谷胱甘肽S-转移酶P1蛋白在肺癌中的表达及临床病理学意义

 目的探讨肺癌中谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)表达水平及临床病理学意义。方法应用免疫组织化学方法检测50例原发性肺腺癌、20例癌旁正常组织、11例肺转移性腺癌和14例肺鳞癌组织石蜡标本GSTP1蛋白表达水平,观察其与肺癌患者临床病理学参数的关系。采用Westernblot检测8例新鲜肺腺癌、鳞癌及癌旁组织中GSTP1蛋白表达水平。结果GSTP1在32例原发性肺腺癌及9例肺鳞癌组织中呈高表达,明显高于癌旁正常组织表达水平（x²=6.665,P=0.010;x²=3.927,P=0.048）,但在原发性肺腺癌、肺鳞癌及肺转移性腺癌中表达无明显差异（P>0.05）。GSTP1表达与肺腺癌患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度及淋巴结转移无明显相关性（P>0.05）,但与肺腺癌患者预后呈负相关(χ²=4.171,P=0.041)。Westernblot证实GSTP1在肺腺癌及鳞癌中表达明显高于癌旁组织(t=2.545,P=0.023;t=2.337,P=0.035)。结论GSTP1在肺癌中表达上调,并与肺腺癌患者预后相关。     

利用光波导模式光谱生物传感器研究二级结构对固-液界面DNA杂交动力学的影响

目的探讨探针和靶分子二级结构对基因芯片杂交过程的影响,并完善基因芯片设计方法,提高基因芯片的重复性和特异性。方法应用二级结构分析软件Mfold设计3对25-mer完全互补的具有不同二级结构的探针和靶分子（P0T0、P3T3、P4T4）及1对尾端有2个碱基错配的探针和靶分子（P4T3）。制备醛基化传感器芯片,将终浓度为1、2、5、10、20μmol／L的探针分别固定在芯片上,与浓度为5μmol／L的N,N＇-对羧苄基吲哚三菁（Cy5）标记靶分子杂交,荧光图像扫描仪检测确定最佳杂交探针浓度;以最佳探针浓度构建芯片,分别与终浓度为0．1、0．2、0．5、1．0、2．0、5．0lamol／L的Cy5标记靶分子杂交,荧光图像扫描仪检测确定最佳杂交靶分子浓度;同时用光波导模式光谱生物传感器（OWLS）实时监测其杂交过程。以0．4％SDS和0．1％NaOH分别处理杂交后芯片10、20、30、60min,荧光图像扫描仪检测芯片再生稳定性。控制靶分子进样速度和杂交时间分别为15μl／h、7h和180μl／h、0．5h,OWLS测定杂交复合物质量、杂交效率和反应速率。结果荧光图像扫描结果显示,最佳杂交探针和靶分子浓度分别为10、1μmol／L,传感器芯片构建成功且具有再生稳定性。15μl／h、7h和1800a／h、0．5h条件下,P0T0、P3T3、P4T4、P4T3杂交复合物的质量（ng／cm^2）分别为45和30、43和20、40和13、42和18;杂交效率（％）分别为40．9和27．3、39．1和18．2、36．4和11．8、38．2和16．4;杂交7h时的反应速率常数[K,10’L／（m01．s）]值分别为0．465、0．247、0．081、0．247。     

GE light speed 16 CT故障维修三例

故障现象1:当机器关机后重新启动扫描程序应用时中断,查看日志,发现报PIANG DARC错误,无法进行正常扫描.     

α-2,3-唾液酸糖基转移酶ST3家族分子序列生物信息学分析

目的 比较探讨人类a-2,3-唾液酸糖基转移酶家族成员间的同源性,探讨其进化规律及其与功能相关性.方法 利用网上数据库和生物信息学软件对核酸及蛋白质序列进行同源比较、结构域分析和进化树绘制.结果 人类a-2,3-唾液酸糖基转移酶家族一级结构、二级结构均有较高的同源性,系统进化分析显示其各成员来源于同一祖先并在不同时期分野.结论 各成员来自于同一祖先的同一家族.其进化方式属于趋异性进化,家族中各亚型底物特异性可能与其糖基化位点相关.     

