IFN-γ和IL-4对乳腺癌细胞MCF-7生长及雌激素受体亚型影响的观察

目的:探讨干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)对人乳腺癌细胞株MCF-7的生长特性及雌激素受体(ER)亚型表达的影响。方法:以不同浓度IFN-γ(50、100和150μg/L)或IL-4(5、10和25μg/L)分别作用MCF-7细胞24、48、72和96h,MTT法检测细胞的增殖水平。选择100μg/L IFN-γ或10μg/L IL-4作用细胞96h(M/IFN-γ或M/IL-4),蛋白质印迹法检测ERα和ERβ的蛋白表达,流式细胞术分析细胞周期,RT-PCR检测凋亡抑制基因mRNA表达。结果:与对照组相比,IFN-γ作用96h后,细胞增殖活性受到抑制(100μg/L组P=0.000,150μg/L组P=0.003),G0～G1期细胞比例增多(P=0.003),S期减少(P=0.005),ERβ蛋白表达水平增加,P=0.038。IL-4作用96h后,细胞增殖活性增强(10μg/L组P=0.006,25μg/L组P=0.002),G0～G1期细胞比例减少(P=0.008),S期增多(P=0.007),ERβ蛋白表达水平减少(P=0.021),凋亡抑制基因的表达水平增加,P值分别为0.002、0.000和0.004。结论:辅助性T淋巴细胞1型(Th1)类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4可分别促进或抑制ERβ表达,进而抑制或促进肿瘤细胞生长;Th1/Th2偏移对乳腺癌细胞生长特性的作用,可能与改变ER亚型表达比例有关。     

转化生长因子β的研究进展

1978年，De Larco与Todaro在小鼠肉瘤病毒转化的细胞条件培养基中鉴定出SGF(sarcoma growth factor)，因其具有转化细胞特性，又被称为转化生长因子(transforming growth factor，TGF)，包括两个成分：α和β。二者在分子组成、受体结构和生物学活性上有很大差异，分属不同的蛋白家族。现已发现TGF-β实际上是由许多具有共同生物学特性的信号分子组成     

GHOST软件在现代医学影像设备维修中的应用

本文通过分析现代医学影像设备工作站的特点,以PHILIPS CV型DSA为例,简要阐述备份维修用计算机的配置,GHOST软件备份系统程序硬盘的方法以及应用过程中注意的问题.     

免疫学PBL授课模式初探

PBL教学开展日益广泛,但在具体实施中出现了许多问题.通过总结医学免疫学PBL教学模式的经验,提出PBL与LBL取长补短,选准PBL授课内容,根据内容适时调整侧重点,并提出营造讨论氛围的具体做法,以供探索PBL的医学教育改革者参考.     

卵巢癌细胞IL-6、IL-8分泌与他莫西芬敏感性及MAPK、Akt活性和ER特异性位点磷酸化水平的关系

目的:分析比较4种常见的人上皮性卵巢癌细胞系(A2780、CAOV-3、SKOV-3和ES-2)IL-6、IL-8分泌与他莫西芬(TAM)敏感性及MAPK、Akt活性和雌激素受体(ER)特异性位点磷酸化水平的关系,探讨IL-6、IL-8诱导卵巢癌细胞对内分泌治疗产生耐药的机制。方法:RT-PCR及ELISA法检测IL-6、IL-8的表达,MTT法分析卵巢癌细胞对TAM的敏感性,免疫印迹法测定MAPK、Akt活性及ER特异性位点的磷酸化水平。结果:(1)4种卵巢癌细胞除A2780细胞外均组成性分泌IL-6和IL-8,二者转录水平与其蛋白水平基本一致;(2)4种卵巢癌细胞对TAM的敏感性不同,其中A2780细胞最敏感,CAOV-3、SKOV-3和ES-2细胞则有不同程度的耐药性,其耐药倍数分别为4.99、3.76和2.66;(3)4种卵巢癌细胞的MAPK、Akt活性存在差异,CAOV-3细胞的二者活性最强,SKOV-3细胞的MAPK活性弱于ES-2细胞,而其Akt活性则强于ES-2细胞,A2780细胞未检测到二者有活性;(4)ER的第167位丝氨酸(Ser167)在四种卵巢癌细胞中均存在不同程度的磷酸化,ER的第118位丝氨酸(Ser118)除A2780细胞外亦存在不同程度的磷酸化。结论:卵巢癌细胞IL-6、IL-8的自分泌水平与其对TAM的敏感性呈负相关,与其MAPK、Akt活性和ER特异性位点(Ser167、Ser118)的磷酸化水平相一致。     

瘦素对实验性自身免疫性甲状腺炎影响的实验研究

目的研究瘦素在诱发实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）形成中的影响。方法采用C57BL／6J小鼠在外源性瘦素干预下诱发EAT，观察小鼠甲状腺组织病理改变、淋巴细胞增殖水平、脾细胞培养上清中IFN-γ和IL-4水平以及血清中甲状腺过氧化物酶抗体（TPO—Ab）、甲状腺球蛋白抗体（Tg—Ab）和瘦素水平。结果小鼠经外源性瘦素干预后，其血清中瘦素水平高于EAT组和对照组，实验性自身免疫性甲状腺炎的发病率和甲状腺组织中炎细胞浸润程度也较直接诱发EAT组明显增高。诱发EAT两实验组间比较，脾细胞增殖水平未见明显差异，但瘦素干预组脾细胞培养上清中IFN-γ水平较EAT组明显升高（P=0．000），而IL-4水平则低于EAT组（P=0．000）。两实验组小鼠血清中TPO—Ab和Tg—Ab水平均明显高于未诱发EAT对照组，但两组间比较均未见明显差异。结论瘦素的前炎症作用在实验性自身免疫性甲状腺炎的发生、发展中有重要免疫调节作用。     

