兔骨髓间充质干细胞的培养及生物学特性

目的建立体外分离、培养扩增兔骨髓间充质干细胞的最佳条件，观察其生物学活性及诱导分化，初步探索MSC在生物材料支架内的增殖情况。方法采用Percoll(比重1．073)或Ficoll(比重1．007g／ml)分离骨髓单个核细胞，以含10％的胎牛血清DMEM／F12作为培养体系，用体外贴壁培养的方法筛选MSC。用流式细胞仪测定其细胞周期，以MTT比色法测定细胞增殖活性并计算其倍增时间，检测MSC的细胞化学特征，体外观察MSC在特定的诱导体系下向成骨和脂肪细胞分化，并用电镜观察了MSC在生物材料支架内的生长情况。结果用此方法分离培养的MSC经9天左右的淘汰培养即可得到第一代的细胞。细胞化学染色碱性磷酸酶、苏丹黑B、过氧化物酶阴性，非特异性酯酶、糖原呈阳性。培养扩增的细胞形态呈梭状，具有较快的增殖能力，细胞倍增时间在19．4h。2～8代的细胞呈均质状，且具有较好的多向分化的能力。结论分离培养的兔骨髓间充质干细胞在体外具有多向细胞分化的能力，具有人骨髓间充质干细胞生物学特性。     

肺腺纤维瘤与合并腹膜后副神经节瘤2例临床病理分析

1病历摘要例1,男,35岁。因咳嗽行CT检查发现左肺下叶圆形弧立结节,直径2cm。10年前因外伤,行B超检查发现腹膜后肿物,10年内肿物生长缓慢,左肺下叶及腹膜后肿物一起切除。术后未给予其他治疗。19个月随访未见异常。例2,男,27岁。因咳嗽行CT检查发现右肺中叶圆形结节,直径10cm,行     

首尔国立大学临床研究体系对我国建设研究型病房的启示

通过对首尔国立大学医院临床研究体系的架构及临床试验研究中心体系结构、功能运转等方面分析,发现其在产学研衔接、建立独立运营实体机构、功能设置等方面形成了相对完备的体系.医院通过建立开放的全球医学研究平台与"健康+科技"集群,与公立、国家和私人研究机构开展创新合作,提升了临床和基础研究水平,对我国开展研究性病房建设具有参考...     

百会穴压灸治疗痰浊中阻型眩晕45例

眩晕是由风阳上扰、痰浊中阻等导致脑窍失养,脑髓不充引起的以头晕目眩、视物旋转为主要表现的临床常见症状,多见于椎-基底动脉系统血管病、梅尼埃综合征等。近年来,笔者采用百会穴压灸的方法进行治疗,现报告如下。1临床资料45例患者均为门诊病人,其中男15例,女30例;年龄22~63岁;病程3~7天。临床均见反复或突发性头晕,天旋地转感,甚则如坐舟车,伴头痛头胀,颈部僵直,部分可伴恶心呕吐,胸闷心慌,视物不清,耳鸣等交感神经症状。排除可引起眩晕的其他颅内疾病。患者舌淡红,苔白腻,脉濡,辨证属痰浊中阻型。2治疗方法患者取正坐位,医者将百会穴处…     

川贝内金散配合针刺治疗百日咳40例

百日咳又名“鹭鸶咳”,系由风寒外袭,肺气团阻所致。采用川贝、内金散,配合针刺治疗,简便易行,简介如下。1一般资料本组病例为防止婴幼儿过多哭闹,便于治疗。选择3岁以上幼儿。40例中由门诊病案随机选出27例,住院病13例,其中男26例,女14例。年龄最小3岁,最大8岁,3~6岁占总例数65%。2治疗方法2.1川贝内金散每包3 g,每次1包,每天3次,白糖水送下。(协议处方:川贝、鸡内金等量混合,研细末,分包,每包3 g)2.2针刺少商穴,拇指内侧,爪甲角一分取之。针尖略向上方,速刺半分,出血而终。四缝穴,手部食、中、环、小四指掌面第一指节与第二指节横纹缝中取…     

曲古抑菌素A对前列腺癌LNCaP细胞抑制效应的细胞信号通路研究

目的：研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A（1SA）对前列腺癌LNCaP细胞抑制作用的细胞信号机制。方法：半固体培养检测TSA对前列腺癌细胞集落形成能力的影响；Westem Blot分析细胞蛋白乙酰化水平、细胞信号通路蛋白及细胞周期相关蛋白的表达。结果：TSA能够有效杀伤前列腺癌LNCaP细胞，在较低浓度即能抑制具有集落形成能力的细胞；药物处理使细胞内蛋白乙酰化水平增高，乙酰化组蛋白H3积累，多种细胞信号通路的相关蛋白如雄激素受体、HER2、Raf-1、Akt、CDK4等呈时间依赖性和剂量依赖性被清除。结论：TSA能够同时阻断对细胞生长具有重要作用的多条细胞信号通路，从而对前列腺癌LNCaP细胞发挥抑制作用。     

