HLA-A/B、DR抗原的基因配型对穿透性角膜移植免疫排斥反应影响的研究

目的 探讨HLA-A/B、DR抗原的基因配型对穿透性角膜移植术后免疫排斥的影响。设计实验研究。研究对象北京同仁医院穿透性角膜移植角膜供受体材料150对。方法 回顾角膜供受体的基本信息、免疫排斥反应发生情况、可能引起排斥反应的高危因素。对供体角膜环和受体病变组织采用多聚酶链式反应-序列特异性引物(PCR-SS)法进行HLA-A/B、DR抗原的基因检测及配型。根据供体与受体HLA配型是否一致分为配型符合组及配型不符合组。采用χ²检验对组间排斥反应率进行比较。采用Logistic回归分析基因配型及其他相关危险因素对发生排斥反应的发生风险。主要指标不同HLA抗原基因配型的排斥反应发生率;发生排斥反应的OR值。结果 150对角膜组织中HLA-A/B配型符合组64例,3例(4.69%)发生免疫排斥反应;配型不符合组86例中23例(33.72%)发生排斥反应(χ²=18.430,P<0.001)。HLA-DR配型符合组34例,9例(25.71%)发生免疫排斥反应,配型不符合组115例,23例(20%)发生免疫排斥反应(χ²=0....     

尤文肉瘤EWS-FLI1蛋白HLA-A2.1限制性CTL表位的预测、筛选及鉴定

目的预测、筛选及合成尤文肉瘤EWS-FLI1蛋白HLA-A2.1限制性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T Lymphocyte,CTL)表位,初步鉴定EWS-FLI1表位肽。方法综合运用BIMAS、SYFPEITHI、Predep和IEDB方案对EWS-FLI1蛋白进行HLA-A~*0201限制性CTL表位的预测,应用多项式方案、量化基序方案对预测的CTL表位进行筛选,并将筛选的CTL表位与HLA-A~*0201分子进行动力学模拟,应用标准Fmoc方案合成CTL表位肽;通过表位多肽刺激CTL释放颗粒溶素的检测,以及靶细胞杀伤实验验证表位多肽的免疫效应。结果综合预测得出了8个可能的表位肽,进一步筛选确定其中4个肽为候选合成表位,应用分子动力模拟初步验证了4个候选表位肽与HLA-A2.1分子的结合力,合成的各条肽经色谱分析纯度均在98%以上,经质谱分析各肽的分子量测定值与理论值相符,颗粒溶素释放实验及靶细胞杀伤实验证实了筛选的表位均能产生刺激效应,其中,表位肽QIQLWQFLL(EWS-FLI1 304)的刺激效应最为显著。结论综合运用多个方案可提高预测效率,分子动力学模拟可初步验证表位肽与HLA-A~*0201的结合力,所合成的多肽为高纯度肽,通过免疫学实验初步鉴定了EWS-FLI1的表位。     

抗生素敏感试验的自动化及其评价

医院感染日益突出和耐药菌株不断增加，使抗生素敏感试验及其结果的快速、准确已成为临床的迫切需要。20世纪60年代后期抗生素敏感试验自动化系统进入临床，至80到90年代发展飞跃，并广泛用于临床。从测试基本方法可分为：(1)抗生素纸片扩散系统；(2)琼脂稀释试验系统；(3)微量肉汤……     

B超引导下灌肠复位治疗小儿急性肠套叠136例疗效分析

目的探讨B超下水压灌肠诊治肠套叠的效果。方法自制简易灌肠器，用输液架与B超诊断床的相应高度代替压力装置，对136例急性肠套叠患儿进行B超引导下水灌肠。结果本组136例，水灌肠复位成功124例，12例中转手术治愈。结论B超引导下水压灌肠可作为肠套叠复位治疗的首选方法。     

后外侧和腋下保留胸肌切口在肺癌根治术中的应用比较

目的:探讨并比较保留胸肌后外侧切口(muscle-sparing postero-lateral thoracotomy,MPT)和腋下弧形保留胸肌切口(muscle-sparing curve axillary thoracotomy,MCAT)应用于肺癌标准肺叶/全肺切除术+纵隔淋巴结清扫术的手术彻底性以及对术后生存质量的影响.方法:2004年1月至2008年12月,共有234例可手术非小细胞肺癌患者在本手术组接受标准的肺叶/全肺切除术+肺门纵隔淋巴结清扫术,其中169例接受MCAT(MCAT组),其余65例接受MPT(MPT组).观察不同切口对术后肺部感染和切口并发症的影响,比较清扫纵隔淋巴结数,评价术后上肢早期情况和患者术后3个月切口相关症状.结果:两组清扫纵隔淋巴结数相近,分别为14.27枚和15.69枚.MCAT组有18例患者出现血清肿.所有的MPT患者均出现切口红肿现象.术后第1天术侧上肢活动范围MCAT组优于MPT组(154例vs 7例).术后两组诉切口疼痛的人数相似,但MCAT组VAS评分低于MPT组[1个月时(1.07±0.355)vs(3.55±1.150);3个月时(0.96±0.228)vs(1.75±1.030)].结论:MCAT在手术的彻底性上与MPT相似,均能满意地完成肺叶/全肺切除术和纵隔淋巴结清扫.MCAT组术后早期阶段上肢活动能力和术后3个月时慢性疼痛优于MPT组.推荐MCAT为肺癌手术标准切口.     

