全血贮存期间氧化损伤及抗氧化系统的变化

目的：探讨４℃条件下保存对血液氧化与抗氧化反应的影响。方法：采用化学比色法检测血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量,血浆总氧抗氧化活性（ＡＯＡ）和红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力。结果：血液在４℃保存时,随贮存时间的延长,血浆ＭＤＡ含量逐渐增加（Ｐ＜００５,Ｐ＜００１）,血浆总抗化活性和红细胞ＳＯＤ活力逐渐降低,（Ｐ＜００５,Ｐ＜００１）。２１ｄ后红细胞膜的流动性明显降低（Ｐ＜００５,Ｐ＜００１）。结论：全血贮存过程中的氧化损伤,除与自由基在膜上发生过氧化反应作用外,还与抗氧化系统障碍有关。     

戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑组织HO-1、cAMP、cGMP及血清中NSE的变化及灵芝孢子粉干预

目的观察灵芝孢子粉对戊四氮(PTZ)致痫大鼠脑组织HO-1、cAMP、cGMP和血液中NSE含量变化的影响,探讨癫痫的发病机制及灵芝孢子粉的干预作用。方法 10周龄Wistar雄性大鼠30只,体质量(200±20)g,随机分成3组,分别是灵芝孢子粉组11只、癫痫模型组11只和空白对照组8只。灵芝孢子粉组和癫痫模型组用亚惊厥剂量(35 mg/kg)戊四氮(PTZ)腹腔注射,1次/d,连续28 d,大鼠连续5次出现2级以上惊厥确定为到达点燃标准,空白对照组用同体积生理盐水腹腔注射,同时灵芝孢子粉组经灌胃给予灵芝孢子粉(150 mg/kg,灌胃前禁食6 h);癫痫模型组和空白对照组经灌胃给予同等体积的生理盐水。实验结束后断头取血,在低温条件下迅速取出大脑,测定各相关指标的变化。结果实验性癫痫大鼠模型制作成功,灵芝孢子粉组和癫痫组实验动物全部达到点燃标准。高倍视野(100×)下,癫痫模型组海马和皮质区HO-1阳性细胞数明显较空白对照组增多(P<0.01),灵芝孢子粉组HO-1阳性细胞数低于癫痫模型组(P<0.05)。癫痫模型组cAMP、cGMP含量较正常对照组均有明显增加(P<0.01),同时cAMP/cGMP比值减小(P<0.01);与对照组比较,灵芝孢子粉治疗组cAMP含量增加(P<0.01),而cGMP含量较癫痫模型组明显降低(P<0.01),同时cAMP/cGMP比值亦增加,与癫痫模型组比较差异就有显著性(P<0.01)。血液中NSE的含量癫痫模型组与空白对照组相比增多(P<0.01),而与癫痫模型组比较,灵芝孢子粉治疗组血液中NSE的含量下降(P<0.05)。结论灵芝孢子粉可以降低癫痫时脑组织HO-1的含量,调节cAMP/cGMP比值减轻神经系统的异常放电,减轻过量的HO-1对神经元的损伤作用,降低血液中NSE的含量。     

育龄期妇女破伤风抗体水平监测

新生儿破伤风是一种严重威胁新生儿生命安全的疾病,尤其在发展中国家其发病率、病死率均较高。据统计,全世界发展中国家每年死于新生儿破伤风者有80万之多。世界卫生组织已将新生儿破伤风列为扩大免疫规划(即计划免疫)重点控制的疾病之一。根据文献报道,如果母体破伤风抗体水平≥0.01 IU/ml,即可保护母亲和新生儿免受感染。为了查明育龄期妇女的破伤风抗体水平,给今后预防新生儿破伤风积累资料,我们选择了黑龙江省伊春市、木兰县和哈尔滨市三地区部分育龄期妇女进行了破伤风抗体水平监测,现     

实验性甲状腺功能低下大鼠脑,红细胞膜神经磷脂与磷脂酰胆…

应用薄层色谱扫描法，动态观察了实验性甲低大鼠脑，红细胞膜神经磷脂／磷脂酰胆碱分子比较变分，结果表明，和甲基硫脲嘧啶和脑发育临界期后停ＭＴＵ组，ＳＭ／ＰＣ分子比明显升高。     

