斑蝥素对肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制

目的:探讨不同浓度斑蝥素(cantharidin,CTD)对肝癌细胞HepG2细胞增殖、凋亡以及其可能机制。方法:应用长时间细胞观察及功能分析系统(IncuCyte~(TM) ZOOM)以及克隆形成实验,分析药物处理后肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测CTD对肝癌细胞HepG2凋亡的影响。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测技术,检测CTD处理后,HepG2细胞pro半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及聚二磷酸腺苷核糖多聚酶(PARP)蛋白表达的变化以及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2),蛋白激酶B(Akt)磷酸化水平的变化。采用长时间细胞观察及功能分析系统检测ERK1/2抑制剂(PD98059),磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂(Wortmannin)与CTD共处理对HepG2细胞抑制作用的变化。结果:CTD在2.5μmol·L~(-1)时就能够明显抑制HepG2细胞的生长,但不出现明显凋亡。CTD 5μmol·L~(-1)时HepG2的生长几乎完全受到抑制,流式细胞术结果显示,HepG2细胞凋亡率达40.4%。同时Western blot结果显示CTD 5μmol·L~(-1)组细胞pro Caspase-3蛋白表达明显降低,Cleaved PARP蛋白表达明显上升,说明CTD 5μmol·L~(-1)组会出现细胞凋亡,与流式结果相符。CTD能够促进ERK磷酸化,但不能促进Akt磷酸化。结论:CTD 2.5μmol·L~(-1)具有抑制HepG2细胞生长的作用,5μmol·L~(-1)时能够促进HepG2细胞凋亡,提示CTD既具有抑制细胞生长作用,也具有一定的细胞毒作用。CTD能够促进ERK磷酸化,但不能促进Akt磷酸化。     

中国和巴西临床新生隐球菌格鲁比变种菌株的种群和基因型比较分析

目的了解新生隐球菌格鲁比变种(Cryptococcus neoformans var.grubii)临床菌株在国内和巴西多位点微卫星位点定型(multilocus microsatellite typing MLMT)的种群分布特征,探讨并分析两国新生隐球菌格鲁比变种MLMT基因型差异。方法对已鉴定的69株新生隐球菌格鲁比变种进行DNA提取,采用3个微卫星位点(CNG1、CNG2、CNG3)的正反序列引物对相应的微卫星位点基因片段进行扩增后测序;测序后计算出每一菌株位点基序重复数(CNG1对应TA重复,CNG2对应GA重复,CNG3对应CAT重复);结合不同基序重复数判定各菌株的基因型。应用SPSS 11.5统计软件进行统计学分析。结果在33株被MLMT基因分型的国内新生隐球菌grubii变种菌株中有5种基因型被鉴定,其中29株为MLMT-17,占87.88%;而在36株巴西临床菌株中有10种基因型被鉴定,其中19株为MLMT-13,占52.78%。结论两国间新生隐球菌格鲁比变种临床菌株的主要基因型分布存在显著差异。巴西临床菌株的基因型分布表现为多样性。     

古方护肤与新自然主义

在肌肤容易敏感的春夏之交，自然养护主义再次与具有东方灵感的“古方”不期而遇。不管是专柜还是美容会所，各大美容品牌的古方保养品争奇斗艳，仿佛又将现代女人拉回用澡豆洗脸，黄瓜敷面的自然年代。     

高位硬膜外阻滞治疗儿童扩张型心肌病2例

儿童扩张型心肌病(DCM)预后很差,1年生存率为75 %,5年生存率为60 %[1],心衰晚期用常规药物提高心功能效差.为探索有效治疗办法,我们应用高位硬膜外阻滞尝试治疗儿童DCM 2例,现报道如下.     