电视腹腔镜下输卵管吻合手术治疗输卵管部分梗阻性不孕(附7例报道并文献复习)

目的探讨腹腔镜下进行输卵管部分炎症性梗阻吻合的具体方法。方法利用电视腹腔镜5mm器械、三切口的微创腹腔镜方法,对3例输卵管妊娠手术后患侧阻塞患者以及4例继发性不孕患者经子宫输卵管碘油造影显示伴有一侧或双侧输卵管病变患者行双层6/0尼龙线内缝吻合输卵管,其手术平均时间为63.6min。结果7例患者手术后通水均示通畅,5例患侧进行修复的输卵管经输卵管子宫碘油造影术显示均通畅,并且获得宫内妊娠3例,足月分娩1例。结论电视腹腔镜下采用显微吻合手术对输卵管局部炎症梗阻进行治疗,有助获得妊娠。     

腹腔镜下卵巢子宫内膜异位囊肿剔出术

应用电视腹腔镜手术治疗卵巢子宫内膜异位囊肿７２例,所有病例均行子宫内膜异位囊肿剔出术,全部在电视腹腔镜下完成,无１例中转开腹,无严重并发症发生。对其中３８例合并不孕患者术后随访６～４０个月,术后妊娠率为４７．４％。说明电视腹腔镜手术诊治子宫内膜异位囊肿,能完成剖腹手术所能进行的手术操作并达到相应疗效,且具有损伤小、术后病人恢复快的优点。     

基于追踪方法学的静脉用药集中调配质量管理

目的 探讨利用追踪方法学发掘成品输液在院内流转过程中被忽视的质量问题和关键影响因素的可行性,促进静脉用药集中调配质量管理的持续改进。方法 借鉴国内外运用追踪方法学管理静脉用药的工作经验,设计医院静脉用药集中调配工作模式的追踪地图。结果 追踪方法学在静脉用药集中调配工作中的应用可以有效提升成品输液质量。结论 追踪方法学作为一个有完整理论基础和系统操作规范的现场调查方法,应用于静脉用药调配中心质量管理工作,体现出诸多优势,并能与其他质量管理工具合成化应运用。     

全基因组关联分析在消化系肿瘤中的研究进展

全基因组关联分析(genome-wide association study,GWAS)是应用人类基因组中单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)为标记进行分析,以期发现影响复杂性疾病发生的遗传特征的一种新策略.因其可在全基因组范围内进行整体研究,能够一次性对疾病与基因的关联进行轮廓性概览,所以在过去的5年中,全基因组关联研究方法已被证明是研究复杂疾病一种有效手段.近年,各国科学家运用全基因组关联分析在人类肿瘤,特别是在消化系肿瘤的研究中取得了一系列重要的研究成果,本文将综述消化系肿瘤GWAS研究进展,并展望GWAS所面临的挑战及可能的解决策略.     

基于代谢组学技术研究绞股蓝总皂苷抑制tau蛋白过表达诱导的细胞损伤机制

目的 研究绞股蓝总皂苷(GPs)对tau蛋白过表达细胞代谢的影响,探讨GPs治疗阿尔茨海默病(AD)的机制。方法 通过采用CRISPR/Cas9技术构建微管相关蛋白tau (MAPT)过表达N2a细胞系(MAPT细胞);用CCK-8法检测GPs对N2a、MAPT细胞存活率的影响;体外培养N2a (对照组)、MAPT细胞(模型组),向MAPT细胞中加入GPs (50、100 μg·mL^-1)进行干预,共同孵育24 h后收集细胞,采用Western blotting技术检测总tau蛋白量水平;利用代谢组学技术检测GPs对MAPT细胞内源性代谢产物的影响,明确差异代谢产物及通路。结果 50、100、200 μg·mL^-1 GPs对N2a细胞活力无明显影响;5、50、100、200 μg·mL^-1 GPs对MAPT细胞活力无显著性影响;与对照组相比,MAPT细胞内tau蛋白水平明显增加(P<0.001);与模型组比较,50 μg·mL^-1 GPs可明显减少MAPT细胞内总tau蛋白含量(P<0.05);代谢组学结果显示,按照差异代谢产物数量占比从高到底依次为脂质和类脂分子,有机酸及其衍生物,核苷、核苷酸和类似物等。通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,差异代谢产物主要富集在核苷酸代谢、氨基酸合成、甘油磷脂代谢等通路。与模型组比较,给药后参与甘油磷脂代谢通路的胞磷胆碱和磷脂酰胆碱水平显著增加(P<0.001),甘油磷酰胆碱、甘油-3-磷乙醇胺水平显著降低(P<0.001)。结论 GPs可以减少细胞内tau蛋白的异常过表达,通过增加胞磷胆碱和磷脂酰胆碱水平、减少甘油磷酰胆碱和甘油-3-磷乙醇胺水平调控甘油磷脂代谢通路。