仙茅多糖对巨噬细胞分泌几种活性因子的影响

目的:观察仙茅多糖对体外培养的巨噬细胞分泌几种活性因子的影响,以期探索仙茅多糖活化巨噬细胞的部分机制。方法:将仙茅多糖体外与RAW264.7巨噬细胞共同培养36h,ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1的含量,Griess比色法检测培养上清中NO的含量。结果:与空白对照组比较,仙茅多糖高、中剂量组TNF-α、IL-1和NO等活性因子的水平明显升高(P0.05或P0.01),且与阳性对照组的调节趋势相似。结论:仙茅多糖刺激巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1和NO等活性因子可能是其活化巨噬细胞的重要机制。     

巨噬细胞甘露糖受体模型的初步建立及其在中药复方筛选中的应用

目的:建立巨噬细胞甘露糖受体(MMR)模型,用于筛选中药中以甘露糖受体(MR)为靶标的活性物质.方法:将小鼠腹腔臣噬细胞分别与不同浓度的D-甘露糖和D-半乳糖共孵,用流式细胞仪和荧光显微镜检测D-甘露糖和D-半乳糖对Mψ结合算硫氰酸荧光素标记的甘露糖化牛血清白蛋白(M-FITC-BSA)的拮抗作用,优化实验条件,建立MMR筛选模型;将上述模型用于筛选四物汤等6个复方多糖中的MR结合成分.结果:两种检测方法均显示:随D-甘露糖浓度的上升,M-FITC-BSA标记的Mψ检出率逐步下降(P＜0.01),而这种现象在D-半乳糖组中未观察到;当D-甘露糖达到0.080mmol/L浓度时,便能明显拮抗Mψ结合M-FITC-BSA(P＜0.05或P＜0.01).复方多糖的筛选结果显示:在一定浓度下,四君子汤、六味地黄汤和玉屏风散多糖组分能明显拮抗小鼠腹腔Mψ与M-FITC-BSA的结合,且具有浓度组间差异性(P＜0.05或P＜0.01).结论:MMR模型对MR结合成分的筛选作用稳定而敏感,用于中药MR结合物的筛选,对快速筛选中药免疫调节成分、研究中药免疫调节机制具有重要意义.     

黄连解毒汤对小鼠T细胞组成及肠粘膜中细胞因子表达的影响

目的:探讨黄连解毒汤对KM小鼠T细胞组成及肠粘膜中细胞因子表达的影响。方法:用黄连解毒汤灌胃小鼠7d和14d后分别采集相关样本,ELISA法测定小鼠回盲段肠粘液中sIgA、IL-6及IL-22表达水平;流式细胞仪检测小鼠脾脏中CD3~+T、CD4~+T和CD8~+T含量。结果:与空白组相比,黄连解毒汤给药组CD3~+T含量明显升高,CD4~+T和CD8~+T含量则明显降低,灌胃7d与14d对于给药组CD3~+T、CD4~+T和CD8~+T含量无明显变化;黄连解毒汤给药组sIgA浓度明显升高,IL-6含量则明显降低,灌胃7d与14d对于给药组sIgA含量无明显变化,IL-6变化不明显,IL-22于7d升高而于14d降低,具有极显著差异(P0.01)。结论:黄连解毒汤能促进CD3~+T和sIgA分泌,抑制CD4~+T、CD8~+T和IL-6分泌和表达,对IL-22的表达则具有先促进后抑制的作用。     

大黄对大鼠肠道菌群的影响

目的:观察大黄对大鼠肠道菌群的影响,以积累大黄在临床实践中合理使用的数据.方法:对普通大鼠分别灌予低、中、高剂量的大黄,分别在连续给药时间7、14和21天等时间点收集大鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠等肠段(含肠内容物)样本,然后通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测各肠段大肠杆菌、乳酸菌、拟杆菌和梭菌等4种肠道...     

巨噬细胞甘露糖受体结合物筛选模型的初步建立

目的建立巨噬细胞甘露糖受体(MMR)结合物筛选模型,用于筛选以甘露糖受体(MR)为靶标的潜在活性物质。方法将小鼠腹腔巨噬细胞分别与不同浓度的D-甘露糖和D-半乳糖共孵,用流式细胞仪和荧光显微镜检测D-甘露糖和D-半乳糖对Mφ结合异硫氰酸荧光素标记的甘露糖化牛血清白蛋白(M-FITC-BSA)的拮抗作用,优化实验条件,建立MMR筛选模型。结果两种检测方法均显示:随D-甘露糖浓度的上升,M-FITC-BSA标记的Mφ检出率逐步下降(P<0.01),而这种现象在D-半乳糖组中未观察到;当D-甘露糖达到0.080mmol.L-1浓度时,便能明显拮抗Mφ结合M-FITC-BSA(P<0.05或P<0.01)。中药多糖的筛选结果显示:在一定浓度下,黄芪、白术、防风、大枣等中药多糖组分能浓度依赖性地拮抗小鼠腹腔Mφ与M-FITC-BSA的结合(P<0.05或P<0.01)。结论MMR模型对MR结合成分的筛选作用稳定而敏感,对快速筛选中药免疫调节成分、研究中药免疫调节机制具有重要意义。     

