上调胰岛素样生长因子结合蛋白6基因对乳腺癌细胞 MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响*

目的：探究上调胰岛素样生长因子结合蛋白6（IGFBP-6）基因对乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞周期和凋 亡的影响。方法：体外培养人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞,转染IGFBP-6 过表达质粒,实时荧光定量PCR 法验证转染效率;流式细胞术检测转染IGFBP-6 后的细胞周期的改变及凋亡的情况;免疫印迹检测增殖细胞核抗 原（PCNA）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）、凋亡相关蛋白Bcl-2 和Bax 的蛋白表达水平。结果：IGFBP-6 转染 MDA-MB-231细胞后,IGFBP-6 的mRNA水平明显上调;PCNA、细胞周期蛋白D1 的表达水平明显降低;细胞 G1/S 期阻滞;凋亡细胞增多。结论：IGFBP-6 可以显著抑制乳腺癌细胞的增殖,促进细胞凋亡。     

ECE1过表达通过eNOS/NO通路促进AngⅡ诱导的体外培养大鼠心肌细胞肥大和凋亡

目的:探讨过表达内皮素转换酶1(ECE1)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的体外培养大鼠H9C2心肌细胞肥大和凋亡的影响.方法:采用AngⅡ作用于体外培养的H9C2心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型.将细胞分为空白对照组、AngⅡ组、AngⅡ+质粒空载体(AngⅡ+NC)组和AngⅡ+ECE1过表达组.CCK-8法检测细胞活...     

韦格纳氏肉芽肿治疗最新进展

韦格氏肉芽肿(WG)是一种病因不明的系统性疾病.临床特征是坏死性炎性肉芽肿,组织坏死,不同程度的中小血管病变.临床表现涉及上呼吸道、肺脏及肾脏病变.WG的诊断依据临床表现和实验室检查.如果患者出现典型的三联症上呼吸道症状、肺部症状和肾脏症状且ANCA阳性,不需要活检就能确诊.在最近几年,韦格内肉芽肿的治疗出现了一种降低剂量综合措施的新标准.通过两个阶段的治疗达到这些目标:诱导缓解阶段,及随后的维持缓解阶段.在诱导阶段,目前短疗程联合应用糖皮质激素和环磷酰胺.在诱导病情缓解成功后,治疗的核心转向维持阶段即糖皮质激素减量期.     

中药血清药理学研究方法探讨与思考

中药血清药理学是指将中药或中药复方经口给动物灌服一定时间后采集动物血液,分离血清,用含有药物成分的血清进行体外实验的一种实验技术。1988年日本学者田真代一^[1]提出了血清药理学的概念和实验方法。国内20世纪90年代初开始探索,近10年来此法越来越多地应用于中药药理的研究。     

细辛含药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响

目的：研究中药细辛含药血清对大鼠心肌细胞钠通道的影响,从离子通道水平揭示细辛抗缓慢型心律失常作用的可能机制。方法：用原代培养方法获得单个心肌细胞,用全细胞膜片钳技术记录心肌细胞加入含药血清前后钠通道电流的变化。结果：25%细辛含药血清对钠通道的激活曲线、I-V曲线均有影响。结论：细辛含药血清对心肌细胞钠通道电流有增强作用。     

表面活性剂协同微波辅助提取芹菜叶总黄酮的研究

目的:考察表面活性剂协同微波提取芹菜叶黄酮的工艺。方法:通过单因素试验和正交试验,确定最佳提取条件。结果:最佳提取工艺条件:以质量分数为1.0%的十二烷基硫酸铵为提取剂,料液比为1:50,微波功率为中高火,提取时间为1 min。结论:本方法大大提高了芹菜叶黄酮的提取率。     

