四川省社区卫生技术人才现状的调查与思考

目的了解四川省社区卫生技术人才现状,为加强社区卫生技术人才建设和医学院校医学人才培养提供参考依据。方法对四川省12个社区卫生服务中心(站)进行问卷调查和个别座谈,了解卫生技术人才的基本情况并进行统计分析。结果四低:学历低、职称低、社会评价低、员工满意度低;四少:全科医生少、护理人员少、防保人员少、经费投入少;一旧:部分医务人员观念陈旧。结论改善职工待遇,调动工作热情;重视企业文化,增强吸引力;加大培训力度,提高专业素养;建立激励措施,招揽优秀人才;加强综合管理,提升团队素质。     

内皮细胞型一氧化氮合成酶基因多态性与川崎病并冠状动脉损伤易感性的相关性

目的 探讨内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因多态性与中国汉族儿童川崎病(KD)并冠状动脉损伤(CAL)的相关性.方法 将南京市儿童医院收治的69例KD患儿作为KD组,体检健康的同龄儿童90例作为健康对照组.KD组69例中CAL 39例,无冠脉损伤(NCA)30例.以eNOS基因第4内含子VNTR(4或5个27 bp的碱基重复序列)多态性为检测位点,采用PCR结合30g/L琼脂糖电泳方法检测各组的基因型,统计基因频率.硝酸还原法检测各组血浆NO水平.采用SPSS 10.0软件进行统计学分析.血浆NO水平以(x)±s表示,各组儿童的基因型和基因分布频率差异采用x2检验.结果 KD组血浆NO水平(37.08±23.45)μmol/L高于健康对照组(34.15±16.8)μmol/L(P<0.05),CAL组(50.64±25.25)μmol/L高于NCA组(26.64±5.32)μmol/L(P<0.01),而各组基因型频率和等位基因频率无统计学差异(x2=2.534.0.212 Pa>0.05).结论 eNOS基因VNTR多态性和KD的发病及CAL间无相关,而血浆NO水平在KD血管炎和CAL的发生过程中可能起一定作用.     

FL转基因细胞的构建及膜型FL对U937细胞的体外促增殖效应

目的构建稳定表达人膜型FL分子的转基因细胞株,观察膜型FL和可溶性FL对单核细胞性(M5型)白血病细胞株的体外促增殖效应。方法利用PCR方法克隆人FL全长基因,继而重组入逆转录病毒表达载体pEGZ-Term,转染包装细胞293T,用含有完整重组逆转录病毒颗粒的293T细胞培养上清感染L929细胞,筛选获得Zeocin抗性的转基因细胞。采用RT-PCR和流式细胞仪表型分析等方法进行鉴定。MTT法分析了L929/FL细胞和可溶性FL体外刺激U937细胞的增殖效应。结果成功构建了稳定表达人膜型FL的转基因细胞L929/FL,膜型FL在体外能够有效促进U937细胞增殖,而可溶性FL并不能有效促进U937细胞的体外增殖。结论成功构建了稳定表达人膜型FL的转基因细胞,并且提示膜型FL在白血病发病机理中可能具有重要作用。     

人Flt3全长基因的克隆及其逆转录病毒表达载体的构建

目的克隆人Flt3全长基因,构建PGE/Plt3逆转录病毒表达载体。方法以人骨髓cDNA等基因文库为模板,采用分段克隆、人工PCR延伸及PCR连接等方法,获得了人Flt3全长基因,并构建Flt3基因的逆转录病毒表达载体。结果成功克隆Flt3全长基因和构建PGEZ/Flt3逆转录病毒表达载体。结论F1t3全长基因克隆及构建逆转录病毒表达载体的成功,为构建Flt3转基因细胞和制备抗人Flt3单克隆抗体和研究Flt3的生物学功能奠定了物质基础,也为低丰度和长片段基因克隆提供了有价值的经验。     

激发型CD40单抗5C11对白血病细胞来源树突细胞的诱导作用及生物学特性

目的　探讨激发型CD40 单抗 5C11对白血病细胞来源的树突细胞 (DC)的诱导作用及其生物学特性的影响。方法　激发型CD40 单抗 5C11联合不同的细胞因子组合诱导白血病细胞分化为DC ,通过显微镜形态分析 ,流式细胞仪表型分析 ,活细胞计数 ,IL 6、IL 12ELISA定量检测及混合淋巴细胞反应和细胞毒性实验等细胞生物学、免疫学方法对其进行研究。结果　白血病患者外周血或骨髓的白血病细胞 ,在经激发型CD40 单抗 5C11联合不同的细胞因子组合培养后 ,能诱导成为大量成熟的DC ;形态学观察呈现典型的DC特征 ;流式细胞仪检测证实细胞表面上调性表达CD40 、CD80 、CD83 、CD86等分子 ;白血病细胞分化为DC后 ,IL 6分泌量减少 ,IL 12分泌量增加 (P <0 .0 5 ) ;同种异体混合淋巴细胞反应也显示 ,诱导的DC具有很强的刺激同种异体T细胞增殖的能力 ,这种增殖的T细胞对白血病细胞具有一定的杀伤作用。结论　激发型CD40 单抗 5C11联合细胞因子能诱导白血病细胞分化为功能性DC。这可能在白血病的过继免疫疗法中具有潜在的应用价值。     

