却无统计学差异。结论偶联植物多糖对日本血吸虫疫苗PV1223有明显的增效作用,其免疫机制可能以细胞免疫为主。     

人白细胞抗原—DRB1等位基因与中国西部泡状棘球蚴病易感性？…

目的 了解人白细胞抗原（ＨＬＡ）＝ＤＲＢ１等位基因与泡球蚴病相关性,阐明泡球蚴病的免疫学发病机制,探寻 球蚴病的易感基因或抗病基因提供线索。方法 应用ＰＣＲ／ＳＳＲ技术,对中国西部甘肃省漳县、岷县泡球蚴病高流行区４个 的３５例口才１０４例正常人九进行了ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因型分析。结果 且ＨＬＡ－ＤＲＢ１＊０４０Ｘ基因频率为２６％（１８／７０）,正常对照组籽１０％（２０／２０８）（ＲＲ＝４．４５,Ｘ     

植物多糖对日本血吸虫DNA疫苗pVIVO2-IL12-Sj23增效作用的研究

目的 以提取天然香菇菌多糖和茶叶多糖混合物为佐剂，探讨混合型植物多糖对血吸虫疫苗的保护性免疫增效作用。 方法 构建日本血吸虫重组质粒pVIVO2-IL12?鄄Sj23。BALB/c小鼠随机分为3组，每组10只。A组每鼠股四头肌注射生理盐水100 μl 为对照，B组每鼠注射pVIVO2-IL12-Sj23 100 μg，C组每鼠注射pVIVO2-IL12-Sj23 100 μg加等量多糖混合物。小鼠接种后第4 周以日本血吸虫尾蚴40±2条经皮肤攻击感染，感染后6周剖杀，计算减虫率及每克肝组织减卵率，同时用ELISA测定血清中特异性抗体水平。 结果 C组减虫率和每克肝组织减卵率分别为64.3%和79.9%，B组则分别为45.5%和58.3%， B、C两组的差异有统计学意义（P＜0.05）。B、C两组IgG水平均较A组显著升高（P＜0.05），但B、C两组IgG抗体水平的差异无统计学意义（P＞0.05）。 结论 以天然香菇菌多糖和茶叶多糖混合物为佐剂，对日本血吸虫重组质粒pVIVO2-IL12-Sj23的免疫效果有一定的增效作用。     

嗜异性抗体对以绵羊红细胞为载体的血吸虫病间接红细胞凝集试验结果的影响

已知绵羊红细胞表面存在嗜异性抗原,而血吸虫和其他寄生虫感染以及某些正常人血清中存在的嗜异性抗体能使绵羊红细胞发生凝集。本文就嗜异性抗体对以绵羊红细胞为载体的间接红细胞凝集试验(IHA)诊断血吸虫病结果的影响进行了探讨。 材料和方法 1 绵羊红细胞 取我校医学实验动物中心饲养的健康绵羊血,按1:2(V/V)置入血球保存液中,用pH7.2的磷酸缓冲液(PBS)洗5次,弃去上层白细胞,再用PBS配成1％的羊红细胞悬液。 2 致敏绵羊红细胞 按石佑恩等的方法用可溶性虫卵抗原致敏绵羊红细胞,用生理盐水配成     

泡球蚴感染BALB/c小鼠IgG亚类和细胞因子的动态观察

目的　观察小鼠感染泡球蚴后其体液免疫的动态变化。　方法　BALB/c小鼠感染泡球蚴后,分别于2、4、8、12、16、20及25wk(IgG含量达高峰)取脾脏制备淋巴细胞悬液体外培养,分别以多房棘球蚴抗原(EmAg)、伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激诱生可溶性白细胞介素2受体(IL2R)、肿瘤坏死因子α(TNFα)及白细胞介素1(IL1);以植物凝集素(PHA)刺激诱生干扰素γ(IFNγ)。检测培养上清中IL2R、TNFα、IL1及IFNγ含量。各组均设RPMI1640培养液平行对照。检测血清中一氧化氮(NO)及特异性免疫球蛋白G(IgG)亚类水平。　结果　小鼠感染泡球蚴16wk后NO水平明显升高,IgG、IgG1和IgG3水平升高,IgG2a及IgG2b呈低水平。感染后的前12wk,脾淋巴细胞以分泌IL2R和TNFα为主,12wk后以IFNγ为主、16wk后以IL1为主。　结论　小鼠感染泡球蚴后的前8wk呈Th1反应。感染后期Th2反应逐渐增强     

