美罗培南对 las/rhl 基因 缺陷型 铜绿假单胞菌早期生物膜的作用

 目的 研究美罗培南 （ meropenem , MEM ）对铜绿假单胞菌 PAO1 野生型 及其 PAO1 <>lasI rhlI 、 PAO1 <>lasR rhlR 基因缺陷型菌株早期生物膜的作用。 方法 ① 测定 美罗培南 对铜绿假单胞菌 PAO1 野生型 及其 PAO1 <>lasI rhlI 和 PAO1 <>lasR rhlR 基因缺陷型菌株的最低抑菌浓度（ MIC ）和最低杀菌浓度（ MBC ）。②采用生理盐水 - 吸痰管系统进行铜绿假单胞菌 PAO1 野生型、 PAO1 <>lasI rhlI 和 PAO1 <>lasR rhlR 基因缺陷型 体外生物膜培养 3 d 后 , 用 26 m g·L^-1 的美罗培南溶液作用 24 h , 然 后 用扫描电子显微镜观察 生物膜 的情况。 结果 ① PAO1 野生型, PAO1<> lasI rhlI 基因缺陷型和 PAO1<> lasR rhlR 基因缺陷型 3 种铜绿假单胞菌菌株对 MEM 的 MIC 均为 1 m g·L^-1 , MBC 均为 2 m g·L^-1 。 ② 3 d 后 PAO1 野生型形成较厚、有孔状通道的生物膜,而 lasI rhlI 和 lasR rhlR 基因缺陷型菌株形成结构较简单的薄片状的早期生物膜结构;美罗培南作用后, PAO1 野生型的生物膜结构明显稀薄,而 PAO1 <>lasI rhlI 、 PAO1 <>lasR rhlR 基因缺陷型的片状生物膜结构基本被破坏,剩下散在的碎片状结构。 结论 铜绿假单胞菌的 <> las 、 <> rhl 基因可影响铜绿假单胞菌早期生物膜的形成及其对美罗培南的敏感性。     

铜绿假单胞菌QS系统缺陷对生物膜形成及大鼠肺部慢性感染的影响

目的研究lasI rhlI基因缺陷对铜绿假单胞菌体外生物膜形成的影响;观察铜绿假单胞菌PAO1野生型及其群体感应系统的lasI rhlI基因缺陷型菌株人工生物膜致病性的差异,了解群感应系统的lasI rhlI基因在铜绿假单胞菌生物膜感染致病过程中的作用。方法采用生理盐水-吸痰管系统进行铜绿假单胞菌体外生物膜的培养,3d后用扫描电子显微镜观察PAO1、PAO1 lasI rhlI形成生物膜的情况。从大鼠支气管内直接予以PA(菌种为铜绿假单胞菌PAO1野生型,PAO1 lasI rhlI基因缺陷型)海藻酸盐微菌粒悬液(1×109CFU/mL)攻击,建立PAO1野生型及QS系统的lasI rhlI基因缺陷型菌株人工生物膜肺部感染动物模型。于感染2周后评估各组大鼠的肺部病理学、细菌学的变化。结果3d后PAO1野生型的生物膜较厚,lasI rhlI基因缺陷型菌株所形成的生物膜结构呈薄膜状,明显薄于PAO1野生型。感染2周后,PAO1野生型组的病理学改变和细菌学改变均显著重于lasI rhlI基因缺陷组(P<0.001)。结论QS系统的lasI和rhlI基因影响铜绿假单胞菌体外形成生物膜的能力,并且在PA肺部感染过程中发挥着重要作用。     

缺血预处理及后处理对家兔肾脏缺血-再灌注损伤的保护机制研究

目的探讨缺血预处理及缺血后处理对家兔肾脏缺血-再灌注损伤的保护作用。方法首先建立家兔肾脏缺血-再灌注模型。40只雄性家兔随机分为4组（n=10）：假手术组（Sham组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血预处理组（IPC组）及缺血后处理组（IPO组）。再灌注60min后分别检测血清中丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性,光镜下观察肾组织病理学改变。结果与Sham组比较,I/R组、IPC组和IPO组血清SOD活性降低,MDA含量升高,病理损伤明显;与I/R组相比,IPC组和IPO组血清SOD活性升高,MDA含量降低,病理损伤减轻。结论缺血预处理及后处理能够减轻家兔肾脏缺血-再灌注损伤,其机制与增强机体的抗氧化损伤能力有关。     

