抚触联合中药敷脐预防新生儿黄疸的疗效观察

新生儿黄疸是由于胆红素代谢异常引起血中胆红素水平升高而出现皮肤、黏膜及巩膜黄疸为特征的疾病,有生理性和病理性之分.病理性黄疸严重时可因新生儿黄疸引起中枢神经系统受损,影响智力发育.所以早期干预、早期治疗新生儿黄疸显得尤为重要.我科采用抚触联合中药敷脐预防足月正常新生儿黄疸,取得了一定的效果.现报告如下.     

白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562／A02细胞增殖和凋亡的影响

背景：对白血病患儿在白血病细胞获得耐药、抗凋亡特性的过程中机制的研究目前甚少,多数研究集中在正常骨髓间充质干细胞和已建系的基质细胞,而未重视患儿骨髓间充质干细胞与白血病细胞之间的相瓦作用。 目的：课题创新性提出白血病患儿骨髓间充质干细胞可能对白血病细胞株K562/AO2生长增殖及凋亡产生影响的理论假设。 设计、时间及地点：细胞学体外实验,于2007-12／2008—08在广州医学院第一附属医院儿科实验室完成。 材料：骨髓间充质干细胞来源于广州医学院第一附属医院住院的30例自血病患儿,其中急性淋巴细胞白血病患儿22例,急性粒细胞白血病8例,患儿家属对实验均签署知情同意书。K562／AO2细胞株由天津血液病研究所提供。 方法：Ficoll密度梯度法分离培养白血病患儿骨髓间充质干细胞。设立2组：K562/AO2细胞组单独悬浮培养处于对数生长期的K562／AO2细胞;K562/AO2细胞＋骨髓间充质干细胞共培养组在骨髓间充质干细胞贴壁呈融合状态时,加入1×10^8L^-1处于对数生长期的K562／AO2细胞,24h后去除未黏附的K562／AO2细胞。 主要观察指标：白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562／AO2细胞生长的影响,AnnexinV-FITC法榆测阿霉素对K562／AO2细胞凋亡的影响,流式细胞仪测定不同条件培养下的K562／AO2细胞周期,Taqman—MGB探针实时荧光定量PCR愉测不同条件培养下耐药基因mdr1的表达。 结果：与单独悬浮培养的K562／AO2细胞比较,K562／AO2细胞＋骨髓间充质干细胞共培养组的K562／AO2细胞生长较为缓慢,无明显的对数生长期;早期凋亡细胞数明显减少（P〈0．05）;处于G0-G1期的K562／AO2细胞明显增多,S期细胞减少：K562／AO2细胞mdr1耐约基因的表达无明显差异（P〉0．05）。 结论：体外细胞学实验结局证实,白血病患儿骨髓间充质干细胞诱导的K562／AO2细胞耐药与mdr1基因无关,而是通过黏附作用改变K562／AO2细胞周期,进而逃避药物的促凋亡作用。     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562细胞株药物耐受性的影响

目的 研究急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞（MSCs）对K562细胞药物耐受性的影响,并初步探讨其机制.方法 从白血病患儿骨髓中分离、培养并鉴定MSCs;建立K562细胞株与MSCs共培养的体系,观察MSCs对K562细胞生长的影响;AnnexinV-FITC检测一定浓度的阿霉素（ADM）对K562细胞凋亡的影响;流式细胞仪测定不同培养条件下的K562细胞周期;RT-PCR检测K562细胞的Bcl-2和Bax基因.结果 和单独培养的K562细胞相比,与MSCs黏附共培养的K562细胞生长较为缓慢,未见明显的对数生长期.单独培养组细胞早期凋亡率为（9.19±0.53）%,而黏附培养组为（4.00±0.37）%,差异具有统计学意义（P＜0.05）.黏附共培养组K562细胞,G0-G1期细胞比例为（80.95±3.83）%,显著高于单独培养组（50.2±2.26）%（P＜0.05）;而S期细胞比例为（17.40±1.50）%,显著低于单独培养组（37.03±3.50）%（P＜0.05）.相对于单独悬浮培养的K562细胞,黏附共培养的K562细胞Bcl-2基因相对表达明显增强,Bcl-2/Bax显著增高.结论 白血病患儿MSCs能抑制白血病细胞株K562生长,改变细胞周期而逃避药物的促凋亡作用,K562对阿霉素产生耐药性可能与黏附共培养后Bcl-2基因表达增强有关.     

藏医药理论及用药特点

藏医药的形成与发展有悠久历史,一直是在吸收外来的医学精华,采众家之长,与本地的医药学相结合而形成的具有独特民族风格的完整的理论体系。藏医药具有独特的药物炮制、药物应用特点。     

