C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的改良和鉴定

目的 建立一种体外纯化及培养扩增C57/BL6小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的简单有效方法.方法 利用骨髓MSCs在体外培养皿中培养时具有贴壁生长的特性,采用全骨髓法分离培养C57/BL6小鼠MSCs,通过体外培养和连续传代达到纯化和扩增MSCs目的,并与以优化.倒置显微镜下观察细胞形态变化情况;利用四唑盐比色(MTT)法测定MSCs的生长曲线;流式细胞仪(FCM)鉴定MSCs膜抗原.结果 C57/BL6小鼠胫骨全骨髓细胞在分离后与含15％优质胎牛血清DMEM/F12培养基混合,约5～10 min后即可见大量有核细胞贴壁,细胞形态为圆形,24～48 h后可见贴壁细胞转变为椭圆形、多角形及短梭形,7～12 d时细胞呈长梭形并达到90％单层融合.通过传代细胞进一步纯化及扩增.细胞传代后2d内处于潜伏期,3d后进入生长期,5d后进入平台期.第4代MSCs进行FCM检测CD45、CD44、CD29和CD54阳性率分别为2.4％、83.2％、95.1％和94.1％.激光免疫共聚焦结果显示造血细胞表面标物CD34和CD45阴性,而CD44和CD105阳性.结论 C57/BL6小鼠全骨髓贴壁法能有效得到分离纯化的MSCs,用此方法培养的C57/BL6小鼠MSCs生长稳定,增殖能力活跃,具有MSCs的一般生物学特性,可以为组织工程提供理想的种子细胞.     

17例巴洛综合征的外科治疗

目的 总结17例巴洛综合征的手术治疗,并对其诊断、病因、手术方法进行初步探讨.方法 2005年8月至2007年12月,17例经临床、心脏超声及术后病理确诊有巴洛综合征病人,行二尖瓣成形术或置换术,随访其术后心功能与预后情况,总结巴洛综合征二尖瓣成形术的特点.并对10例上海地区病人进行基因学测序研究,探讨该巴洛综合征病人是否存在FLNA基因的位点发生改变.结果 术后病人心功能均提高至Ⅰ级.12例二尖瓣成形者术后食管超声显示,6例轻微反流,1例轻度反流,5例未测及反流.5例二尖瓣置换术者术后心脏超声均未见反流.所有接受手术治疗者,左心房内径、左心室舒张末内径及左室收缩末内径均较术前明显缩小(P<0.05).基因学测序结果显示,10例病人中有2例在FLNA的EXON1的5'UTR区域G10A位点发生改变.结论 二尖瓣手术(成形术或置换术)是治疗巴洛综合征的有效手段.巴洛综合征的二尖瓣成形术修复较难,有其特殊性,要警惕SAM现象,不能勉强修复;二尖瓣置换术也是一种很好的选择.部分巴洛综合征病人在FLNA的EXON 1的5'URT区域G10A有基因位点改变.     

芬太尼伍用咪唑安定用-Td~JL术后静脉自控镇痛31例

目的：观察芬太尼伍用咪唑安定用于小儿术后静脉自控镇痛的效果及不良反应。方法：62例行腹部及四肢手术的患儿,随机分为对照组和观察组,每组31例。两组均加入芬太尼10μg·kg,观察组另加入咪唑安定0．3mg·kg^-1两组均加生理盐水至100ml。术毕接PCA泵,于2、4、8、12、24、48h各时间点记录患儿的HR、SPO：、MAP、镇痛、镇静及抗焦虑评分及不良反应发生情况。结果：镇痛效果观察组优于对照组,差异有显著性（P〈0．05）;镇静评分术后2h、4h各组差异不明显,但在8h、12h、24h、48h各时点,镇静效果观察组明显优于对照组（P〈0．05）;两组RR、SPO2、MAP变化不明显（P〉0．05）;观察组出现3例恶心,对照组出现1例呼吸抑制。结论：咪唑安定伍用芬太尼用于小儿术后静脉自控镇痛,优于传统方法,综合效果显著。     

先天性心脏病伴肺动脉高压患者肺血管反应性的判断

目的 探讨先天性心脏病伴严重肺动脉高压(PH)患者肺血管反应性的判断标准.方法 20例伴严重PH的先天性心脏病患者行急性肺血管扩张试验,采用不同的指标判断肺血管反应性,并进行肺血管病理评估和平滑肌α-肌动蛋白免疫组化检测.结果 以FICK法原则计算所得肺血管阻力/体循环阻力(PVR/SVR)值下降超过20%作为阳性标准,比目前通用的判断标准进一步提高了肺血管扩张试验的阳性率.肺血管扩张试验阴性的患者较阳性患者肺血管病理损伤严重,并伴有平滑肌α-肌动蛋白表达升高.结论 采用PVR/SVR作为肺血管反应性指标,比目前标准能更加可靠预测肺血管阻力的可逆程度,对先天性心脏病伴严重PH患者手术指征的判断具有重要的参考价值.     

西安地区1478例骨密度调查研究

目的 调查西安地区部分人群骨密度,为建立骨密度正常参考值数据提供资料.方法 应用双能X线骨密度仪对西安地区1478例受检对象进行骨密度检测,分析各年龄组骨密度值,以及骨量丢失率及患病率,用SPSS13.0分析软件进行统计学处理.结果 西安地区女性和男性骨密度峰值(PBM)分别出现在20～24岁和30～34岁年龄组, 随后呈下降趋势,但女性在30～34岁和50岁左右,其BMD值各形成一个波形向上小峰,男性BMD于40岁左右和60～64岁呈现相同波形.各部位BMD均下降,其中以沃氏三角降低幅度最大.同年龄段和同一测量部位的男性BMD均高于女性.女性在50岁以后、男性在55岁以后骨密度值明显降低,骨量丢失率增加,OP发生率升高.结论 骨质疏松发生率与增龄呈明显正相关, 女性在50岁以后、男性在55岁以后,OP的发生几率增大,应及早预防.     