47例肺癌病人外周血NK细胞杀伤活性的检测

作者观察了47例原发性支气管肺癌病人NK细胞杀伤活性及其手术与免疫增强剂对NK细胞活性的影响。结果显示:肺癌病人外周血NK细胞活性明显低于健康对照(P相似文献   

新生隐球菌格鲁比变种国内菌株的多位点微卫星灶分型

目的 应用多位点微卫星灶分型（MLMT）对国内6个城市分离出的新生隐球菌格鲁比变种（Cryptococcus neoformans var.grubii）进行基因分型,了解该变种的国内基因型分布特征。方法 提取已鉴定的43株新生隐球菌格鲁比变种DNA,用PCR 对3个微卫星位点（CNG1, CNG2, CNG3）的基因片段进行扩增后测序.再计算每一菌株位点基序重复数（CNG1对应TA重复,CNG2对应GA重复,CNG3对应CAT重复）;据基序重复数判定各菌株的基因型。结果 所有43株菌中,MLMT-17型占83.72%, 该型在临床和环境的菌株中分别占86.67%, 70%。MLMT-39,-40是新发现的基因型。结论 在我国,MLMT-17是最常见的新生隐球菌格鲁比变种基因型,普遍存在于临床和环境菌株中。表明国内临床新生隐球菌病的感染菌株主要源于本土环境菌株。     

新生隐球菌格鲁比变种临床株与环境株微卫星基因型的小鼠毒力实验研究

目的 了解巴西新生隐球菌格鲁比变种(C. neoformans var.grubü)多位点微卫星定型(multilocus microsatllite typing,MLMT)在临床和环境中的分布特点,探讨不同微卫星型的新生隐球菌格鲁比变种临床株和环境株的毒力差异.方法 根据多位点微卫星分型技术对分离自巴西的40株(17株临床株和23株环境株)新生隐球菌格鲁比变种进行分型,筛选出临床株及环境株中分布占优势的菌株,应用小鼠毒力试验分别对其进行毒力检测,通过发病情况及病理切片比较毒力差异.结果 40株格鲁比变种共鉴定出11种微卫星型,临床株中的优势菌株为MLMT-13型,共9株,占临床株的52.9%(9/17),环境株中的优势菌株为MLMT-36型,共10株,占环境株的43.5%(10/23);小鼠毒力试验结果显示MLMT-13型感染小鼠后发病率为100%,而MLMT-36型发病率为7.5%,且病理结果也存在明显差异.结论 格鲁比变种在从环境迁徙到宿主的过程中,毒力随环境的变化发生了改变,该变化也可在其微卫星重复序列上体现出来.该实验证明新生隐球菌格鲁比变种的分布及来源与微卫星型之间存在相关性,临床株MLMT-13型和环境株MLMT-36型之间存在着显著毒力差异.

Abstract：

Objective To investigate the genetic relation between Cryptococcus neoformans var.the clinical strains in MLMT - 13 genotype and the environmental strains in MLMT - 36 genotype. Methods Multilocus microsatellite typing (MLMT) method was applied for the genotype analysis in our study.Through this method, we recognized two genotypes that distinguish a majority of clinical and environmental strains. In order to compare virulence between the two types, we chose to infect BALB/c mice (6 weeks,female) with 9 MLMT-13 strains and 10 MLMT-36 strains intravenously. Results Forty( 17 clinical and 23 environmental isolates) were analyzed. Of 17 clinical strains, 9 belonged to a major type of MLMT-13 (52.9%). They were mainly isolated from clinical specimens. About 43.5% of strains from the environment belong to a major type of MLMT-36, which are indigenous to environments and which were not isolated from clinical samples. The mortality rate and pathological changes of the above mice were observed during two months after injection. The results showed that the mortality rate of mice infected with MLMT-13 strains was 100%, while the mortality rate with MLMT-36 strains was 7. 5%. The pathological sections showed that lesions of MLMT-13 infected mice appeared in the brain, lungs, liver and kidneys, while the lesions of MLMT-36 infected mice only appeared in the brain. Most brains of MLMT-13 infected mice were distorted,and both the number and size of lesions in such brains were much larger than those of MLMT-36 infected mice. Conclusion Our study illustrated the virulent difference between MLMT-13 and MLMT-36, which are isolated from patients and environment respectively. The results inferred that some genetic changes, such ss microsatellite repeats, might occur between environmental and clinical isolates through their environmental adaptation progress.     

带着老伴儿找浪漫

岁月悠悠,转眼间我已与老伴儿牵手走过了四十个春秋。婚后的生活趋于平淡,每天为了生活而奔波忙碌,渐渐地,浪漫已经远离了我们的生活,成了难见的奢侈品,生活也变得越来越枯燥无趣。退休后有了许多闲瑕之时,回想起年轻时与老伴儿一起逛马路,一起郊游,一起踏青、望秋,我有了带着老伴儿去寻找浪漫的想法。