人红细胞胰岛素受体自身磷酸化的酶联免疫吸附测定

目的建立人红细胞胰岛素受体自身磷酸化测定法。方法应用合成的磷酸酪氨酸钥孔帽贝血蓝蛋白（ＰＹＫＬＨ）免疫家兔得到抗血清，将纯化的抗磷酸酪氨酸抗体作为第一抗体，羊抗兔Ｉｇ酶结合物（辣根过氧化物酶标记）作为第二抗体，建立双抗体夹心酶联免疫吸附测定法。结果批内变异系数为８．４％，批间变异系数为９．０％。２０例健康人的红细胞ＩＲ的自身磷酸化活性，测定值为０．１５０±０．０２２ｎｍｏｌＰＹ／ｍｇ受体蛋白。在体外，胰岛素在１０－６ｍｏｌ／Ｌ时对自身磷酸化达到最大激活。结论用酶免法测定人红细胞胰岛素受体灵敏、特异、简便，为胰岛素作用机制的理论研究、胰岛素受体基因突变的检测和糖尿病及其它胰岛素抵抗综合症的病因及治疗的探讨提供了有效的方法。     

甲状腺过氧化物酶抗体在自身免疫性甲状腺疾病中的表现

甲状腺功能亢进（甲亢）、甲状腺功能低下（甲低）和亚临床甲低患者甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体（TGAb）和甲状腺微粒体抗体（TMAb）的阳性率和阳性患者的抗体水平均高于正常对照组，TPOAb阳性率在各组中又明显高于同组的TGAb和TMAb阳性率。甲状腺功能恢复正常的复诊组TPOAb阳性患者的抗体水平明显低于甲亢组、甲低组和亚临床甲低组。提示TPOAb对自身免疫性甲状腺疾病的诊断、治疗及预后评估具有一定的临床意义。     

纸片法人促甲状腺激素(h-TSH)放免测定在临床中的应用

干血点滤纸片 h-TSH 放免测定法具有方法简单、采血量少,样品易保存及运输等优点,本文在自己建立的方法基础上进一步观察纸片法在正常及病理人群中的 TSH 水平及 TRH 兴奋试验的检测结果,与血清法相比以观察纸片法的科学性及可靠性。一、材料和方法(一)材料:1.PB 温育液,含0.4%牛血清白蛋白(BSA)-0.06M EDTA-Na(乙二胺四乙酸钠)-0.01MPB(磷酸盐缓冲液)pH7.6,2.PB     

雌激素对诱发自身免疫性甲状腺炎影响的实验研究

目的自身免疫性甲状腺疾病(autoimmune thyroid disease,AITD)的发病,女性多于男性,育龄期女性对AITD的易感性更高于男性,存在明显的性别差异.本文研究女性激素中的雌激素对诱发实验性自身免疫性甲状腺炎(experiment autoimmune thyroiditis,EAT)形成的影响,探讨雌激素在AITD发病机制中的作用.方法选用Wistar大鼠,雌性,10周龄.大鼠随机分为4组①切除大鼠的双侧全部卵巢(OVX),高碘(HI)饮食喂养,诱发EAT为OVX-HI-EAT组;③高碘饮食喂养,诱发EAT为HI-EAT组;③高碘饮食对照组(HI组);④适碘饮食正常对照组(NI组).适碘饮食是用低碘饲料(碘含量≤35μg/kg)加适碘水(含KI为0.3 mg/L)喂养,高碘饮食用低碘饲料加高碘水(含KI为15mg/l)喂养,EAT的诱发采用同种属不同品系的SD大鼠甲状腺球蛋白(Tg)加完全福氏佐剂(complete freund's adjuvant)免疫Wistar大鼠(Tg每次1 mg,每周2次,共3次),诱发EAT的形成,末次免疫的4周后,处死全部大鼠.各组均检测血清中雌二醇(Eα-17β)和泌乳素(PRL)水平,观察甲状腺组织炎细胞浸润程度和炎症反应,测定血清Tg抗体水平.并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测甲状腺组织中干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-10(IL-10)mRNA的表达水平.结果去卵巢高碘饮食诱发EAT(OVX-HI-EAT)组大鼠血清中E2-17β(17.60±1.03)pmol/L和PRL(2.45±0.15)μg/L水平均明显低于未切除卵巢的高碘饮食诱发EAT(HI-EAT)组、高碘饮食(HI)组和适碘饮食对照(NI)组,P＜0.01.OVX-HI EAT组诱发EAT的发病率和甲状腺的炎细胞浸润程度(10例中,甲状腺炎细胞浸润1例为"++",5例为"+")明显低于HIEAT组(8例中甲状腺炎细胞浸润5例为"++",2例为"+").甲状腺组织中Th1细胞因子IFN-γmRNA的表达水平,OVX-HI-EAT组为0.87±0.03(细胞因子/β-actin)低于HI-EAT组(0.99±0.002),P＜0.05.OVX-HI-EAT组Th2细胞因子与IL-10mRNA的表达水平为0.98±0.009(细胞因子/β-actin)高于HI-EAT组(0.83±0.05),P＜0.05.诱发EAT大鼠血清中Tg自身抗体的水平明显高于未诱发EAT组大鼠.结论雌激素水平低下可减少或缓解EAT的发病率和甲状腺的炎症反应,高水平雌激素是构成女性对AITD易感的重要因素,雌激素水平低下致Th1细胞偏于Th2细胞可能是EAT发病率和甲状腺炎症反应得以缓解的主要机制.     

