慢性骨髓增殖性疾病JAK2 V617F点突变与ETS2mRNA表达的关系

目的探讨慢性骨髓增殖性疾病（cMPDS）中JAK2V617F点突变的发生率、ETS2mRNA表达情况及其相关性。方法选择BCR／ABL阴性的cMPDs患者62例、慢性粒细胞性白血病（CML）20例、急性白血病（AL）10例和健康志愿者15例为研究对象;用RT—PCR技术检测其ETS2mRNA的表达水平,用AS-PCR筛选各组JAK2V617F点突变,以基因测序验证突变结果,分析ETS2mRNA表达水平在cMPDsJAK2V617F点突变阳性组与阴性组之间的差异。结果62例cMPDs患者中,44例患者检测到JAK2V617F点突变,其余18例及CML、AL、健康志愿者中未检测到该突变。ETS2mRNA表达水平在cMPDs组、CML组和AL组均显著高于健康志愿者。cMPDs组JAK2V617F点突变阳性病例ETS2mRNA表达水平明显高于突变阴性病例,差别有统计学意义（P=0．022）。结论大部分cMPDs患者存在JAK2V617F点突变;JAK2V617F点突变阳性cMPDs患者ETS2mRNA的表达水平高于阴性者。     

监测可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体在预测多发性骨髓瘤患者髓外浸润及预后中的作用

目的:探讨血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(soluble urokinase-type plasminogen activatorreceptor,suPAR)在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的表达、该数值与疾病预后相关因素(分期、年龄、髓外浸润、染色体异常、肾功能、C-反应蛋白、β2-MG等)的关系及其在预测疾病预后方面的临床意义。方法:采用酶联免疫吸附的方法检测40例MM患者和30例正常对照血清suPAR表达水平。结果:①无效组与缓解组、进步组血清suPAR表达比较差异有统计学意义(P<0.05);②生存期<2年组血清suPAR表达高于生存期>2年组(P<0.01);③除血红蛋白数值高低与suPAR数值无相关性外,分期、肾功能异常、C反应蛋白、β2微球蛋白、髓外浸润各组血清suPAR值均差异有统计学意义(均P<0.05);④应用logistic回归对诸因素与患者生存期间的关系进行分析,表明疾病分期、suPAR表达水平高是导致患者生存期不足2年的独立因素。结论:suPAR水平增高与MM疾病进展、生存期缩短、早期出现髓外浸润等因素有关,提示预后不良。     

急性髓系白血病患者中期因子基因表达与化疗耐药及预后的关系

目的：探讨中期因子（Midkine，MK）与急性髓系白血病（AML）患者预后的关系。方法：采用半定量逆转录一聚合酶链反应方法检测65例初治及复发AML患者、15例缓解期患者及15例正常人骨髓单个核细胞（MNCs）MK、mdr-1、bcl-2mRNA的表达，并采用蛋白印迹（Westernblot）法检测20例AML患者和5例正常人MNCs孵育24h后，培养基中MK的蛋白表达。结果：65例初治及复发AML患者中25例MK基因表达阳性，15例正常人MK基因表达均阴性。MK基因表达阳性患者的完全缓解（CR）率明显低于表达阴性者（分别为63．16％和93．55％，P〈0．05）；MK基因表达阳性患者的复发率（100％）明显高于表达阴性者（40．00％），P〈0．05。MK与bcl-2基因表达呈正相关（r=0．556，P〈O．01）。结论：AML患者白血病细胞可以产生MK，且MK阳性率的高低与AML病期相关，MK过度表达可能导致临床化疗耐药，是影响AML患者近期预后的重要因素之一。     

系统性红斑狼疮相关骨髓纤维化1例

患者,女性,27岁.主因间断性皮肤瘀点、瘀斑2年余,加重伴黑便10天,于2004年2月8日入院.两年前无诱因出现皮肤瘀点、瘀斑,伴鼻出血、牙龈出血和月经量增多.当时检查血象:白细胞(WBC)5.4×109/L,血红蛋白(Hb)120 g/L,血小板(PLT)5.0×109/L.当地医院考虑为特发性血小板减少性紫癜,给予大剂量静脉滴注丙种球蛋白(0.4 g·d-1·kg-1)治疗5天,PLT升至20×109/L,后改为泼尼松(50 mg/d)口服,PLT缓慢上升至230×109/L,出血表现完全消失,患者即自行停用泼尼松治疗.于入院前10天患者患上呼吸道感染后再次出现全身皮肤多发性瘀点、瘀斑,伴鼻出血、牙龈出血和柏油样黑便,当地查血常规示:PLT 4.0×109/L,遂急来我院.追问病史,患者近两年来,有明显脱发及间断性四肢大关节疼痛.     

