mmu-miR-294调控MMP3靶基因对LLC细胞侵袭迁移的影响

目的 预测并验证小鼠mmu-miR-294调控的靶基因,探讨其在肺癌发生发展中的生物学功能.方法 生物信息学预测mmu-miR-294可能调控的靶基因金属蛋白酶(MMP3),双荧光素酶检测验证mmu-miR-294调控MMP3的真实性；脂质体2000介导转染mmu-miR-294模拟物进入Lewis(LLC)细胞株,通过Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变.结果 重组质粒经XbaⅠ单酶切能获得约5000 bp和100 bp的酶切片段,阳性克隆测序,双荧光素酶报告基因检测证明合成寡核苷酸链序列插入正确；脂质体2000介导转染mmu-miR-294模拟物,过表达实验组MMP3蛋白水平较对照组明显降低.转染mmu-miR-294模拟物后LLC细胞的侵袭迁移能力显著降低(P＜0.01).结论 低表达mmu-miR-294有助于维持LLC的侵袭转移特性,增加其表达水平可以有效抑制LLC的侵袭迁移能力.mmu-miR-294可能通过调控其靶基因MMP3表达而发挥功能.     

结直肠癌患者癌组织中IL-23表达水平与预后的相关性研究

  目的  探讨结直肠癌患者癌组织中IL-23表达水平与预后的关系。  方法  选取2015年1月1日—2016年12月31日于南阳市中心医院就诊的164例结直肠癌患者并采用免疫组化法检测癌组织中IL-23的表达,染色强度得分×阳性表达率得分为0~1分、2~3分、4~5分和≥6分时分别计为阴性、弱阳性、中度阳性和强阳性,将“中度和强度阳性”视为IL-23高表达,其余为IL-23低表达;纳入2019年1月1日—2019年12月31日南阳市中心医院70例结直肠癌患者(观察组)和35例健康者(对照组),比较血清中IL-23表达的差异。影响因素和诊断效能用Cox风险比例模型和受试者操作特征曲线分析。  结果  癌组织中IL-23高表达119例,低表达45例,主要表达于胞浆中。淋巴结转移(N1~N2)、TNM分期(Ⅲ期)和IL-23表达水平(高表达)是CRC患者预后的独立危险因素(均P < 0.01)。结直肠癌观察组血清中IL-23表达显著高于对照组(t=12.173,P < 0.001)。IL-23诊断结直肠癌的AUC为0.935(95% CI:0.888~0.981),截断值为36.195 ng/mL,诊断灵敏度和特异度为94.30%和80.00%。  结论  IL-23高表达与结直肠癌不良预后有关,可作为预测预后的一项血清学筛查标志物。      

HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者干扰素治疗24周应答不佳时的治疗方案

目的对干扰素单药治疗24周应答不佳的HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）患者采用不同的治疗方案进行后续治疗,分析
比较其疗效和安全性。方法回顾性分析2010年9月~2013年1月南方医科大学南方医院193例干扰素治疗24周时应答不佳的
HBeAg阳性的CHB患者,根据不同后续治疗方案分成：联用恩替卡韦（ETV）或阿德福韦（ADV）治疗（A组）,继续干扰素单药治
疗（B组）,换为NAs治疗（C组）,直接停止治疗（D组）。观察比较第24、48、72周时各组患者的临床疗效与安全性。结果继续治
疗至疗程48 周时,A组和C组HBV DNA转阴率、ALT 复常率均高于B组（A组：χ2=26.808,P<0.001 和χ2=5.485,P=0.017;C
组：χ2=21.257,P<0.001 和χ2=5.369,P=0.018）;同时发现,加ETV组HBV DNA转阴率高于加ADV组（χ2=8.255,P=0.004）。疗
程72周时,A组患者有27例（39.7%）发生HBeAg血清学转换,明显高于B、C两组（χ2=4.238,P=0.04 和χ2=7.681,P=0.006）;58例
（85.3%）获得HBV DNA转阴,59例（86.8%）ALT恢复正常,均高于B组（χ2=23.018,P<0.001和χ2=5.987,P=0.014）,但与C组比
较差异无统计学意义（P>0.05）;同时发现,联合ETV组HBV DNA转阴率和HBeAg血清学转换率均高于加ADV组（χ2=9.823,
P=0.002 和χ2=5.450,P=0.020）。D组,28例患者的HBV DNA均持续较高水平复制,HBeAg水平升高,ALT反复波动。结论对
于干扰素单药治疗24周时应答不佳的CHB患者,联用NAs并延长疗程可明显提高HBeAg血清学转换率、HBV DNA转阴率及
ALT复常率,特别是联用ETV并延长疗程时。
     