补体系统蛋白的测定特点和结果判断

补体系统蛋白是11种补体成分和交替途径的各种因子及抑制因子等20多种蛋白所构成的反应系统。近年,对各种疾病的患者血清进行了补体效价。各成分的溶血活性以及补体蛋白定量的测定,特别是应用荧光抗体法检查组织中局部存在的补体蛋白。并用于研究疾病发生的免疫学机理和疾病的诊断及病程的判断。一、补体系统蛋白的定量法补体的各成分,交替途径的各因子和补体的抑制物(Inactivator),均是蛋白质。它     

免疫缺陷和呼吸道感染

小儿呼吸道感染在日常诊断治疗中占有重要位置。但是,随着防治方法的进步,呼吸道感染的内容已发生很大的变化。其理由之一就是抗生素的进步。无潜在疾病的健康小儿其细菌性感染较易治愈,但并不意味这些感染容易控制,例如对抗生素敏感的细菌,引起感染减少,相反,对抗生素不敏感的细菌、弱毒性细菌、或真菌引起感染的比例相对增加;而且这些感染,由某些原因造成防御功能下降而造成的显性感染比无潜在疾病者为多。因此,这类患儿的感染,一方面用一般抗生素治疗效果不佳,另方面又因有宿主的不良因素,所以很难控制。宿主方面的因素主要是原发性和继发性免疫缺陷。在免疫缺陷的感染疾病中,呼吸道感染将占很大比例,是今后感染治疗中的一大课题。     

糖皮质激素升高因子在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用

目的：观察外周血中糖皮质激素升高因子（GIFs）水平在GIF-HPA反馈回路及实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）形成中的作用,探讨AITD发病机理。方法：采用EAT易感的Lewis大鼠和非易感的Wistar大鼠,均用Tg免疫诱发EAT形成,观察免疫后不同时间（初次抗原免疫后3～4小时和8～12小时及EAT形成时）,其甲状腺组织炎症反应和血清中皮质醇、GIFs（IL-1β,IL-6）和TPOAb水平。结果：诱发EAT的Lewis大鼠甲状腺炎发病率及甲状腺炎细胞浸润程度,均明显重于Wistar大鼠。Tg免疫后3～4小时,Lewis大鼠血清中皮质醇水平呈轻度升高,而Wistar大鼠明显升高。两种大鼠血清中GIFs（IL-1β,IL-6）水平动态变化与各自皮质醇水平的变化类似,免疫后Wistar大鼠血清中两种细胞因子水平的升高水平均明显高于Lewis大鼠。免疫后（3～4小时组除外）Lewis大鼠血清中TPOAb水平明显高于Wistar大鼠。结论：可以认为个体免疫应答生成的IL-1β、IL-6等细胞因子水平会影响GIF-HPA反馈回路,其异常反应也是构成AITD发病的因素。     

雷帕霉素纳米粒滴眼液联合环孢素A缓释膜治疗兔高危角膜移植术后免疫排斥反应的研究

Objective To evaluate the combined effect of topical rapamycin (RAPA) eye drop in nanometer vector and poly (lactic acid) (PLA) wafers of cyclospoirne A(CsA) in the prevention of acute allograft rejection after rabbit corneal transplantation. Methods It was an experimental study. RAPA was incorporated into the nanometer particles and CsA was incorporated into PLA wafers. A was syngeneic control whose both donor and recipient are New Zealand rabbit. Gray donor corneas were implanted into the 102 recipients of New Zealand albino rabbits with corneal neovascularization who were randomly divided into B, C, D, E, F, G 6 groups to receive the different types of therapy: B was no therapy control; C was eye drop of nanometer vector but no RAPA twice a day,28 days; D was PLA wafers in the anterior chamber of rabbit eyes but no drugs; E was 0.5% RAPA eye drop of nanometer vector twice a day,28 days; F was PLA wafers of CsA in the anterior chamber of rabbit eyes; G was PLA wafers of CsA in the anterior chamber of rabbit eyes and 0.5% RAPA eye drop of nanometer vector eye drop twice a day for 28 days together. Postoperative evaluation included slit-lamp biomicroscopy, histopathology and immunohistoiogy, Cytokines related with neovascularization and immunosuppression in the corneal tissue by RT-PCR. The graft survival was assessed by One-Way ANOVA and q test. Results Corneal allograft survival time: A (100.00±0.00), B ( 8.44±1.24), C (8.89±2.57), D (8.56±2.30), E (43.11±5.58), F (43.67±9.54), G (72.00±15.34)d. Group G led to a statistically significant prolongation of transplant survival and was superior than group E and F which was a statistical prolongation compared with group B, C and D (qGE=11.42, qGF=11.24,qEB=13.64, qEC=13.38, q<=13.46, qFB=13. 82, qFC=13.56, qFD=13.64; P<0.01). Immunohistopathologically, the grafts were subjected to an immune response contained a dense infiltrate of neutorphils,CD4+ and CD8+ T lymphocytes in the group B ,C and D. This cellular infiltrate was a significant reduction in group E,F,G. RT-PCR showed that the gene expression of IL-2 was inhibited earlier (3 days) in group F, G and VEGF gene expression being suppressed later (14 days) in group E, G. Conclusions Combined therapy with topical application of RAPA eye drop of nanometer vector and CsA PLA wafers can significantly prolong the survival of allograft at high-risk. Moreover, topical combined treatment of them is more effective, lower dosage, less side-effects and cheaper than the treatment with topical individual immunosuppressive drug.