免疫印斑试验在血吸虫病现场诊断中的应用

本文报告用免疫印斑试验(immunoblot)以成虫31/32kD诊断蛋白检测52例血吸虫病患者血清抗体,结果阳性率为100％,而20例健康人均无反应。同时对肺吸虫病患者36例,旋毛虫病50例和囊虫病26例进行交叉反应测试,结果均无交叉反应出现.以免疫印斑试验与间接血凝试验(IHA)和酶免疫吸附试验(ELISA)对上述血清进行测试比较,结果后两种方法均出现不同程度的交叉反应,个别高达58.3％,显示了免疫印斑试验的优越性和诊断价值. 应用此法对流行区进行现场人群调查,136例中抗体阳性率为58.1％,对两项血清学检查均为阳性反应的65例,再进行粪检,结果24例虫卵阳性. 该法敏感、特异,重现性好,是一种新的血吸虫病血清学诊断方法,现将固相酶免疫试验常规法改进为微量法并制成试剂盒供基层使用。     

日本血吸虫成虫31/32 kDa蛋白的纯化及保护性免疫力的研究

本文采用制备型聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和电渗析方法分离纯化日本血吸虫成虫 31/32 kDa 蛋白(Sj 31/32蛋白)。SDS-PAGE、免疫印迹试验(EITB)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果表明采用该方法分离纯化的 Sj 31/32 蛋白纯度高,且具有较高的活性。用纯化的 Sj 31/32 蛋白加福氏佐剂免疫的小鼠,不仅可减少虫负荷(减虫率 28.1％),还可降低血吸虫成虫的产卵量(减卵率 71.4％),抑制虫卵肉芽肿的形成。结果提示:Sj 31/32 蛋白具有较高的减卵率,可望作为混合多价疫苗候选组分。     

日本血吸虫和曼氏血吸虫减毒尾蚴免疫小鼠淋巴细胞表型的动态

目的：宿主经照射减毒血吸虫尾蚴免疫后能获得显著的抗攻击感染的抵抗力。本文探讨紫外线减毒尾蚴免疫小鼠淋巴细胞表型的动态变化。方法：小鼠分别感染减毒日本血吸虫和曼氏血吸虫尾蚴（５００条／只），对照组分别感染两种正常尾蚴（２００条／只），免疫后第３、５、７、１０、１４和２１ｄ各组剖杀６－７只，摘取两侧腋窝淋巴结和脾脏分离细胞，采用双染色免疫荧光标记的单抗及ＦＡＣＳｃａｎ流式细胞仪进行细胞表型分析。结果：免疫小鼠腋窝淋巴结细胞总数增加，第１０ｄ达高峰，其中尤以Ｔ细胞显著，而Ｔ细胞总数增加主要是由于ＣＤ＋４Ｔ细胞的增加，而不是ＣＤ＋８Ｔ细胞。与对照组相比，免疫组的反应是非常显著。结论：ＣＤ＋４Ｔ细胞在紫外线减毒血吸虫疫苗保护性免疫机制中可能起重要作用。     

免疫印斑试验在血吸虫病现场诊断中的应用

本文报告采用免疫印斑试验(immuno-blot)以日本血吸虫成虫31/32KD诊断蛋白作抗原检测52例粪检虫卵阳性的血吸虫病患者血清抗体,结果阳性反应率为100％,而20例健康人均无反应。同时对确诊为肺吸虫病患者36例;旋毛虫病50例和囊虫病26例进行交叉反应测试,结果均无交叉反应出现。进一步以免疫印斑试验,间接血球凝集试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)三种方法对上述血清进行比较测试,结果后两种方法均出现不同程度的交叉反应,如用血吸虫卵抗原进行ELISA试验,对上述肺吸虫病,旋毛虫病