树舌合剂抗脂质过氧化及对冻融蟾蜍胃 AKPase 组化观察

本实验采用日本产显微镜和中国上海产722分光光度计分别观察测定了冻融蟾蜍胃组织 AKPase 活力。全血 GSH—Px 活力,血浆 LPO 和红细胞 MDA 含量,及树舌合剂的保护效应。结果表明:药物复温组 LPO 和 MDA 含量显著低于对照组,GSH—Px 活力显著高于对照组(P<0.01)。胃组织 AKPase 活力显著高于对照组呈强阳性。结果提示:树舌合剂具有抗脂质过氧化,保护GSH—Px 酶活力功能。对冻融胃组织能间接提高机体清除超氧自由基和羟自由基的能力。这为临床医学及器官移植提供了丰富物质资源和理论基础。     

自然冻融蟾蜍眼球的形态学观察

本实验采用自然和离体冻融(—22),冷冻蟾蜍眼球。将其分为在体和离体冻融。冷冻60分钟后,用0.2%甘油30℃复温,1—2分钟后复苏,速将其眼球经组织学常规处理。HE染色,olympus显微镜观察及图像分析冻融后蟾蜍眼球组织结构的变化。离体眼球组,显微镜下可见:角膜、视网膜、脉络膜、巩膜细胞体积增大,颗粒增多现象。纤维呈透明玻璃样变。在体冷冻复温组,眼球组织结构完整。各种细胞和纤维清楚可见,实验结果提示:蟾蜍眼球可以左—22℃条件下至少保存60分钟。0.1%甘油30℃复温。1—2分钟复苏。实验结果提示:眼球器官具有活力和功能。     

纳米二氧化硅和纳米氧化锌颗粒对人肝癌细胞的毒性作用

目的探讨纳米二氧化硅和纳米ZnO颗粒对人肝癌(HepG2)细胞毒性的影响。方法将处于对数生长期的细胞分别暴露于含终浓度分别为0(对照)~200μg/ml纳米二氧化硅、纳米ZnO颗粒的无血清培养基中培养24 h。检测细胞活性及细胞膜的完整性。结果与对照组比较,各浓度纳米二氧化硅及25~200μg/ml纳米ZnO染毒组HepG2细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着染毒浓度的升高,纳米二氧化硅和纳米ZnO染毒HepG2细胞的存活率均呈下降趋势。与相同浓度纳米二氧化硅相比,50~200μg/ml纳米ZnO染毒组HepG2细胞的存活率均较高,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,各浓度纳米二氧化硅及纳米ZnO染毒组HepG2细胞上清液中LDH的活力均较高,差异有统计学意义(P0.05);且随着纳米二氧化硅和纳米ZnO染毒浓度的升高,HepG2细胞上清液中LDH的活力均呈上升趋势。与相同浓度纳米二氧化硅相比,各浓度纳米ZnO染毒组HepG2细胞上清液中LDH的活力均较低,差异有统计学意义(P0.05)。结论两种纳米颗粒均可对HepG2细胞产生毒性作用,且纳米二氧化硅比纳米ZnO颗粒的细胞毒性作用更强。     

灵芝酸对锂-匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元的保护作用

目的观察灵芝酸对氯化锂-匹鲁卡品致痫大鼠海马神经元p-Akt、Akt蛋白表达的影响,并通过应用wortmannin阻断PI3K/Akt通路,探讨灵芝酸是否具有抗癫痫作用及其作用机制。方法选取雄性SD大鼠50只,随机分为5组(n=10),A组:生理盐水对照组,B组:癫痫模型组,C组:灵芝酸干预组,D组:wortmannin抑制剂组,E组:二甲基亚砜(DMSO)对照组。每组给予相应药后,对大鼠进行行为学观察、HE染色法检测海马神经元细胞形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠海马区p-Akt、Akt蛋白表达。结果与A组相比,B、C、D、E组p-Akt、Akt的表达量相对较高(P0.01);灵芝酸干预后,C、D、E组p-Akt、Akt的表达量明显比B组增高(P0.05);PI3K/Akt通路被阻断后,C、E两组p-Akt、Akt的表达量明显比D组增高(P0.05)。结论灵芝酸对海马神经元具有一定的保护作用,并且其机制与PI3K/Akt通路的活化并影响其下游蛋白的表达有关。     

