大鼠抑制素α亚基启动子的克隆及其在睾丸支持细胞中转录活性的初步分析

目的克隆大鼠抑制素α亚基(Inhα)启动子,建立报告基因表达系统,初步分析其在睾丸支持细胞中的转录活性。方法采用降落聚合酶链反应(touch-down PCR)法,从大鼠睾丸组织DNA中扩增三段不同长度的Inhα启动子序列(395、606、775 bp),克隆入载体pEGFP-N1,构建绿色荧光蛋白的报告基因系统,转染大鼠睾丸支持细胞,荧光显微镜观察绿色荧光表达情况。结果成功构建带有Inhα启动子的绿色荧光蛋白报告基因表达系统。三段重组质粒转染支持细胞后均可见绿色荧光表达,但荧光量和强度均弱于CMV启动子,其中395片段最为显著。结论 Inhα启动子在睾丸支持细胞中的转录活性弱于CMV启动子,可能与启动子本身的序列结构有关。     

少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN的表达及其与eNOS的相关性研究

目的 通过测定少弱精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(endothelial nitric oxide syn-thase traffic inducer,NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的表达,探讨其与少弱精子症发病的相关性.方法 采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)检测11例严重少弱精子症患者(病例组)和7例正常男性(正常组)睾丸组织中NOSTRIN mRNA的表达;分光光度法测定睾丸组织中eNOS的活性;应用硝酸还原酶法测定睾丸组织上清液中NO代谢产物NO2-/NO3-水平.结果 病例组患者睾丸组织中NOSTRIN mRNA呈弱表达(0.312±0.076),明显低于正常组(0.793±0.082,P<0.01);病例组患者睾丸组织eNOS活性[(33.73±3.58)U/mg]与正常组[(17.69±3.84)U/mg]比较显著增强(P<0.01);病例组患者睾丸中NO2-/NO3-水平为(48.56±8.49)μmol/L,较正常组(25.37±9.61)μmol/L显著升高(P<0.01)f病例组睾丸组织中NOSTRIN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与NO代谢产物NO2-/NO3-同样呈负相关(r=-0.61,P<0.01).结论 少弱精子症患者睾丸组织中NOSTRIN表达水平降低,eNOS活性增强,NO2-/NO3-水平升高,可能与少弱精子症的发生有着相关性.     

米非司酮人体药代动力学特征与抗孕激素作用的临床效果

米非司酮药代动力学特征是吸收快、半衰期长（25～30h）和微摩尔血清浓度高。血清转运蛋白-α1-酸性糖蛋白（AAG）调节米非司酮血清药代动力学。终止早孕的剂量效应与紧急避孕完全不同：10mg米非司酮就可以达到紧急避孕的目的，且具有线性药代学特征。然而，≥100mg剂量米非司酮用于终止妊娠导致血清AAG的饱和且呈现非线性药代特征。表明米非司酮不同的生物学机制介导了不同的临床效果。综述米非司酮在人体药代动力学特征。特别是与临床不同效果的关系。     

CatSperl在小鼠睾丸发育过程中的动态表达及与人精子活力的关系

目的 研究CatSper1 mRNA在小鼠睾丸发育过程中的动态变化，并探讨CatSper1蛋白表达与精子运动的关系。方法 采用荧光实时逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）相对定量法检测CatSper1mRNA在出生后11、15、18、21、25、28、35、42、56和120d龄C57BL／6小鼠（每天龄3只）睾丸中的表达；分别从4例正常精液标本中用四层密度梯度Percoll（浓度分别为95％、76％、57％和47．5％）离心分离出高活力和低活力精子，用于Western Blot定量检测CatSper1蛋白的表达。结果CatSper1mRNA在18d龄小鼠睾丸开始表达，在25和28d龄表达上调明显，分别为21d龄表达水平的2．95和7．59倍。自42d后上调缓慢，至成年小鼠时达到最高水平。CatSper1蛋白在每例标本高活力精子中的表达量均显著高于低活力精子（P〈0．05）。结论 CatSper1与精子活力特性有关，为进一步研究CatSper家族各成员间的关系和确切功能提供参考依据。     

Mahoganoid基因的研究进展

近年来,常染色体隐性基因Mahoganoid已成为科学家的研究热点之一。该基因编码蛋白Md具有特征的C3HC4RING结构域,基于这一结构,认为该蛋白可能是作为一种E3泛肽连接酶起作用。Mahoganoid基因在生物体内广泛分布,并具有多个等位基因,在色素形成,体质量控制,神经系统退行性变及生殖系统方面都发挥重要的生理和病理作用。介绍Mahoganoid基因特点、基因表达、基因功能及分子作用机理。为以后的课题研究提供方向。     