合欢皮总皂甙对小鼠NK细胞杀伤活性的影响

使用LDH(乳酸脱氢酶 )释放法 ,测定合欢皮总皂甙对小鼠NK细胞杀伤活性的影响 ,进而探讨合欢皮免疫活性成分及其抗肿瘤机制。结果 :合欢皮总皂甙能明显提高小鼠NK细胞的杀伤活性 (p <0 0 5或p <0 0 1 ) ,且具有剂量差异性 ,揭示合欢皮总皂甙是合欢皮的重要免疫活性成分 ,合欢皮体内抗肿瘤机制与此密切相关。     

大建中汤调控小胶质细胞自噬治疗腹泻型肠易激综合征内脏痛和抑郁症共病的作用机制

目的 探讨大建中汤治疗腹泻型肠易激综合征内脏痛和抑郁症共病的作用机制。方法 采用慢性不可预知性刺激加葡聚糖硫酸钠方法建立腹泻型肠易激综合征内脏痛和抑郁症共病大鼠模型。大鼠随意分为正常对照组、模型组、大建中汤组[10.8 g/(kg·d)]、氟西汀组[0.01 g/(kg·d)]。治疗14 d后,采用强迫游泳评估各组大鼠的抑郁状况,腹壁撤退反应(AWR)评估各组大鼠肠道痛觉敏感性,酶联免疫吸附法检测各组大鼠前扣带回皮质(ACC)中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-10、IL-4表达;蛋白质印迹法检测ACC区髓鞘脂蛋白(PLP)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)、髓鞘碱性蛋白(MBP)及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、p62、Beclin-1,以及小胶质细胞相关蛋白精氨酸酶1(Arg1)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达;免疫荧光双标法观察ACC区自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和MG离子钙结合衔接分子1(Iba1)共表达情况。结果 与正常组大鼠相比,共病大鼠强迫游泳时间减少(P<0.01),不动时间增加(P<0.01),在20、40、60 m...     

葛根芩连汤对菌群失调性腹泻大鼠模型结肠组织PINK1/Parkin表达的影响

目的 通过观察葛根芩连汤(GQT)对菌群失调性腹泻大鼠模型动物结肠组织PINK1/Parkin表达水平的影响,探讨GQT治疗腹泻的作用机制。方法 180只SPF级SD大鼠(雌雄各半)随机分为空白组(30只)和造模组(150只),造模组采用复合抗生素灌胃法建立菌群失调性腹泻大鼠模型。模型成功后将造模组随机分为5组,即模型组、丽珠肠乐组、GQT高、中、低剂量组,30只/组。GQT高、中、低剂量组分别按7.02,3.51,1.755 g·kg^-1,丽珠肠乐按0.125 g·kg^-1灌胃,1次/d,连续21 d,模型组和空白组给予蒸馏水灌服,各组灌胃体积均为10 mL/kg。分别在治疗后7、14、21 d进行样本采集。应用荧光定量PCR技术(RT-PCR)及免疫组化法(IHC)分析结肠组织PINK1/Parkin相对表达水平;应用免疫印迹法(WB)法检测P62、LC3Ⅰ和LC3Ⅱ蛋白表达。结果 综合模型大鼠粪便、临床症状及电镜观察结果表明本次造模验证成功。RT-PCR分析PINK1和Parkin mRNA表达结果表明,模型组大鼠基因表达较空白组显著升...     

麻杏石甘汤颗粒汤剂与传统汤剂间抑菌作用的比较研究

目的:麻杏石甘汤配方颗粒汤剂及其传统复方汤剂间抑菌作用的比较。方法:采用试管法比较不同制备方法的复方汤剂间抑菌作用。结果:麻杏石甘汤传统复方汤剂以及麻杏石甘汤颗粒汤剂对金黄色葡萄球菌等细菌均具有较强的抗菌作用。结论:两种汤剂的抑菌作用相近。     

以专业认证为契机在病原生物与免疫学教学中进行形成性评价探讨

专业认证是国际通行的高等教育质量互认的主要依据.通过认证的学校,学历将在全球范围内互认.教育部高等学校中医学教学指导委员会受教育部的委托,于2007年开始组织相关专家制订《本科医学教育标准——中医学专业》,并探索建立中医学专业认证模式.2013年1月,教育部、国家中医药管理局联合颁布了《本科医学教育标准——中医学专业(暂行)》(以下简称《标准》),并构建了符合我国高等教育与医学教育规律的,具有中医学特色的中医学专业认证模式,完善了中医药高等教育质量保障体系,有效推动专业建设的科学、可持续发展.