半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对缺血性损伤后神经元形态的作用

目的:观察半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对原代神经元缺血性损伤后形态变化的作用。方法:在不同浓度孟鲁司特存在条件下,以缺氧缺糖(OGD)2 h和再灌(R)24 h(OGD/R)诱导大鼠原代神经元及皮层混合培养细胞的神经元损伤;以免疫染色法检测神经元数量、胞体大小、胞体总神经突起数量、一级神经突起数量、长度及其分支数量等指标,观察神经元形态的变化。结果:OGD/R可明显减少神经元的数量,显著改变神经元的形态。而孟鲁司特(0.0001～1μmol/L)能减轻单独神经元培养中OGD/R诱导的神经元数量减少,抑制一级神经突起分支数量增加;在混合培养中,孟鲁司特(0.0001～0.1μmol/L)增加OGD/R后一级神经突的长度,减少神经突起数量以及一级神经突起分支数量。结论:半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对大鼠原代神经元缺血性损伤有保护作用。     

噬菌体展示EpCAM单链抗体及免疫原性初步研究

目的利用噬菌体展示技术进行鼠抗人EpCAM单链抗体表达并鉴定其免疫活性,构建特异靶向上皮来源肿瘤细胞及癌干细胞的单链抗体。方法采用全基因合成的方法合成VL+Linker+VH的EpCAM的单链抗体(ScFv)基因,克隆到pMD19-T简易载体中,将ScFv基因酶切并纯化后克隆到噬菌体载体pCANTAB-5E,热休克法转化至感受态的大肠杆菌TG1,随机挑取5个克隆,经辅助噬菌体超感染,形成鼠抗人EpCAM噬菌体单链抗体,用ELISA(以P/N>2判定为阳性)和免疫细胞化学法测定其抗原结合活性。结果成功获得pCANTAB-5E/EpCAM ScFv重组克隆,经ELISA和免疫细胞化学测定,噬菌体展示阳性率为20%,展示的单链抗体能与EpCAM抗原和A549细胞特异性结合。结论噬菌体展示技术制备EpCAM单链抗体方法简便、省时、高效。     

MMP-1、MMP-2、MMP-9在脑胶质瘤中的联合检测及其意义

目的：探讨MMP-1、MMP-2、MMP-9在胶质瘤中的表达及其意义。方法：采用免疫组织化学法对78例石蜡包埋的胶质瘤组织和12例正常脑组织进行标记和分析。结果：MMP-1、MMP-2、MMP-9在正常脑组织中几乎不表达;而在胶质瘤中的阳性率分别为66%、64%、75%,联合检测率为62%,采用Spearm an进行相关性分析,它们与胶质瘤的恶性程度均呈正相关（rs=0.2671～0.5631,P〈0.05）。结论：联合检测这3个指标对判断胶质瘤的恶性程度和侵袭能力具有重要的意义。     

儿童传染性单核细胞增多症临床分析

目的　探讨儿童传染性单核细胞增多症 (infectionsmononucleosis,IM)的临床特征。方法　对 30例儿童IM进行回顾性分析。结果　发病年龄 <3岁 8例 ,3～ 6岁 15例 ,>6岁 7例 ;且 30例均有淋巴结肿大 ,2 6例有发热、咽峡炎 ,2 7例肝脾肿大 ,皮疹 4例 ,眼睑浮肿 7例 ,肾功能改变 3例 ,心肌损害 5例。结论　儿童IM好发于学龄前期 ,并发多系统损害是其主要特点 ,其临床表现主要为不规则发热、咽峡炎 ,淋巴结及肝脾肿大 ,肝功能异常比较常见 ;心肌损害也不少见 ,且病情较重 ;年龄越小 ,症状越重。     

长春新碱治疗14例难治性特发性血小板减少性紫癜患儿疗效分析

特发性血小板减少性紫癜 (ITP)是儿科常见的出血性疾病 ,患儿以急性居多 ,常呈自限性 ,不需治疗或经肾上腺皮质激素、静脉滴注丙种球蛋白治疗即可恢复正常 ,仅5 %表现为慢性型 ,常规治疗效果不佳[1]。此类即所谓的难治性ITP ,目前尚无较好的治疗方法。我院1993～1998年采用长春新碱(VCR)治疗14例难治性ITP患儿 ,并随访4年 ,取得了较好疗效。1.1对象系1993～1998年收住我院儿科病房的ITP患儿 ,均符合首届中华血液学会全国血栓与止血学术会议制定的诊断标准[2] ,均经糖皮质激素规则治疗6月无效或激素依赖或复发。其中男性8例、女性6例 ,…