外耳道乳头状瘤局部注射5-氟脲嘧啶的疗效观察

外耳道乳头状瘤是由乳头状病毒（HPV）引起,病变范围多发生在外耳道软骨部,单纯手术摘除极易复发。2004年～2007年我院收治16例外耳道乳头状瘤患者,增多行手术摘除肿瘤后局部注射5-氟脲嘧啶（5-FU）,并与8例不注射5-FU的对照组进行比较,以探讨局部注射5-FU的治疗效果,现将结果报告如下。     

腹主动脉移植后小鼠外周血内皮祖细胞数量的动态变化及意义

目的 观察腹主动脉移植后小鼠移植物动脉硬化的病变过程及外周血内皮祖细胞(EPC)数量的动态变化,探讨EPC与动脉内膜损伤和修复的相互关系.方法 以C57BL/6小鼠和Balb/c小鼠为供、受者,建立腹主动脉原位移植后移植性模型.术后3 d、2周、4周、6周,观察移植动脉病理改变,并采用计算机图像分析系统分析移植血管内膜增生情况.使用流式细胞仪监测术后外周血中EPC数量的变化.结果 术后3 d,移植动脉内皮细胞损伤,并伴有明显的炎症细胞浸润.术后2周,即可观察到移植动脉新生内膜形成,存在急性排斥反应;术后4周、6周内膜厚度逐渐增生,移植动脉管腔明显狭窄.术后早期外周血中EPC的数量增多,3 d时达到高峰,此后迅速减少,术后14和28 d时,显著低于术前水平(P＜0.05).结论 通过同种小鼠腹主动脉原位移植可成功复制出移植物动脉硬化的病变特点;外周血中EPC的数量与移植动脉内膜损伤的修复密切相关,可能成为移植物动脉硬化的发病指标和干预靶点.     

悬钟阳陵泉超声波治疗急性腰椎间盘突出症疗效观察

目的：观察悬钟、阳陵泉穴位阿是超声波治疗联合抗炎脱水药物治疗急性腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：将120例患者随机分为2组各60例。观察组予悬钟、阳陵泉穴位阿是超声波治疗仪治疗,同时配合抗炎脱水治疗;对照组仅予抗炎脱水治疗。评价2组治疗前、后腰腿疼痛程度,比较2组临床疗效。结果：2组组内比较,治疗2天分别与治疗前比较,治疗4天分别与治疗2天比较,目测类比评分法（VAS）评分均下降,差异均有显著性意义（P〈0.05）;治疗7天分别与治疗4天比较,治疗14天分别与治疗7天比较,对照组VAS评分均无明显下降,差异均无显著性意义（P〉0.05）,观察组VAS评分仍持续下降,差异有非常显著性或显著性意义（P〈0.01,P〈0.05）。2组治疗7天、治疗14天VAS评分均下降明显,差异均有非常显著性意义（P〈0.01）。2组显效率、总有效率分别比较,差异均有显著性意义（P〈0.05）。结论：悬钟、阳陵泉穴位阿是超声波治疗联合抗炎脱水治疗急性腰椎间盘突出症,可使患者腰腿痛迅速缓解,功能显著改善,效果优于单纯抗炎脱水治疗。     

湖州市大学生性认知、性行为调查分析

目的了解大学生性认知、性行为、性教育及其需求状况,为今后开展性健康教育指引方向、提供理论依据。方法采用问卷方式调查湖州市各年级大学生572名。结果94．1％的大学生未接受过学校性教育,80．1％的大学生不知道易孕期。13．1％的大学生性知识来源于学校教育,42．5％的大学生表示想获得更多的性知识。大学生谈恋爱率为57．7％、性行为发生率为16．1％,其中14．8％的性对象不稳定。性行为原因依次为表达爱情（52．2％）、好奇冲动（30．4％）、迎合时代潮流（4．3％）、经济原因（1．1％）。结论大学生谈恋爱已是一种普遍行为,且有一定比例的大学生有异性间的性行为,比5年前调查结果升高;当代大学生性知识非常缺乏,性观念发生了较大转变。大学生性问题应引起学校重视,高校应对大学生进行积极的性教育,加强引导大学生树立正确的恋爱观、性观念和性行为。     

长冷缺血时间对心脏移植供心超微结构的影响

 目的 观察长冷缺血时间对离体供心超微结构的影响,为临床心脏移植供体的合理利用提供资料。方法 将离体供心置于低温器官保存液（the University of Wisconsin solution,UW液）中保存,分别于冷缺血时间6、8、10、12及14 h取部分左心室心肌和冠状动脉在电镜下观察超微结构的变化。结果 供心缺血时间6 h,心肌细胞及冠状动脉内皮细胞超微结构基本正常。随着缺血时间的延长,心肌细胞及血管内皮细胞出现损伤性改变。供心缺血超过12 h,心肌肌丝断裂,心肌细胞出现局灶性坏死,血管内皮细胞完全脱落。结论 心肌超微结构的改变是衡量供心质量的重要指标。供心冷缺血时间10 h以内,心肌损伤程度较轻,供心可用于移植。缺血时间超过10 h,心肌超微结构出现不可逆损伤改变明显增多,供心将不宜用于移植。