TNF-α对人肝癌细胞系CD15和CD15s含量及细胞侵袭性的影响

目的检测TNF-α对人肝癌细胞系中CD15、CD15s和ST3GaL糖基转移酶含量及细胞侵袭能力的影响。方法应用Western blot方法检测TNF-α作用前后人原发性肝癌细胞系HepG-2和人高转移肝癌细胞系SMMC-7721中CD15,CD15s和ST3GaL糖基转移酶含量的变化,Transwell检测TNF-α作用前后HepG-2、SMMC-7721细胞侵袭力的变化情况。结果 TNF-α作用后,HepG-2细胞系CD15含量较对照组下降(P<0.05),CD15s含量较对照组明显上调(P<0.05),ST3GaL糖基转移酶家族蛋白(6种)中ST3GaL-Ⅱ和ST3GaL-Ⅳ表达较对照组明显上调(P<0.05),其他4种ST3Gal-Ⅰ、ST3Gal-Ⅲ、ST3Gal-Ⅴ和ST3Gal-Ⅵ的表达无明显变化(P>0.05),细胞侵袭力提高(P<0.05)。SMMC-7721细胞系CD15、CD15s含量较对照组无明显改变(P>0.05),细胞侵袭力无显著变化(P>0.05)。结论在人原发性肝癌细胞系HepG-2中,TNF-α可能通过影响CD15、CD15s、糖基转移酶ST3GaL-Ⅱ、ST3GaL-Ⅳ的含量促进细胞侵袭能力。     

小鼠肝腹水细胞膜表面糖表达谱

目的 探讨肝癌腹水细胞膜表面糖链表达谱.方法 用H22细胞制备肝腹水模型鼠,36只小鼠随机分为正常组(6只)和肝腹水组(20只),注射10 d后抽取腹水提取癌细胞用吖啶橙荧光标记,应用凝集素芯片检测细胞膜表面糖表达谱.结果 肝癌腹水细胞膜表面有大量唾液酸、乙酰葡萄糖、乙酰半乳糖、甘露糖和半乳糖糖链表达,正常小鼠肝组织中只有多聚乳糖胺类型糖链表达.结论 肝癌发生过程中伴随着细胞膜糖链类型和数量增加,唾液酸、乙酰葡萄糖、乙酰半乳糖、甘露糖和半乳糖糖链表达增加与肝癌变发生发展紧密相关.     

应用凝集素芯片检测兔组织细胞膜表面糖谱

目的 应用凝集素芯片检测兔不同组织细胞膜表面糖链类型.方法 分别用不同胶原酶消化兔的脾、肾和肝组织,对消化后得到的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖谱.结果 兔不同组织细胞表面糖链类型不同:肝细胞特异亲和的凝集素为LTL,脾细胞为SNA和WGA,3种组织细胞共有DSL、MAL、AAL、STL.结论 肝细胞膜表面特有糖链为L-岩藻糖,脾细胞特有糖链为唾液酸,使用凝集素芯片检测细胞膜表面的糖链特异性为建立各种细胞膜表面糖谱提供依据.     

乌拉坦诱发BALΓ/C裸小鼠及杂合子小鼠肺肿瘤

我所实验肿瘤研究室对曾用乌拉坦(Urethane,氨基甲酸乙酯)麻醉的8只裸小鼠尸检时发现6只肺内出现肿瘤。其中一例肺肿瘤组织在同品系裸鼠皮下传代生长并转移。在此基础上,进一步试验了乌拉坦诱发BALB/C裸小鼠及带有裸基因的杂合子小鼠     

16层螺旋CT在诊断冠状动脉病变中应用价值

目的探讨16排螺旋CT在冠状动脉病变诊断中的价值。方法和材料对60例临床怀疑冠心病的患者进行心脏冠状动脉CT成像。男32例,女28例,年龄28￣76岁,平均54.8岁。所有患者进行了传统冠状动脉造影术做对照,分析16排螺旋CT冠状动脉成像检查的灵敏度、特异度。结果16排螺旋CT冠状动脉成像检查与冠状动脉造影相比,灵敏度为81.35%,特异度为96.43%。结论16层螺旋CT冠状动脉成像技术是一种无创、简便的检查方法,显示有临床意义的冠状动脉狭窄的准确性很高,作为一项非创伤性技术,是评价冠状动脉狭窄病变的重要筛选手段。     

C型乙型肝炎病毒基因SOEing法引入228位点突变

目的为获取乙型肝炎病毒(HBV)基因分型芯片病毒靶序列,对C型HBV第228位碱基进行点突变。方法通过不同基因型HBV全基因组的序列比对分析,显示基因型A,C,D,G在228位上的碱基为G,而基因型B,E,F,H为A,所以检测该位点的碱基类型可以实现HBV基因型的初步分型。结果将C型乙肝病毒第228位上的单位碱基由G突变为A,经测序后证明突变成功。结论重叠区扩增基因拼接法(SOEing)是一种简便引入点突变的方法,可以应用此法制备HBV基因分型芯片检测基因片段序列。