游离丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫吸附试验不适用于粒细胞集落刺激因子动员的造血祖细胞捐献者的筛查

市售的酶联免疫试验试剂盒抗-丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原酶联免疫(ELISA)检测系统(Ortho Clinical Diagnostics, Raritan,NJ),能够检测患者感染HCV后窗口期的HCV核心抗原,即在产生HCV RNA后的1d～2d内检测到HCV核心抗原,灵敏度为94％,总的特异性为99％。由于作者关注的是自体或异体外周血祖细胞(PBPC)产品污染HCV的问题,作者在用HCV抗原试验筛查HPC捐献者时,发现HCV抗原阳性检出率较高。这一发现促使作者进一步研究应用细胞因子动员的患者的HCV抗原检测阳性率高的原因,这种增高是真正病毒复制所致还是检测HCV核心抗原试验方法干扰所致的问题。     

重组变构人TRAIL联合柔红霉素对白血病细胞诱导凋亡作用及其机制的研究

为了研究重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（recombinanat mutant human TRAIL, rmhTRAIL）单用及与柔红霉素（DNR）联合应用对白血病细胞株U937、K562的诱导凋亡作用及其机制，以正常人胚肺成纤维细胞株MRC-5作对照，采用MTT法检测体外培养的U937、K562白血病细胞株在rmhTRAIL单用和联合DNR作用下增殖的抑制效应；用半定量逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）法检测DNR处理前后白血病细胞TRAIL死亡受体和诱杀受体的mRNA表达水平。结果表明：rmhTRAIL对白血病细胞株U937、K562有较明显的抑制增殖作用，DNR与TRAIL联合对抑制肿瘤细胞具有协同性，与各药单独使用比较均有显著差异（P〈0．05）；经DNR作用后，U937、K562细胞的死亡受体DR4、DR5水平上调，而两种诱杀受体DcR1、DcR2表达未受影响。结论：在体外rmhTRAIL单用或与DNR联用均能明显抑制白血病细胞增殖，rmhTRAIL与DNR对白血病细胞的杀伤有协同作用。其诱导机制可能与U937、K562细胞死亡受体DR4、DR5表达水平上调有关。     

一种预防IgA过敏输血反应的新方法

1968年，一些研究者首次报道IgA过敏输血反应，发生率为1／20，000-47，000。输注完全没有IgA的血液和／或洗涤血细胞除去血液的IgA分子，能够预防IgA过敏反应，但有的患者不得不输注含有不同浓度IgA的血浆制品。尽管一些静脉用免疫球蛋白(IVIgG)已经被成功地用于易感染病人的治疗，但IgA过敏的风险总是不能被完全排除。事实上，所有市售的IVIgG制剂都对IgA的含量做了补充说明，并规定有抗一IgA或有过敏史的病人禁用。本文作者报道一种安全有效的预防IgA过敏输血反应的方法。     

myc拮抗基因Mad1、Mxi1和Rox在白血病细胞中的表达和突变

目的分析Madl、Mxil和Rox基因突变在白血病发病中的作用。方法利用逆转录．聚合酶链反应（1iT-PCR）、单链构象多态性（SSCP）分析及DNA序列分析技术检测了26例初治急性白血病（AL）患者、30名健康对照者和7种白血病细胞株中Madl、Mxil和Rox基因表达及突变情况。结果liT-PCR检测结果显示所有标本中均可检测到Madl、Mxil和Rox基因的表达；SSCP分析结果显示所有标本中有4个位点发生多态性改变：Madl中2个位点，Mxil和Rox中各1个位点。DNA序列分析显示所有标本中有9个位点发生错义突变：Madl中2个位点均发现于初治AL患者；Mxil中4个位点，其中3个位点发现于初治AL患者，1个位点发现于KGl细胞株；Rox中3个位点均发现于初治AL患者。26例初治AL患者Madl、Mxil和Rox基因的突变发生分别为2例、3例和3例。结论首次在AL患者细胞中发现Madl、Mxil和Rox基因突变，提示Madl、Mxil和Rox基因的突变可能与白血病的发病有关。     

铁代谢调节及其相关疾病

铁原子在氧化还原反应中能够转运电子,因此对许多生理过程必不可少.过去20年,遗传性铁过载、铁缺乏、铁分布异常致病基因的发现,以及对铁稳态相关调节机制的进一步研究,使我们对人类机体内铁稳态的认识更为深刻.现结合相关文献,就铁代谢、铁稳态调节机制及其相关疾病的研究进展进行综述.     

PTEN基因逆转白血病多因素多药耐药机制探讨

目的 研究分析野生型PTEN基因对多柔比星(阿霉素,ADM)耐药人红白血病细胞系K562/ADM多药耐药(MDR)逆转的作用机制.方法 将携带野生型PTEN基因的腺病毒载体(Ad-PTEN-GFP)或空载体(Ad-GFP)感染ADM耐药的K562/ADM细胞,流式细胞术检测感染效率,在感染3d内联合应用不同浓度的ADM、阿糖胞苷(Ara-C)或三氧化二砷(As2O3),通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,根据IC50计算药物逆转倍数,观察PTEN基因对上述化疗药物MDR逆转作用.同时采用荧光定量PCR检测PTEN、NF-kB、MDR1、MDR相关蛋白(MRP)及凋亡相关基因Bcl-2、BcbxL及Bax水平变化,蛋白质印迹检测PTEN、Akt、p-Akt、P65水平变化.结果 以感染复数为200感染第3天后,Ad-PTEN-GFP感染与化疗药物联合作用组K562/ADM细胞增殖抑制率、凋亡率均高于Ad-GFP与化疗药物联合作用组(P＜0.05),PTEN感染能增加K562/ADM对ADM、Ara-C、As2O3的敏感性,逆转倍数分别为3.80、2.65、2.64.与Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP感染K562/ADM细胞3d后p-Akt与P65蛋白表达下调,NF-kB、MDR1、Bcl-2、Bcl-xL mRNA表达下调,Bax mRNA表达上调.结论 野生型PTEN基因可能通过抑制Akt信号转导通路进一步调控下游信号分子,通过下调NF-kB、MDR1、Bcl-2及上调Bax等多种信号分子逆转K562/ADM细胞的多药耐药.