嵴内型室间隔缺损55例介入治疗临床分析

目的：探讨偏心型封堵器在嵴内型室间隔缺损（ventriculap septal defect,VSD）介入治疗中的临床应用及风险分析。方法：将2011年1月—2015年2月在本院心脏中心进行介入治疗的嵴内型VSD患儿按所使用封堵器大小分为封堵器型号≥7 mm组及封堵器型号≤6 mm组,分析两组术前合并主动脉瓣脱垂等情况、手术时间、X线曝光时间、术后并发症情况等。结果：与封堵器型号≤6 mm组比较,封堵器型号≥7 mm组VSD直径明显偏大,术前合并主动脉瓣脱垂例数明显增加,手术时间及X线曝光时间明显延长,术后严重并发症明显增加,差异具有显著性。结论：随嵴内型VSD直径的增大,术前合并症、手术风险及难度、术后严重并发症明显增加。对需选择偏心型封堵器型号≥7 mm的病例介入封堵治疗时应谨慎。     

转化生长因子-β1与冠状动脉支架内再狭窄关系的探讨

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1血浆水平及TGF-β1基因-509C/T单核苷酸多态性(SNP)与重庆地区汉族人群经皮冠状动脉介入治疗术后支架内再狭窄(ISR)发生的关系。方法回顾性纳入冠状动脉支架术后行冠状动脉造影随访的患者368例,根据复查造影的结果将其分为ISR组152例和无再狭窄(NISR)组216例。酶联免疫吸附试验检测血浆TGF-β1水平,采用聚合酶链反应-限制片段长度多态性及基因测序的方法检测TGF-β1基因-509C/T多态的基因型。结果 TGF-β1基因-509C/T多态的3种基因型和等位基因分布频率ISR组和NISR组差异均有统计学意义(P0.05),TT基因型和T等位基因在ISR组所占比例显著增加,与NISR组差异有统计学意义(P0.05);血浆TGF-β1水平ISR组高于NISR组,差异有统计学意义(P0.05),ISR组TGF-β1基因-509C/T多态TT和CT基因型携带者血浆TGF-β1水平均显著高于NISR组,差异有统计学意义(P0.05),各组内TT基因型血浆TGF-β1水平均高于CC和CT基因型,CT基因型又高于CC基因型,组内比较差异均有统计学意义(P0.05)。Logistic回归分析显示,TT基因型、T等位基因(CT+TT基因型)和血浆TGF-β1是ISR发生的独立危险因素(OR值分别为1.82、1.61和2.01,P0.05)。结论高血浆TGF-β1水平、TT基因型及T等位基因携带者显著增加ISR的风险。     

Graves’病患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达及其意义

目的分析Graves′病(Graves′disease,GD)患者外周血T细胞表面膜型CD28及血清中可溶性CD28的表达水平,探讨CD28分子在GD免疫病理机制中的作用。方法选取105例GD患者为试验组,67例健康者为对照组,通过溶血及流式细胞术检测所有受试对象外周血T细胞表面膜型CD28的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中可溶性CD28的含量。结果试验组外周血CD4+CD28+T细胞为(23.367±8.562)%,CD8+CD28+T细胞为(10.156±3.114)%,较对照组[分别为(30.786±5.143)%和(17.200±3.624)%]显著减少(P<0.0.5、P<0.0.1),血清中可溶性CD28水平观察组[(2.35±0.58)μg/L]较对照组[(0.53±0.23)μg/L]显著增加(P<0.01)。结论共刺激分子CD28很有可能参与了GD的免疫病理机制。     

人可诱导的共刺激分子转基因细胞的构建及其对B细胞产生抗体的影响

目的构建含人可诱导共刺激分子（ICOS）基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达人ICOS基因的L929细胞株,并初步研究ICOS对B细胞产生抗体的影响。方法采用RT-PCR方法从扁桃体激活的T细胞总RNA中扩增出ICOS cDNA,双酶切装入逆转录病毒载体pGEZ-Term,与辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达ICOS分子的L929细胞株;采用RT-PCR和流式细胞仪分析ICOS的分子表达,ELISA法研究ICOS信号对B细胞体外产生抗体的作用。结果成功地构建了含ICOS基因的重组逆转录病毒载体;筛选获得能稳定高表达人ICOS分子的L929转基因细胞,ICOS在PWM体外培养体系中,能有效地促进B细胞生长及IgG的分泌。结论 ICOS是CD28家族的新成员,在机体免疫应答过程中起着重要的作用。     

某减肥软胶囊的减肥功能实验研究

[目的]研究某减肥软胶囊的减肥功能。[方法]采用预防肥胖模型法,设空白对照组、模型对照组和3个受试样品组。受试样品的人体推荐量为每天2g／60kg体重,动物实验剂量设置为0．17、0．33、1．00g／kg·bw组,分别相当于人体推荐摄入量的5、10、30倍。[结果]空白对照、模型对照、0．17、0．33、1．00g／kg·bw各组增重结果分别为：（202．0±17．3）、（250．5±17．4）、（223．0±19．0）、（225．9±16．1）、（227．2±16．2）g;体内脂结果分别为：（10．9±2．6）、（16．6±3．6）、（12．9±3．1）、（13．8±3．3）、（13．6±2．3）g。[结论]实验结果表明．经口给予大鼠某牌减肥软胶囊42d后．各组大鼠总摄食量无明显差异,低、中、高剂量组大鼠体重明显低于模型对照组（P〈O．05或P〈0．01）,低剂量组能显著降低大鼠的体内脂重（P〈0．05）．提示该减肥软胶囊具有一定的减肥作用。