护士对肿瘤化疗药物的防护

肿瘤化疗药物在临床中应用非常广泛,它能治癌,同时在操作中也对操作者和环境造成不利影响。目前我国对抗肿瘤化疗药物缺乏规范的管理,对化疗药物的防护设备较少,操作人员缺少必要的防护用具,并存在对抗肿瘤药物废弃物管理不善等一系列问题,这对医院环境及护士的健康构成了威胁。如何在满足临床需求的同时,寻求对策,最大限度地降低护士职业暴露危害是一个迫切需要解决的问题。     

双胎之一胎死宫内病因分析与处理

随着辅助生殖技术广泛开展，双胎妊娠的发生率越来越高，使双胎妊娠中一胎死亡的报道逐渐增多，期待疗法与及时终止妊娠，以获得最佳的妊娠结局。本文就我院12例双胎之一胎死宫内病因进行分析，以探讨死胎的原因及进行期待疗法的探讨。     

大鼠视网膜光损伤模型的行为观察

目的　进行可见光照射所致大鼠视网膜光性损伤后的行为测试 ,探讨动物视功能与行为的关系。方法　 2 1只SD大鼠在 (95 0± 5 0 )lx绿色光损伤仪光照 3、12、2 4h ,实验前及实验后暗适应 2 4h ,光损伤前 2d及光损伤后 2d测定大鼠的头部视动跟踪反应、前置刺激反应。光损伤后 72h摘除眼球 ,冰冻切片后行HE、Rhodopsin免疫荧光染色 ,光镜观察。实验对照组为 7只双眼球摘除术后的大鼠。结果　随着光照时间的延长 ,动物的头部视动跟踪反应逐渐丧失 ,对照组反应最弱 ,前置刺激反应逐渐增强 ,对照组反应最强。结论　不同程度的视细胞损伤后的动物行为是不同的 ,随着损伤程度的加重 ,动物的行为呈现与之相适应的变化     

二甲双胍通过改善自噬功能障碍保护多柔比星诱导的心肌细胞损伤

目的 探讨二甲双胍(metformin,Met)保护DOX诱导的心肌损伤的作用机制。方法 ①H9C2细胞经0.1~10 mmol·L^-1Met预处理后加入1 μmol·L^-1 DOX处理24 h,MTT法检测细胞存活率,Annexin V-PI染色后流式细胞技术检测细胞凋亡率,使用ROS试剂盒检测细胞内ROS蓄积情况;②使用Western blotting检测0.1,0.3,3 mmol·L^-1 Met对DOX激活自噬水平的调节作用,并使用25 μmol·L^-1 AG-126考察ERK信号通路调节DOX诱导心肌细胞损伤中的作用;③10 nmol·L^-1 BafA1用于探索Met恢复DOX阻断心肌细胞自噬流的研究,流式细胞技术检测吖啶橙细胞内溶酶体pH的变化。结果 DOX(1 μmol·L^-1)的接触会使H9C2细胞的存活率显著下降(P<0.05),同时心肌细胞内ROS累积增加(P<0.05),凋亡细胞比例升高(P<0.05),不同浓度的Met可以有效缓解DOX升高的H9C2细胞内ROS和凋亡细胞比率(P<0.05),从而增加心肌细胞存活率(P<0.05)。DOX(1 μmol·L^-1)处理H9C2细胞6 h能够有效激活细胞自噬,损伤心肌细胞。通过AG-126干预可知,DOX诱导的心肌细胞自噬与ERK分子的激活相关,3 mmol·L^-1 Met可以下调ERK的磷酸化水平(P<0.05),从而降低DOX诱导的心肌细胞自噬。吖啶橙染色和Western blotting结果显示,与自噬流阻断剂BafA1处理的H9C2细胞比较,DOX同样增加H9C2细胞内溶酶体pH(P<0.05),使心肌细胞自噬功能异常,增加细胞凋亡程度。结论 DOX损伤心肌细胞是通过上调自噬水平并诱发自噬功能障碍引起心肌细胞凋亡,Met下调ERK磷酸化水平,缓解DOX破坏的心肌细胞自噬障碍,保护心肌细胞免受DOX诱导的伤害。