急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562细胞株药物耐受性的影响

Objective To study the effect of acute lymphoblastic leukemia (ALL) children bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) on the resistance of K562cell atd mechanism in vitro.Method MSCs were obtained from AL children bone marrow after derivation, cultivation and identification.The coculture of MSCs and K562 and K562 suspension were established.Effects of MSCs on the growth of K562 cells were investigated in vivo.The two kinds of cells treated with different concentration of adriamycin (ADM) and the rate of apoptosis was evaluated by flow cytometry.Cell cycle was determined by flow cytometry.RT-PCR was used to detect Bcl-2 and Bax in K562 cells.Result Compared with the cell growth curve of K562 alone, the K562 cell co-cultured with MSCs grew slower and the exponential phase of growth was not obvious.The apoptosis index of the K562 cells co- clutured with MSCs was (9.19 ±0.53)% examined by flow cytometry, and that of the K562 cells alone was 4.00 ± 0.37% respectively( P ＜ 0.05 ).The percentage of cells at G0/G1 phase was (50.2 ± 2.26) % and that at S phase was (37.03 ± 3.50) % in the group of K562 alone, but those of the K562 cells co - cultured with MSCs were (80.95 ± 3.83) % and ( 17.40 ± 1.50)% respectively( P ＜0.05).The result of RT-PCR suggested expression of Bcl-2/Bax of the K562 cell co-cultured with MSCs was higher than K562 alone.Conclusion ALL children MSCs suppressed the growth of K562 cell in vitro.Adhesion made K562 depress sensitive to ADM.The mechanism was perhaps caused by adhesion with MSCs, K562 cell cycle was changed and related to Bcl-2 gene high level expression.     

载药型晶状体囊袋张力环对猪眼晶状体囊袋内上皮细胞增殖的影响

目的研究载药型晶状体囊袋张力环对体外培养猪眼晶状体囊袋模型中晶状体上皮细胞增殖的影响,探讨载药型晶状体囊袋张力环防治后发性白内障的可能性。方法连续环形撕囊晶状体超声乳化吸除术制备猪眼晶状体囊袋模型,并随机分为CTR组：植入未经处理的晶状体囊袋张力环（n=13）;CTR—PLGA,biG132组：植入表面包裹PLGA—MG132的晶状体囊袋张力环（n=13）。晶状体囊袋模型体外培养3周,显微镜下方格计数法计算后囊膜细胞移行面积;晶状体囊袋模型行组织病理学检查;ELISA检测纤维连接蛋白表达量的差异。结果晶状体上皮细胞经2～3d生长潜伏期后,CTR组在（9．06±1．61）d完全覆盖后囊膜;随着培养时间的延长,后囊膜上细胞层次增加,囊膜皱褶增多;组织病理学检查可见薄层均质红染的后囊膜上被覆一层或多层排列紧密、核深染胞浆丰富的晶状体上皮细胞。而CTR-PLGA-MG132组,经4～5d生长潜伏期后,即可见晶状体上皮细胞点片状脱落,呈细小圆点状,仅残留少量细胞;1周后,细胞片状脱落、漂浮,后囊膜出现无细胞覆盖区;组织病理学检查可见均质红染的后囊膜上细胞排列松散,见无细胞覆盖区,前后囊膜平整光滑。ELISA检测CTR．PLGA．MG132组囊袋模型纤维连接蛋白表达量[（25．14±3．73）μg/ml]显著小于CTR组[（106．86±22．34）μg／m1],差异有统计学意义（t=81．72,P〈0．01）。结论相比CTR组晶状体囊袋模型,CTR．PLGA．MG132组晶状体囊袋模型残留细胞在后囊膜上移行面积、纤维连接蛋白表达均明显减少。CTR—PLGA-MG132,可有效抑制猪眼晶状体囊袋模型中晶状体上皮细胞的增殖,减少上皮．问质转化。载药型晶状体囊袋张力环是白内障术后防治后发性白内障的一种创新性尝试。     

藏医药理论及用药特点

藏医药的形成与发展有悠久历史，一直是在吸收外来的医学精华，采众家之长，与本地的医药学相结合而形成的具有独特民族风格的完整的理论体系。藏医药具有独特的药物炮制、药物应用特点。     

新生儿色素失禁症1例分析

1病例资料 患儿女,生后9小时,因发现全身疱疹9小时于2013年12月8日由外院转人我科。患儿为第2胎第1产,胎龄40周剖宫产娩出,羊水、脐带、胎盘均正常。母亲孕期产检有阴道炎病史;家族中无类似疾病患者。入院时查体全身散在分布大片红斑,红斑上可见米粒或黄豆大小的黄色疱疹,以四肢多见,毛发、指（趾）甲正常,见图1。     

硫鸟嘌呤核苷酸浓度检测在儿童急性淋巴细胞白血病6-巯嘌呤个体化疗中的意义

目的:建立一种快速、灵敏、高效的方法,检测儿童急性淋巴细胞白血病红细胞中硫鸟嘌呤核苷酸浓度.方法:应用反相高效液相色谱(RT-HPLC)技术,测定急性淋巴细胞白血病患儿红细胞内6-巯嘌呤(6-MP)及其代谢产物[硫鸟嘌呤核苷酸、6-硫代黄嘌呤(6-TX)、6-甲基巯基嘌呤(6-MMP)]浓度.色谱柱为ResolveC18,柱温40℃.流动相A为0.2%的乙酸溶液,流动相B为甲醇.梯度洗脱程序为在16min内流动相B的浓度从0上升到80%.流速1.0mL/min.检测波长为0～12.5 min用290nm检测6-硫鸟嘌呤(6-TG)、6-MP和6-TX,12.5 min时切换为340nm检测6-MMP.结果:进样体积为10μL时,6-TG和6-TX的线性范围为0～20nmol/mL(r=0.999 3,r=0.998 0).硫鸟嘌呤核苷酸浓度与测定后第9天的白细胞计数呈负相关(P＜0.01).结论:RT-HPLC法简便、准确检测6-MP代谢物浓度,有助于个体化的治疗.