血红素加氧酶2和CO在去势大鼠阴茎海绵体中的表达

目的:检测去势大鼠阴茎海绵体中血红素加氧酶2(HO-2)/CO的表达,初步探讨勃起功能障碍(ED)的发病机制。方法:雄性SD大鼠72只均分为对照组、假手术组、去势组和去势锌原卟啉(Zn PP,HO阻断剂)组,检测基础条件和阿扑吗啡(APO)刺激后的海绵体内压(ICP)和勃起率;激光共聚焦显微镜检测大鼠勃起不同时期阴茎海绵体组织中HO-2蛋白的表达,分光光度计测定CO在大鼠勃起不同时期的含量。结果:基础条件和APO刺激后ICP和勃起率,去势组[(11.68±0.69)mm Hg,(54.81±3.86)mm Hg,33.3%]和去势Zn PP组[(11.20±0.71)mm Hg,(41.17±5.41)mm Hg,22.2%],与对照组[(22.83±2.66)mm Hg,(66.92±7.77)mm Hg,100%]和假手术组[(23.35±2.22)mm Hg,(70.43±7.22)mm Hg,100%]比较显著下降(P均0.01),且APO刺激后去势Zn PP组ICP较去势组明显降低(P0.01)。APO刺激后,勃起前和勃起中阴茎海绵体HO-2蛋白表达,去势组(445.4±23.7,847.4±35.0)和去势Zn PP组(390.1±29.7,526.0±52.5)较对照组(512.7±57.4,1 145.2±89.8)和假手术组(583.7±8.0,1 016.3±79.8)显著下降(P0.05或P0.01),且勃起中去势Zn PP组HO-2蛋白表达较去势组明显降低(P0.01);勃起后各组之间的HO-2蛋白表达变化差异无显著性。勃起前、中和后阴茎海绵体CO含量,去势组[(20.59±1.01)×10-7nmol/L,(32.53±1.26)×10-7nmol/L,(18.71±1.22)×10-7nmol/L]和去势Zn PP组[(12.52±1.05)×10-7nmol/L,(21.90±1.02)×10-7nmol/L,(16.56±0.55)×10-7nmol/L]较对照组[(26.76±1.41)×10-7nmol/L,(48.25±1.01)×10-7nmol/L,(27.10±1.58)×10-7nmol/L]和假手术组[(25.41±2.09)×10-7nmol/L,(47.90±1.22)×10-7nmol/L,(25.67±1.20)×10-7nmol/L]显著下降(P0.05或P0.01),且勃起中去势Zn PP组CO含量较去势组明显下降(P0.01)。结论:HO-2和CO表达下降与去势大鼠ED的发生有关。     

灵芝孢子粉对戊四氮慢性点燃大鼠学习记忆及胆碱乙酰转移酶、乙酰胆碱酯酶活性的影响

目的观察灵芝孢子粉对戊四氮点燃大鼠学习记忆及海马胆碱乙酰转移酶(ChAT)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响,进一步探讨癫痫的发病机制及灵芝孢子粉对神经细胞保护的作用机制。方法将60只成年SD大鼠随机分为空白对照组、癫痫模型组、灵芝孢子粉用药高、中、低剂量组共5组。癫痫模型组和灵芝孢子粉用药各组大鼠腹腔注射阈下剂量的PTA35 mg.kg-1.d-1,直至达到点燃标准。点燃后,用药组以灵芝孢子粉灌胃。采用Morris水迷宫测试大鼠空间记忆能力,制备海马10%组织匀浆,化学比色法检测其ChAT、AChE的活性。结果水迷宫逃避潜伏期,模型组明显高于用药高剂量组和对照组(均P<0.01);跨过原平台次数,模型组明显少于用药高剂量组(P<0.05)和对照组(P<0.01);与模型组相比,用药中、高剂量组呈剂量依赖性显著抑制海马AChE的活性、增强ChAT的活性(均为P<0.05)。结论灵芝孢子粉可通过抑制功能脑区AChE活性、增加ChAT的活性,以增强中枢胆碱能神经系统的功能,改善癫痫大鼠认知能力,从而对脑组织起保护作用。