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目的 研究缺氧时肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)膜电位、细胞质游离Ca2 及线粒体游离Ca2 的动态变化,探讨缺氧性肺血管收缩 (hypoxic pulmonary vasocontriction,HPV)的可能机制.方法 分离成年Wistar大鼠PASMCs进行体外培养,将PASMCs分为3组:分别负载荧光指示剂Di-8-ANEPPS (2 μmol/L)、Fluo-4/AM (4 μmol/L)和Rhod-5F (5 μmol/L).利用Na2S2O4 (2 mmol/L)的强还原特性,对细胞进行化学缺氧干预,在共聚焦显微镜下观察缺氧环境下细胞膜电位、细胞质Ca2 和线粒体Ca2 的动态变化.结果 用Na2S2O4对PASMCs施加缺氧刺激后,PASMCs细胞膜电位荧光强度迅速大幅度降低,继而迅速回升,于100 s时升至峰值且高于初始水平,随后逐渐下降低于初始水平;缺氧刺激后PASMCs细胞质Ca2 荧光强度缓慢增高,并呈持续增高趋势;PASMCs线粒体Ca2 荧光强度在缺氧刺激后迅速增高,持续约30 s后回降至低于起始值,随后开始回升,达到并逐渐高于起始值.结论 缺氧刺激PASMCs,导致膜电位、细胞质Ca2 和线粒体Ca2 呈特定模式的升高和降低的动态变化,除了细胞质Ca2 稳态失衡之外,线粒体Ca2 变化可能在HPV发生中也起着重要的作用. 相似文献
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BAPTA对去甲肾上腺素刺激的大鼠心肌细胞蛋白合成及c-fos和β-MHC表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)刺激导致的心肌细胞肥大中,钙信号通路和心肌细胞蛋白合成以及c—fos和β—MHC表达之间的关系。方法去甲。肾上腺素(10^-5mol/L)刺激原代培养的心肌细胞,细胞内钙离子络合剂BAPTA(20μmol/L)阻断钙信号通路,通过^3H—leucine掺入测定蛋白质合成,RT—PCR测定c—fos及β—MHCmRNA的表达.结果NE刺激组的心肌细胞^3H—leucine摄人量、c—fos及β—MHC的表达均显著高于正常对照组(P〈0.01),BAPTA阻断后明显降低(P〈0.01),单纯BAPTA阻断组的^3H—leucine摄入量和β-MHC的表达低于正常对照组(P〈0.01),在正常对照组及单纯BAPTA阻断组未见c—fos明显表达。结论Ca^2+信号通路不但参与NE刺激引起的心肌细胞蛋白合成增加、c-fos及β—MHC的过度表达,且在正常心肌细胞蛋白质合成及β—MHC表达中也起重要作用。 相似文献
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糖尿病脑梗塞(Diabetic Cerebral Infarction,DCI)是糖尿病的急重症,亦是糖尿病患者致死致残的重要原因.本文选自1992年10月~1997年12月我院收治的糖尿病脑梗塞患者364例,对其CT特点,临床表现及防治作初步探讨. 相似文献
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目的:研究大鼠心肌肥厚时,钙依赖的蛋白激酶和蛋白磷酸酶在心肌细胞膜、细胞浆和细胞核的分布规律,以探讨核钙信号与核反应在心肌肥厚发生过程中的病理生理意义。方法:制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型、差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核,同位素32P掺入法测激酶活性,无机磷生成显色法测定蛋白磷酸酶活性。结果:腹主动脉缩窄术后4周大鼠心肌显著肥厚,伴有明显的血液动力学异常。与正常对照组相比较,腹主动脉缩窄心肌肥厚组心肌细胞核钙调素蛋白激酶(CaMK)活性增加1.011倍(p〈0.001),膜升高40.16%(p〈0.001),胞浆不变(p〉0.05);心肌细胞核钙调神经磷酸酶(Calcineurin)活性增加43.57%(p〈0.05),膜和胞浆增加无显著性(P〉0.05)。正常组和腹主动脉缩窄心肌肥厚组心肌细胞CaMK和Calcineurin活性分布为核〉膜〉胞浆(p〈0.01)。结论:腹主动脉缩窄心肌肥厚时核内钙依赖的CaMK和Calcineurin活性增加,提示压力超负荷时细胞核内钙调节的蛋白磷酸化和去磷酸化水平增高,可能在介导心肌肥厚的发生中起重要作用。 相似文献
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缺氧对肺动脉内皮细胞和平滑肌细胞分泌血管活性肽的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
用放射免疫测定和免疫组化法缺氧对培养的小牛肺动脉内皮细胞(PAEC)和肺动脉平滑肌细胞(PASM)自分泌心钠素(ANP)、血管紧张素Ⅱ(ATⅡ)和内源性洋地黄因子(EDLF)的影响。无氧培养24h末,PAEC分泌ANP减少43.5%(P〈0.001),ATⅡ和EDLF呈明显负相关(r为-0.88和-0.786,P〈0.01),细胞内ANP阳性颗粒也显著减少(P〈0.001);PASM分泌ANP无显 相似文献
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缺氧对平滑肌细胞生长特性,细胞内游离钙及环磷酸腺苷浓度的影响 总被引:7,自引:2,他引:5
文中报道了缺氧条件下培养的肺动脉平滑肌细胞(PASM)的形态特点、生长曲线和蛋白质含量的变化,测定了缺氧时PASM游离钙浓度([Ca^2+])和环磷酸腺苷(cAMP)含量的变化。主要结果与结论如下:(1)培养的PASM能在2%O2缺氧条件下生长,其光镜形态、生长情况与细胞蛋白质含量与21%O2常氧条件下相似;(2)向PASM的无钙细胞悬液中发别通入0%O2、3%O2和5%O21min,细胞内[Ca 相似文献
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