乌体林斯辅助治疗老年复治性肺结核的疗效分析

目的探讨乌体林斯注射液作为免疫调节剂辅助治疗老年复治性肺结核的有效性和安全性。方法将60例老年肺结核复治性患者随机分为试验组和对照组两组,各30例两组均予联合治疗,试验组加用乌体林斯:比较两组空洞率、X线病灶吸收率、痰菌阴转率及用药后不良反应发生情况。结果治疗3个月后试验组痰菌阴转率为96.7%、X线病灶吸收好转率为93.3%、空洞闭合率为86.3%,对照组分别为73.3%、66.7%和65.0%;实验组各项指标均优于对照组;统计学处理有显著性差异(P<0.05),不良反应两组结果相近(P>0.05)。结论乌体林斯与化疗药物联合应用可提高复治老年肺结核病的疗效,使用安全。     

肺癌细胞中survivin与紫杉醇作用的实验研究

目的:探讨survivin与紫杉醇作用机制可能的关系.方法:分别以体外药物敏感试验(MTT法)、流式细胞术、Western blot观察紫杉醇作用后,A549细胞生长抑制情况以及细胞周期、凋亡、survivin蛋白等指标的变化.结果:紫杉醇作用12h后,A549细胞才表现出生长抑制,并且这种抑制具有明显的时间依赖性(P＜0.05).不同作用浓度对A549生长的影响也存在差异,在同一时间点,紫杉醇浓度越大,细胞存活率越低(P＜0.05).时间依赖性实验中,10nM紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞一样,早在4h即已出现,延长作用时间(48h或更长),表达反而降低,但凋亡所占比例则与作用时间呈正相关(P＜0.05).浓度依赖性实验中,不同浓度紫杉醇同样表现出有效诱导survivin表达的能力(P＞0.05),G2/M期阻滞则呈浓度依赖性特点,凋亡比例于10nM达高峰;survivin表达与G2/M期阻滞、凋亡无相关性(P＞0.05).结论:紫杉醇对A549的生长抑制作用呈时间依赖性,紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞及凋亡的关系可因紫杉醇浓度而不同.时间依赖性实验中,10nM紫杉醇诱导的survivin表达与G2/M期阻滞变化趋势基本一致,但与凋亡相反,提示有丝分裂生存途径可能是肺癌细胞通过survivin拮抗紫杉醇诱导凋亡的一种重要方式,抑制survivin表达可能成为增加肺癌细胞对紫杉醇敏感性的有效途径.     

经维甲酸处理的瘤细胞作为“瘤苗”的免疫治疗实验

为观察维甲酸对体外培养的肿瘤细胞免疫原性的影响,本实验将经维甲酸处理的小鼠前胃癌(MFC)细胞作为活瘤苗,进行了免疫接种及免疫治疗的实验观察。结果表明免疫接种小鼠可完全排斥再次接种未经药物处理瘤细胞的生长,同时伴有体内细胞免疫反应增强。将该瘤苗用于荷瘤小鼠的免疫治疗,可使肿瘤生长速度减慢,荷瘤生存期明显延长,提示维甲酸可通过改变肿瘤细胞的免疫原性介导机体抗瘤反应。     

逆转录病毒介导的IL6/IL2融合基因转导对小鼠B16细胞粘附及转移特性的影响

为探讨细胞因子之间对肿瘤细胞修饰的协同效果及融合基因用于肿瘤细胞转染的可行性,我们采用PCR及柔性接头连接的方法,构建了含人IL6/IL2融合基因的逆转录病毒载体,将其转染小鼠B16黑色素瘤细胞,对基因转导后细胞的粘附及实验性肺转移能力进行了测定.实验结果表明,融合基因转导的细胞所分泌产生的融合蛋白具有IL-2和IL-6两种细胞因子活性.对肿瘤细胞体外粘附及转移能力的测定结果表明,经融合基因修饰的B16细胞对细胞外基质的主要成分Laminin及重组基底膜Matrigel的粘附得到抑制,同时伴有实验性转移能力降低.这一结果提示,融合基因转导可明显降低肿瘤细胞的转移能力,其机制可能与基因修饰细胞相关生物学特性的改变及其对机体的免疫刺激活性有关.