血管紧张素Ⅱ对家兔血液流变性的影响

目的研究血管紧张素Ⅱ对家兔血液流变性的影响。方法将家兔随机分为盐水对照组(n=10)、卡托普利组(n=10)和缬沙坦组(n=10),卡托普利组静脉给予卡托普利(captopril,Cap)1mg/kg,缬沙坦组静脉给予缬沙坦(valsartan,Val)2mg/kg,盐水对照组给予等量生理盐水。分别于给药前、给药后30min、1h、2h和3h自兔耳中动脉取血,测定血液流变学各项指标。结果卡托普利和缬沙坦均能降低家兔的全血黏度和体外血栓形成,抑制血小板聚集率和红细胞聚集,提高红细胞变性能力,但对血浆黏度和红细胞压积无明显影响。结论血管紧张素Ⅱ增高可能是引起血液流变性异常的重要因素。     

在机能学教学中开展设计性实验的探索

设计性实验是机能学教学中最重要的一个阶段,是一种模拟科研过程,由学生自行选题、大胆设计及探索研究的实验教学项目。以病理生理学为切入点,在2006级临床本科尝试进行机能学设计性实验,结果表明通过设计性实验的开展有助于学生综合素质的培养和创新能力的提高,是未来机能学实验教学改革的重点。     

内毒素休克肝脏肿瘤坏死因子—α表达的免疫组织化学研究

目的研究内毒素休克肝脏肿瘤坏死因子－α表达及地塞米松、噻庚啶和山莨菪碱对其影响。方法雄性ｗｉｓｔａｒ大鼠，静脉注射脂多糖（５ｍｇ／ｋｇ）复制内毒素休克模型，免疫组织化学ＡＰＡＡＰ法观察肝脏肿瘤坏死因子－α表达。结果内毒素攻击后２ｈ，在肝脏巨噬细胞胞浆内及肝细胞膜上均有大量的红染免疫颗粒，呈强阳性；内毒素攻击后，立即静脉给予地塞米松（５ｍｇ／ｋｇ）、噻庚啶（５ｍｇ／ｋｇ）或山莨菪碱（１０ｍｇ／ｋｇ）均显示肝脏红染颗粒显著减少。结论内毒素休克肝脏肿瘤坏死因子－α表达显著增加；地塞米松、噻庚啶和山莨菪碱能显著抑制脂多糖诱导的肿瘤坏死因子－α表达而具有抗内毒素休克作用     

铜绿假单胞菌lasR rhlR基因缺陷对大鼠慢性肺部感染的影响

目的观察铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，Pa）PAO1野生型及群体感应（quorum sensing，QS）系统的lasR rhlR基因缺陷型Pα菌株人工生物被膜致病性的差异，及QS系统的lasR rhlR基因在Pα生物被膜感染致病过程中的地位。方法从大鼠支气管内直接予以Pα（菌种为PAO1野生型和PAO1 lasR rhlR基因缺陷型）海藻酸盐微菌粒悬液（10^9CFU／ml）攻击，建立PAO1野生型及QS系统的lasR rhlR基因缺陷型菌株人工生物被膜肺部感染动物模型。分别于感染1周和2周后评估各组大鼠的肺部病理学、细菌学及细胞因子（IL-4、IL-10）反应的变化。结果感染1周和2周后，PAO1野生型组的肺部病理学改变和细菌学改变均明显重于PAO1 lasR rhlR基因缺陷组（P〈0．001）；感染1周后PAO1野生型组肺部的IL-4、IL-10水平都高于PAO1 lasR rhlR基因缺陷组（P〈0．01，P〈0．05）；2周后PAO1野生型组肺部IL-10水平进一步升高（P〈0．01），明显高于PAO1 lasR rhlR基因缺陷组（P〈0．001）。结论PAO1野生型组在病程中引起持久和严重的肺部感染，激发了TH2样免疫反应，而PAO1 lasR rhlR基因缺陷组的肺部病变明显轻于PAO1组，说明QS系统的lasR rhlR基因在Pα肺部感染的建立及慢性化发展过程中发挥着重要作用。