IL-17A可以促进卵巢癌的腹腔转移

目的:探讨白细胞介素（IL）-17A对卵巢癌（OvCa）腹腔转移的影响。方法:以C57BL/6为遗传背景的野生型 （WT）小鼠和IL-17A 缺陷（IL-17A-/-）小鼠为研究对象，腹腔注射同基因小鼠OvCa细胞系ID8，检测内源性IL-17A对 OvCa腹腔种植瘤生长的影响。应用MTT法检测不同浓度的重组小鼠IL-17A（rmIL-17A）对ID8细胞增殖的影响；应用划 痕实验检测不同浓度的rmIL-17A对ID8细胞迁移能力的影响；应用Transwell侵袭实验检测不同浓度的rmIL-17A对ID8细 胞侵袭能力的影响。结果:与IL-17A-/-小鼠相比，WT小鼠腹腔内肠系膜、腹膜后淋巴结、脾脏和肾脏表面等处均见密 集瘤结节转移灶，且腹腔内瘤结节数量显著增多（均P＜0.01）。体外实验结果显示，与对照组相比，不同浓度的 rmIL-17A对ID8细胞增殖无影响（均P>0.05）；与对照组相比，10 ng/mL的rmIL-17A作用6 h后可促进ID8细胞迁移，1 ng/mL和10 ng/mL的rmIL-17A作用12 h后可显著促进ID8细胞迁移（均P＜0.05）；与对照组相比，干预24 h后，1 ng/mL和10 ng/mL的rmIL-17A对ID8细胞的侵袭能力均有促进作用（均P＜0.05）。结论:IL-17A可以促进卵巢癌的腹腔 转移。     

雌激素受体亚型对乳腺癌MCF-7细胞生长及微环境中Th平衡的影响

目的:研究雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型对人乳腺癌细胞MCF-7的生长及Th1/Th2类细胞因子分泌的影响。方法:采用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中ERα或ERβ的表达,获得ERα/ERβ不同表达状态的MCF-7细胞。应用MTT法、流式细胞术、RT-PCR法分别检测MCF-7细胞的增殖、细胞周期和凋亡抑制基因的表达,ELISA法检测细胞上清中IFN-γ和IL-4的分泌水平。结果:经RNA干扰后MCF-7细胞的ERα或ERβ蛋白表达水平分别下降了(77.7±3.3)%和(68.3±2.1)%。与对照组相比,ERα基因沉默后,MCF-7细胞生长减慢(P<0.05),受阻于G0～G1期,凋亡抑制基因XIAP的表达水平降低为对照组的(43.0±2.0)%,IFN-γ分泌水平增加至对照组的(1.89±0.34)倍;ERβ基因沉默促进MCF-7细胞的生长(P<0.05),S期细胞比例增加,凋亡抑制基因Bcl-2、Bcl-xl、XIAP的表达水平分别升高至对照组的(1.28±0.21)、(1.61±0.32)和(1.65±0.29)倍,IFN-γ分泌水平降低为对照组的(28.0±4.0)%。结论:ER亚型的表达状态可影响MCF-7细胞的生长,并通过调节IFN-γ的自分泌水平诱导微环境发生Th偏移。     

IL-17A促进卵巢癌顺铂耐药的体外机制探讨

目的:探究IL-17A促进卵巢癌顺铂（DDP）耐药的体外机制。方法:应用流式细胞术分析外源性rhIL-17A对DDP诱导的A2780（顺铂敏感卵巢癌细胞株）和OVCAR3（顺铂耐药卵巢癌细胞株）细胞的凋亡和周期分布变化的影响,并以IL-17RAmAb进行相应的阻断实验。结果:rhIL-17A对A2780和OVCAR3细胞的凋亡无显著影响;但可显著降低DDP对A2780和OVCAR3细胞的毒性作用（P<0.05）,以IL-17RAmAb进行阻断实验可部分消除rhIL-17A对DDP诱导的A2780和OVCAR3细胞凋亡的阻滞作用（P<0.05）。rhIL-17A对A2780和OVCAR3细胞的周期分布无显著影响;但可显著抑制 DDP诱导的A2780和OVCAR3细胞周期阻滞（P <0.05）,使A2780和OVCAR3细胞的G0/G1期比例增加,G2+S期比例减少。结论: IL-17A可通过IL-17RA抑制DDP诱导的卵巢癌细胞凋亡,同时可抑制DDP诱导的卵巢癌细胞周期阻滞,从而加剧以DDP为基础的卵巢癌化疗耐药性。     

Th1型/Th2型细胞因子对蜕膜细胞活性及其泌乳素分泌的影响

目的：研究Th1型／Th2型细胞因子对人孕早期蜕膜细胞活性及泌乳素（PRL）分泌的影响。方法：蜕膜细胞活性采用MTT法进行检测，蜕膜组织分泌PRL的活性采用放免法（RIA）进行分析测定。结果：Th1型细胞因子IFNγ低浓度时（1－10ng/ml)对蜕膜细胞活性及PRL分泌有促进作用（P＜0．05），高浓度时（100－1000ng/ml) 则有抑制作用（P＜0．01）。而Th2型细胞因子IL－4在一定浓蔗人（1－10ng/ml) 可明显促进蜕膜的上述功能（P＜0．01）。结论：Th1型／Th2型细胞因子可能是通过影响蜕膜细胞活性及PRL分泌而在早期妊娠中起重要的免疫调节作用。