尿激酶型纤溶酶原激活因子对小鼠获能精子线粒体膜电位的影响

目的:检测尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)体外对小鼠获能精子线粒体膜电位的影响。方法:采用线粒体膜电位荧光染料JC-1,利用流式细胞仪和荧光显微镜检测分别与uPA(实验组)和BWW液(对照组)共孵育0、5、15、30、60min的小鼠获能精子线粒体膜电位状态。结果:①在uPA作用第5、15min时,精子体内平均荧光强度较作用前显著增加,高膜电位的精子数量百分率相应增加(P<0.05)。②与对照组相比,实验组在uPA作用5、15min时的高膜电位精子数量百分率,以及作用15、30、60min时的精子线粒体膜电位平均荧光强度显著增加(P<0.05)。结论:uPA在体外可以增加小鼠获能精子的线粒体膜电位,并使高膜电位状态维持一段时间,为获能精子提供充足的能量供应。     

输精管结扎术对远期心血管疾病的高危因素影响的调查及分析

目的了解输精管结扎术与中老年男性远期心血管疾病相关危险因素的关系。方法对湖北省和江苏省共2 352例中老年男性进行生殖健康现状调查,对其进行体格检查和心血管疾病相关高危因素的实验室检查,并调查参与者的输精管结扎情况。结果在50~60岁和60~70岁年龄段,结扎人群的血糖均值低于非结扎人群(P0.05);在50~60岁年龄段,结扎人群的血糖和高密度脂蛋白的异常率低于未结扎人群(P0.05);在≥70岁年龄段,结扎人群血糖的异常率低于未结扎人群(P0.05)。结论输精管结扎对心血管高危因素无不良影响,但可能对血糖有一定的影响,进一步研究有待开展。     

中国育龄夫妇生育力下降的影响因素及防治策略

<正>近年来我国不孕不育人口数不断增长[1],国内随之涌现出大量生殖医学专科医院,综合医院生殖中心的门诊量也以惊人速度增长,这些现象表明,生育问题困扰着越来越多的育龄夫妇。本文就我国育龄夫妇生育力下降的影响因素进行综述,并探讨其防治策略。     

巨细胞病毒感染后雄鼠生殖细胞凋亡与睾丸NF-κB p65的表达研究

目的研究鼠巨细胞病毒（MCMV）感染对雄鼠睾丸生殖细胞凋亡的影响,探讨睾丸组织核因子-κB亚基p65亲和肽（NF-κBp65）表达与生殖细胞凋亡的相关性。方法建立小鼠睾丸MCMV感染模型,设立实验组与对照组,分别于感染不同时段（小鼠一个生精周期内）,采用Hoechst33258染色法对小鼠睾丸组织生精小管及间质细胞进行凋亡检测,采用免疫组织化学sP法检测小鼠睾丸组织内NF-κB065的表达。结果睾丸间质细胞的凋亡率在MCMV感染的第1天开始增多（P〈0．05）,第4-6天达到高峰。第21天、第38天恢复正常。生精小管管周肌样上皮细胞的凋亡数在感染的第1天开始增多（P〈0．05）．第6—9天达到高峰（P〈0．001）,第21天、第38天也恢复正常。生精细胞的凋亡数在感染的第2天显著增加（P〈0．05）,第6天达到高峰（P〈0．001）;第14天起逐渐恢复正常。睾丸组织中NF-κBp65表达在MCMV感染第2天起开始增加（P〈0．05）,感染的第6—9天增至高峰（P〈0．001）,随感染时间延长逐渐下降,第21～28天恢复正常。结论MCMV急性感染可诱导睾丸生殖细胞凋亡,其凋亡程度与睾丸组织NF-κBp65表达呈正相关。提示NF-κBp65参与并调控了MCMV感染所致的生殖细胞凋亡,这可能是MC-MV感染的致病机制及机体抵御MCMV感染机制之一。     

1145例捐精者筛查结果与未完成捐精流程原因分析

目的:分析人类精子库的接待和招募工作质量,以及精源不足的问题。方法:本研究对湖北省人类精子库2011年9月至2012年4月的1 145例捐精者的招募工作进行统计,对捐精者淘汰原因进行分析,并对合格而未捐精者进行面谈和电话回访。结果:1 145例捐精者中,学生551例(48.12%),社会人群594例(51.88%);参与第一次精液质量检查后未继续捐精503例(43.93%),其中学生202例(占学生筛查人数36.67%),社会人群301例(占社会筛查人群50.67%);两次精液质量筛查均不合格432例(37.73%);实验室检查不合格45例(3.93%),其中解脲脲原体阳性16例;通过精液筛查和实验室检查的合格捐精者165例(14.41%),未能完成整个捐精流程21例(12.73%),最终完成捐献流程的捐精者144例。结论:人类精子库普遍存在筛查合格率低、捐精完成率低,如能让捐精者有效地完成捐精流程,有利于提高捐精者合格率及降低精子库的运行成本;通过接待时的面谈和电话回访对他们不能按流程完成捐精的原因进行分析表明,精子库需加强招募工作及捐精者第一次来精子库时的讲解,提高捐精者对精子库的满意度和信任度,以提高捐精者完成捐精流程率。